腸道黏膜不僅是機體自身與外環(huán)境接觸的最大界面,而且還具有選擇性滲透吸收營養(yǎng)物質(zhì)和防御腸道內(nèi)微生物及致炎因子入侵等的屏障功能。緊密連接作為腸黏膜屏障的重要組成部分,在維持腸道機械屏障完整性上發(fā)揮重要作用。然而,在現(xiàn)代畜牧生產(chǎn)中,諸多因素會誘導(dǎo)動物產(chǎn)生氧化應(yīng)激。氧自由基是許多致病因素引起腸黏膜損傷的共同環(huán)節(jié)。止痢草油（Oregano Essential Oils, OEO）因其含有高濃度的多酚組分而具有抑菌和抗氧化的作用,在改善氧化應(yīng)激對動物造成的危害中發(fā)揮作用。本試驗首先采用體外方法評價OEO的抗菌和抗氧化特性；隨后通過建立IPEC-J2細胞氧化應(yīng)激模型,研究在OEO預(yù)先處理的情況下氧化應(yīng)激對細胞緊密連接的影響；最后以Diquat為應(yīng)激原誘導(dǎo)大鼠氧化應(yīng)激,研究在OEO預(yù)先干預(yù)的情況下大鼠血清氧化還原狀態(tài)、腸道機械屏障功能和腸道微生物菌群,以期揭示OEO緩解動物氧化應(yīng)激的可能機理。主要結(jié)果如下：1.OEO體外抗氧化和抗菌特性研究。通過建立大鼠肝勻漿脂質(zhì)自氧化模型,測定VE、VC和OEO的脂質(zhì)自氧化率,結(jié)果表明VC、VE和OEO的抑制脂質(zhì)自氧化的IC50值分別為0.756mg/ml,0.21... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略語表
文獻綜述
    1 前言
    2 氧化應(yīng)激
        2.1 氧化應(yīng)激的概念及原因
        2.2 機體ROS來源
        2.4 機體的抗氧化防御系統(tǒng)
            2.4.1 酶系抗氧化系統(tǒng)
            2.4.2 非酶系抗氧化防御系統(tǒng)
    3 應(yīng)激對機體的影響
        3.1 應(yīng)激對胃腸道應(yīng)激激素分泌的影響
        3.2 應(yīng)激對腸道菌群的影響
        3.3 應(yīng)激對腸道緊密連接的影響
    4 緩解氧化應(yīng)激的主要方式
        4.1 自身調(diào)節(jié)
        4.2 外源抗氧化物質(zhì)的使用
    5 研究氧化應(yīng)激的模型
        5.1 動物模型
            5.1.1 LPS誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激模型
            5.1.2 DSS誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激
            5.1.3 Diquat誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激模型
        5.2 細胞模型
2O₂誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激模型">            5.2.1 H₂O₂誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激模型
            5.2.2 其它誘導(dǎo)氧化應(yīng)激的細胞模型
    6 植物提取物
        6.1 植物提取物的研究概況
        6.2 止痢草提取物
            6.2.1 止痢草提取物的主要功能
            6.2.2 止痢草提取物在畜牧生產(chǎn)中的作用
    7 研究目的與意義
試驗一 止痢草油體外抗菌抗氧化特性研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 試驗材料
        2.2 儀器設(shè)備
        2.3 實驗方法
            2.3.1 VC、VE、OEO對小鼠肝勻漿脂質(zhì)自氧化抑制效率的效果
            2.3.2 止痢草油體外調(diào)節(jié)食糜氧化還原狀態(tài)的研究
            2.3.3 止痢草油體外抑菌效果的研究
        2.4 數(shù)據(jù)分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 VC、VE、OEO對小鼠肝勻漿脂質(zhì)自氧化抑制效率
        3.2 不同濃度OEO對發(fā)酵液中ROS含量的影響
        3.3 OEO對三種細菌生長曲線的影響
    4 討論
    5 小結(jié)
試驗二 止痢草油對氧化應(yīng)激IPEC-J2細胞上皮緊密連接的干預(yù)作用
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 試驗材料
            2.1.1 細胞系
            2.1.2 主要試劑
        2.2 儀器設(shè)備
        2.3 實驗方法
            2.3.1 IPEC-J2細胞復(fù)蘇
