為了解近年來我國H3亞型禽流感病毒的生物學(xué)特性,本研究對從2009年～2013年禽流感流行病學(xué)監(jiān)測期間分離到的60株H3亞型禽流感病毒進(jìn)行了表面基因的序列分析,在此基礎(chǔ)上挑選具有代表性的毒株進(jìn)行全基因序列分析、抗原性分析及對BALB/c小鼠和SPF雞的感染性試驗,綜合評價我國家禽H3亞型禽流感病毒對家禽生產(chǎn)以及對我國禽流感綜合防控的影響。通過對不同時期、不同地點分離到的H3亞型禽流感病毒進(jìn)行表面基因的序列測定,發(fā)現(xiàn)病毒株主要以H3N2和H3N8亞型為主,但也存在少數(shù)的H3N1、H3N3、H3N6亞型禽流感病毒,說明H3亞型禽流感病毒的NA基因來源復(fù)雜,變異較大。全基因組遺傳演化分析表明,病毒基因組來源差異較大,除NS和N8NA基因外,其余基因均屬于歐亞分支,與我國及周邊國家、地區(qū)的諸多亞型禽流感病毒親緣關(guān)系密切,同源性較高,如Hl、H2、H4、H5、H6、H7、H9, H10、H11等。個別節(jié)段與人源、豬源及馬源的流感病毒同源性較高,提示有可能已經(jīng)發(fā)生基因重排�；蚍中徒Y(jié)果表明,我國H3亞型禽流感病毒基因型眾多,差異較大,說明其來源的復(fù)雜性。22株病毒的抗原性分析表明,分離到的H3亞型... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 禽流感病毒病原學(xué)
        1.1.1 禽流感病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能
        1.1.2 決定宿主特異性的分子基礎(chǔ)
        1.1.3 AIV致病性的影響因素
    1.2 禽流感的流行病學(xué)
        1.2.1 傳染源
        1.2.2 易感動物
        1.2.3 傳播途徑和傳播方式
        1.2.4 人、禽和豬間的H3型的關(guān)系
    1.3 水禽在禽流感傳播中的作用
    1.4 本研究的目的及意義
2 材料與方法
    2.1 試驗材料
        2.1.1 H3型禽流感病毒演化分析所用病毒
        2.1.2 H3亞型禽流感病毒的抗原性分析所用病毒
        2.1.3 H3亞型禽流感病毒對小鼠的致病性試驗所用病毒
        2.1.4 H3亞型禽流感病毒對SPF雞的致病性試驗所用病毒
        2.1.5 SPF雞胚和實驗動物
        2.1.6 主要試劑與試劑盒
        2.1.7 引物及參考序列
    2.2 試驗方法
        2.2.1 病毒基因組RNA提取及反轉(zhuǎn)錄
        2.2.2 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)與目的片段的回收
        2.2.3 禽流感病毒全基因的序列測定
        2.2.4 全基因序列的拼接與分析
        2.2.5 基因型劃定
        2.2.6 病毒特異性血清的制備
        2.2.7 交叉血凝抑制試驗
        2.2.8 抗原差異性分析
50)的測定">        2.2.9 雞胚半數(shù)感染量(EID₅₀)的測定
        2.2.10 小鼠感染與致病性試驗
        2.2.11 SPF雞感染與致病性試驗
3 結(jié)果
    3.2 H3亞型禽流感病毒遺傳演化分析
        3.2.0 PCR及序列測定結(jié)果
        3.2.1 HA基因的遺傳演化分析
        3.2.2 H3亞型AIV分離株NA基因遺傳演化分析
        3.2.3 內(nèi)部基因的遺傳演化分析
        3.2.4 基因型
        3.2.5 交叉HA-HI試驗結(jié)果
        3.2.6 r值結(jié)果
50)結(jié)果">    3.3 雞胚半數(shù)感染量(EID₅₀)結(jié)果
    3.4 H3亞型AIV對BALB/c小鼠感染與致病性試驗
        3.4.1 小鼠體重變化結(jié)果
        3.4.2 感染小鼠3天后臟器病毒分離結(jié)果
    3.5 病毒株對SPF雞感染性試驗結(jié)果
        3.5.1 感染雞臨床癥狀及排毒情況
        3.5.2 感染雞第3天臟器病毒復(fù)制情況
4 討論
    4.1 H3亞型病毒分離株的遺傳演化關(guān)系
    4.2 H3亞型病毒分離株的抗原性分析
    4.3 H3亞型病毒分離株對BALB/c小鼠的感染與致病性分析
    4.4 H3亞型病毒分離株對SPF雞的感染與致病性分析
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Isolation and characterization of H7N9 viruses from live poultry markets--Implication of the source of current H7N9 infection in humans[J]. SHI JianZhong,DENG GuoHua,LIU PeiHong,ZHOU JinPing,GUAN LiZheng,LI WenHui,LI XuYong,GUO Jing,WANG GuoJun,FAN Jun,WANG JinLiang,LI YuanYuan,JIANG YongPing,LIU LiLing,TIAN GuoBin,LI ChengJun,CHEN HuaLan.  Chinese Science Bulletin. 2013(16)
[2]2002—2009年中國華東地區(qū)家禽低致病性禽流感的病原學(xué)檢測與分析[J]. 趙國,劉曉文,錢忠明,薛峰,彭宜,彭大新,劉秀梵.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(01)
[3]我國家鴨及野鴨中正粘與副粘病毒的調(diào)查[J]. 郭元吉,王敏,金粉根,王平,朱既明,孟凡義,高淑琴,劉麗力,金俐,王永新,張志強(qiáng).  中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報. 1982(01)

博士論文
[1]PB1和PA基因與H5N1亞型流感病毒對哺乳動物的致病性有關(guān)[D]. 鐘功勛.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2010



本文編號：3113165