哺乳動物卵巢上存在有數(shù)以百萬計的各級卵泡，在卵泡生長過程中，僅有1%左右卵泡能夠發(fā)育成熟并排卵，其余99%卵泡最終歸于閉鎖，極大的限制了優(yōu)良種畜的利用。在注重優(yōu)良品種培育的同時，優(yōu)良品種的利用已成為當(dāng)前生產(chǎn)中亟待解決的重要課題。采用激素超排技術(shù)和卵母細胞體外成熟技術(shù)僅僅能夠獲得多于正常發(fā)情的部分卵母細胞，而絕大多數(shù)卵母細胞都隨著卵泡閉鎖而流失，造成了優(yōu)良母畜資源的損失。尤其近年來，隨著輔助繁殖技術(shù)特別是核移植、轉(zhuǎn)基因技術(shù)的不斷完善，如何獲得大量優(yōu)質(zhì)的卵母細胞已成為制約新技術(shù)推廣和應(yīng)用的瓶頸。顆粒細胞凋亡是導(dǎo)致卵泡閉鎖的主要誘因。卵泡閉鎖在某種程度上是導(dǎo)致臨床多種動物不孕的原因。EGF在促進卵泡發(fā)育方面有重要的作用。目前，EGF通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路抑制山羊卵泡顆粒細胞凋亡的機制尚不清楚。該論文通過采集山羊卵巢并分離培養(yǎng)顆粒細胞，通過構(gòu)建顆粒細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激模型。研究EGF調(diào)控山羊卵泡顆粒細胞凋亡的作用，為臨床上獲取大量優(yōu)質(zhì)卵泡提供理論基礎(chǔ)。從屠宰場采集卵巢，收集3⁵mm卵泡中的顆粒細胞進行體外培養(yǎng)，通過撤除血清誘導(dǎo)細胞自發(fā)性凋亡，通過添加衣霉素（tunicamycin,... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：38 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

AnnexinV-FITC/PI染色法檢測體外培養(yǎng)條件下山羊顆粒細胞的凋亡率

山羊卵泡中的顆粒細胞，在體外培養(yǎng) 24色后，采用流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率。如圖M 均顯著的誘導(dǎo)了山羊卵泡顆粒細胞的凋亡，<0.05）。添加 10 ng/mL EGF 顯著的抑制了 24粒細胞凋亡（P<0.05）。雖然 48 h，10 ng/mL的抑制作用，但 24 h 時，EGF 對 TM 誘導(dǎo)的.05）。

圖 3-2 EGF 對 ATF4 mRNA 表達的影響Fig. 3-2 Effect of EGF on the Expression of ATF4 mRNRNA 表達的影響血清處理 24 h、48 h 顆粒細胞上 ATF4 mRNA10% FBS+5 μg/mLTM 處理 24 h、48 h 顆粒細照組（P<0.01）。經(jīng)無血清處理 24 h、48 h 顆 10 ng/mL EGF+無血清處理 24 h、48 h（P<0.0 h 顆粒細胞上 ATF4 mRNA 水平與處理 24 h 沒理 24 h、48 h 顆粒細胞上 ATF4 mRNA 水平分0 ng/mL EGF 處理 24 h、48 h（P<0.05）。但是，理 48 h 顆粒細胞上 ATF4 mRNA 水平與處理

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]EGF、顆粒細胞共培養(yǎng)對山羊體外成熟卵母細胞GSH含量及超微結(jié)構(gòu)的影響[D]. 寇鑫.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號：3124168