試驗以山羊顆粒細胞為研究對象,采集卵泡（φ2～5 mm）顆粒細胞進行無血清培養(yǎng)2 d后,用FSH、LH（2.5 IU/mL或1.25 IU/mL）和E₂（1 mg/L）單獨或聯(lián)合處理0～96 h,分別收集細胞和培養(yǎng)液,用放射免疫分析法（RIA）檢測培養(yǎng)液中孕酮（P₄）水平,用實時熒光定量PCR（qPCR）和蛋白免疫印跡（WB）技術(shù)檢測顆粒細胞孕酮相關(guān)基因和蛋白的表達。結(jié)果顯示,激素聯(lián)合或單獨處理24 h后,FSH/LH/E₂（2.5/2.5/1）組的孕酮水平與LH（2.5）組相當,均顯著高于其他4組（P<0.01）,然而,在處理48,72,96 h時間點,各組間均無顯著性差異（P>0.05）。FSH/LH/E₂（2.5/2.5/1）組處理后72,96 h的孕酮水平極顯著低于0,24 h（P<0.01）;FSH/LH/E₂（1.25/1.25/1）組與FSH（2.5）組的孕酮水平24 h顯著下降（P<0.05）,但48 h又顯著高于24 h（P<0.... 

【文章來源】：中國獸醫(yī)學(xué)報. 2020,40(08)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

生殖激素處理對山羊黃素化顆粒細胞孕酮(P4)水平的影響(字母不同代表差異顯著)

處理24 h的StAR表達量極顯著升高(P<0.01),隨后逐漸下降;處理48 h時的基因表達量極顯著高于72,96 h時的表達量(P<0.01);處理72 h的基因表達量極顯著低于48 h 的表達量(P<0.01),且顯著低于0 h的表達量(P=0.033);處理96 h的基因表達量極顯著低于0 h 的表達量(P<0.01)(圖2C)。2.3 山羊顆粒細胞中P450scc、HSD3B和CYP19A1蛋白的表達

FSH、LH和E2聯(lián)合或單獨處理細胞24 h后,應(yīng)用WB技術(shù)檢測各組細胞P450scc、HSD3B和CYP19A1蛋白表達量(圖3A)。FSH/LH/E2(2.5/2.5/1)組的P450scc蛋白表達量與對照組相比有升高的趨勢(P=0.060 4),與其他各組相比無顯著性差異(P>0.05,圖3B);FSH/LH/E2(2.5/2.5/1)組的HSD3B蛋白表達量極顯著高于其他組(P<0.01),而其他各組間無顯著性差異(P>0.05,圖3C);而CYP19A1蛋白表達量在6個組間均無顯著性差異(P>0.05,圖3D)。3 討論

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3122663