Micro RNA（mi RNA）是一種重要的轉錄后調控的非編碼RNA,很多mi RNA在乳腺發(fā)育過程中具有重要作用。有研究表明,mi R-221被抑制后,小鼠乳腺上皮細胞數量增加,生長激素受體（GHR）的表達增強。然而,mi R-221對奶牛乳腺發(fā)育以及細胞增殖的調控功能與作用機制尚不清楚。因此,本研究通過在奶牛乳腺上皮細胞中過表達和抑制表達mi R-221,利用MTT、流式細胞分析、雙熒光報告基因檢測以及q RT-PCR等技術,研究mi R-221對奶牛乳腺細胞增殖的影響及其調控機制,獲得的結果如下:1.在奶牛乳腺上皮細胞中分別轉染mi R-221 mimic、mimic-NC、mi R-inhibitor、inhibitorNC,24 h后進行MTT檢測,結果表明,mi R-221 mimic組比對照組能極其顯著的抑制細胞活力（P<0.001）,而mi R-221 inhibitor能夠顯著提高細胞活力（P<0.001）;進一步通過細胞流式分析發(fā)現,與對照組相比,mi R-221 mimic組G2期的細胞數目明顯減少,G2+S期的細胞數目與對照組相比減少了13.12%... 

【文章來源】：西北農林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PI3K-AKT/mTOR和JAK2-STAT5的信號通路圖(MaciasandHinck,2012)

圖 1-2 miRNA 的形成過程(Winter et al., 2009)Fig.1-2 Process of miRNA formation (Winter et al., 2009)發(fā)育和泌乳相關的 miRNA 的研究進展，人們更關注 miRNA 對生命體的調控功能。有關 miRNA 對乳腺發(fā)制的研究，大部分是以乳腺癌或小鼠為研究對象。在 2004 年 Liu 等研究乳腺特異性 miRNA 的表達時發(fā)現，miRNA 具有物種特異性，在測到 23 種,而小鼠中僅發(fā)現了其中的 9 個(Liu et al., 2004)。2007 年

圖 1-3 miRNA 的差異表達模式(Wang et al., 2012)g 1-3 The differences expression pattern of miRNA (Wang et al., 20和技術路線揭示 miR-221 在奶牛乳腺上皮細胞的功能及調控機制iR-221 inhibitor 研究 miR-221 對奶牛乳腺細胞增殖與細分析并驗證 miR-221 的靶基因以及其在 JAK2-STAT的調控機制，為 miRNA 在奶牛乳腺發(fā)育的研究提供理件的摸索。在奶牛乳腺上皮細胞中分別轉染miR-221mi察 RNA 與 Lipofectamine 2000 在最佳轉染效率時的添21 的過表達和抑制表達效果。TT 試驗和細胞流式分別研究 miR-221 對乳腺上皮細胞

【參考文獻】：
期刊論文
[1]bta-microRNA-145對胰島素樣生長因子1受體-磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B/哺乳動物雷帕霉素靶蛋白信號通路相關基因表達的影響及其潛在靶標的揭示[J]. 李文清,王加啟,南雪梅,卜登攀.  動物營養(yǎng)學報. 2014(09)
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[10]miR-138對小鼠乳腺上皮細胞的作用及其調控的靶序列[J]. 王春梅,李慶章,李曄.  生物化學與生物物理進展. 2008(07)

博士論文
[1]奶牛乳腺發(fā)育及泌乳重要功能基因的篩選[D]. 侯曉明.東北農業(yè)大學 2009

碩士論文
[1]TGFβ1對奶牛乳腺上皮細胞和成纖維細胞增殖的影響及其信號機制的初步研究[D]. 李瑩瑩.吉林大學 2014



本文編號：3108937