            2.3.2 細胞的常規(guī)培養(yǎng)
            2.3.3 OEO對IPEC-J2增殖的影響
2O₂損傷模型的建立">            2.3.4 H₂O₂損傷模型的建立
2O₂損傷IPEC-J2的干預(yù)作用">            2.3.5 OEO對H₂O₂損傷IPEC-J2的干預(yù)作用
            2.3.6 熒光定量和westernblot檢測緊密連接蛋白基因和蛋白表達水平
2O₂損傷IPEC-J2中緊密連接蛋白分的影響">            2.3.7 免疫熒光檢測OEO對H₂O₂損傷IPEC-J2中緊密連接蛋白分的影響
    3 數(shù)據(jù)處理
    4 結(jié)果與分析
        4.1 OEO對IPEC-J2增殖的影響
2O₂損傷模型的建立">        4.2 H₂O₂損傷模型的建立
2O₂損傷IPEC-J2的干預(yù)作用">        4.3 OEO對H₂O₂損傷IPEC-J2的干預(yù)作用
2O₂誘導(dǎo)下OEO對緊密連接蛋白基因和蛋白表達水平的影響">        4.4 H₂O₂誘導(dǎo)下OEO對緊密連接蛋白基因和蛋白表達水平的影響
2O₂誘導(dǎo)下OEO對緊密連接蛋白在IPEC-J2上分布的影響">        4.5 H₂O₂誘導(dǎo)下OEO對緊密連接蛋白在IPEC-J2上分布的影響
    5 討論
    6 小結(jié)
試驗三 止痢草油對氧化應(yīng)激大鼠的干預(yù)作用及機理研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 試驗動物
        2.2 主要試劑
        2.3 儀器設(shè)備
        2.4 試驗方法
            2.4.1 動物分組與飼養(yǎng)
            2.4.2 試驗樣品采集
            2.4.3 血清指標(biāo)的測定
            2.4.4 空腸組織形態(tài)學(xué)分析
            2.4.5 空腸HSP70及緊密連接相關(guān)蛋白mRNA表達水平檢測
            2.4.6 盲腸微生物區(qū)系分析
    3 數(shù)據(jù)處理
    4 結(jié)果與分析
        4.1 OEO對大鼠生長性能的影響
        4.2 大鼠應(yīng)激狀態(tài)評價及OEO的干預(yù)作用
        4.3 Diquat誘導(dǎo)氧化應(yīng)激大鼠血清氧化還原狀態(tài)的影響及OEO的干預(yù)作用
        4.4 OEO對氧化應(yīng)激大鼠腸道機械屏障功能的影響
            4.4.1 OEO對氧化應(yīng)激大鼠腸道通透性影響
            4.4.2 OEO對氧化應(yīng)激大鼠腸道形態(tài)學(xué)影響
            4.4.3 OEO對氧化應(yīng)激大鼠腸道緊密連接蛋白mRNA表達量的影響
        4.5 OEO對氧化應(yīng)激大鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響
            4.5.1 大鼠盲腸細菌PCR擴增產(chǎn)物
            4.5.2 DGGE圖譜及相似性分析
            4.5.3 DGGE圖譜多樣性及條帶數(shù)分析
    5 討論
        5.1 OEO對大鼠生長性能的影響
        5.2 大鼠應(yīng)激狀態(tài)評價及OEO的干預(yù)作用
        5.3 Diquat誘導(dǎo)氧化應(yīng)激大鼠血清氧化還原狀態(tài)的影響及OEO的干預(yù)作用
        5.4 OEO對氧化應(yīng)激大鼠腸道機械屏障功能的影響
        5.5 OEO對氧化應(yīng)激大鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響
    6 小結(jié)
結(jié)語
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]銀杏葉提取物對6-OHDA誘導(dǎo)PC12細胞氧化應(yīng)激的影響[J]. 王杰,程言博,印曉星.  徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2010(04)
[2]腸神經(jīng)系統(tǒng)概述[J]. 陸之輝,張小平,程愛國.  中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志. 2008(08)

博士論文
[1]仔豬氧化應(yīng)激及硒的抗應(yīng)激效應(yīng)和機理的研究[D]. 袁施彬.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007

碩士論文
[1]豬氧化應(yīng)激模型構(gòu)建以及茶多酚的抗應(yīng)激效應(yīng)的研究[D]. 徐靜.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號：3113047