為快速鑒別診斷豬流行性腹瀉病毒（PEDV）、豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、豬輪狀病毒（PoRV）和豬嵴病毒（PKV）,根據(jù)PEDV的M基因、TGEV的N基因、PoRV的VP6基因和PKV的3D基因序列設(shè)計(jì)4對(duì)特異性引物,通過PCR擴(kuò)增目的片段并構(gòu)建重組質(zhì)粒,建立了一種可同時(shí)檢測(cè)4種病毒的RT-PCR診斷方法,該方法可特異性擴(kuò)增這4種病毒的相應(yīng)片段,而對(duì)豬瘟病毒（CSFV）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV-2）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬偽狂犬病病毒（PRV）均無擴(kuò)增,最低檢出量分別為1.33×10⁴、1.33×10³、1.33×10⁴、1.33×10⁵copies/μL。應(yīng)用該方法對(duì)臨床55份豬腹瀉樣品進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果檢測(cè)出14份PEDV、1份PoRV和27份PKV,未檢出TGEV,其中PEDV和PKV混合感染9份。上述結(jié)果表明,建立的多重RT-PCR檢測(cè)方法快速、特異、敏感,可用于以上4種腹瀉病毒的臨床檢測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查。 

【文章來源】：動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2020,41(03)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【圖文】：

單項(xiàng)PCR擴(kuò)增電泳分析

所建立的多重RT-PCR方法能夠特異性擴(kuò)增4種病毒混合陽性樣品和每種病毒的單一陽性樣品,對(duì)CSFV、PCV-2、PRRSV和PRV陽性樣品均無擴(kuò)增(圖4),表明所建立的方法具有較好的特異性。圖3 多重RT-PCR引物濃度的優(yōu)化

多重RT-PCR引物濃度的優(yōu)化

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3112558