氟喹諾酮類藥物因其廣譜抗菌活性和較好的組織滲透性,廣泛應(yīng)用于系統(tǒng)性感染,尤其是用于治療呼吸系統(tǒng)和泌尿系統(tǒng)感染。FQs的毒性在臨床上存在中樞神經(jīng)系統(tǒng)不良反應(yīng)、胃腸道毒性、光敏反應(yīng)、軟骨毒性及腎臟毒性等。該類藥物產(chǎn)生的許多毒性都與氧化應(yīng)激具有一定的關(guān)系。腎毒性是FQs引起的潛在的、嚴(yán)重的毒性,但是腎毒性是否也與氧化應(yīng)激有關(guān)還不是很清楚。本試驗(yàn)選擇豬近端腎小管上皮細(xì)胞（LLC-PK1）為研究模型,研究了動(dòng)物專用FQs達(dá)氟沙星誘導(dǎo)腎損傷的機(jī)制,為臨床合理使用FQs并降低其引起的中毒性腎損傷提供一定的指導(dǎo)意義。通過細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察,細(xì)胞增殖抑制檢測(cè),凋亡率檢測(cè),初步研究達(dá)氟沙星對(duì)LLC-PK1細(xì)胞的毒作用。然后通過檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧ROS、脂質(zhì)過氧化物MDA,抗氧化酶SOD、CAT及GSH-PX的影響來探究達(dá)氟沙星對(duì)LLC-PK1細(xì)胞氧化還原系統(tǒng)的影響。另外,通過抗氧化劑GSH和NAC的預(yù)孵育作用,檢測(cè)抗氧化劑對(duì)達(dá)氟沙星誘導(dǎo)的LLC-PK1細(xì)胞毒性的保護(hù)作用。結(jié)果顯示,達(dá)氟沙星呈時(shí)間和劑量依賴性誘發(fā)體外培養(yǎng)的LLC-PK1細(xì)胞增值抑制,但是只有400μM孵育48h才對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生較大程度的凋亡,凋亡率為... 

【文章來源】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 立項(xiàng)依據(jù)
    1.2 氟喹諾酮類藥物的研究進(jìn)展
        1.2.1 氟喹諾酮類藥物的性質(zhì)
        1.2.2 氟喹諾酮類藥物的應(yīng)用
        1.2.3 達(dá)氟沙星
        1.2.4 氟喹諾酮類藥物的耐藥性
        1.2.5 氟喹諾酮類藥物的毒性
    1.3 氧化應(yīng)激與毒性
        1.3.1 機(jī)體氧化還原系統(tǒng)
        1.3.2 氧化應(yīng)激誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡機(jī)制
        1.3.3 氟喹諾酮類藥物毒性與氧化應(yīng)激的關(guān)系
2 材料與方法
    2.1 主要試劑及儀器設(shè)備
        2.1.1 細(xì)胞
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 主要試劑配制
    2.2 達(dá)氟沙星對(duì)LLC-PK1細(xì)胞毒性研究
        2.2.1 LLC-PK1細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2.2 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
        2.2.3 MTT法檢測(cè)LLC-PK1細(xì)胞活力
        2.2.4 熒光探針DCFH-DA法檢測(cè)LLC-PK1細(xì)胞ROS含量
        2.2.5 LLC-PK1細(xì)胞脂質(zhì)過氧化物（MDA）的檢測(cè)
        2.2.6 LLC-PK1細(xì)胞抗氧化酶SOD、GSH-PX及CAT活力檢測(cè)
        2.2.7 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)達(dá)氟沙星誘導(dǎo)LLC-PK1細(xì)胞凋亡
3 結(jié)果
    3.1 達(dá)氟沙星對(duì)LLC-PK1細(xì)胞形態(tài)上影響
    3.2 達(dá)氟沙星對(duì)LLC-PK1細(xì)胞活力的影響
    3.3 熒光探針DCFH-DA法檢測(cè)達(dá)氟沙星誘導(dǎo)LLC-PK1細(xì)胞ROS的產(chǎn)生
    3.4 達(dá)氟沙星對(duì)LLC-PK1細(xì)胞脂質(zhì)過氧化物（MDA）的影響
    3.5 達(dá)氟沙星對(duì)LLC-PK1細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘膚過氧化物酶（GSH-PX）、過氧化氫酶（CAT）的影響
    3.6 含硫基類抗氧化劑對(duì)LLC-PK1細(xì)胞抗氧化酶的保護(hù)作用
    3.7 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)達(dá)氟沙星誘導(dǎo)LLC-PK1細(xì)胞凋亡
4 討論
    4.1 ROS介導(dǎo)達(dá)氟沙星誘導(dǎo)LLC-PK1細(xì)胞毒性
    4.2 抗氧化酶對(duì)達(dá)氟沙星誘導(dǎo)細(xì)胞毒性的保護(hù)作用
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3122990