兔病毒性出血癥和兔巴氏桿菌病是以高發(fā)病率和高致死率為特點(diǎn)的兩種接觸性傳染病,它們對(duì)家兔養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損害。疫苗免疫是防控這兩種傳染病的主要策略,目前在市場(chǎng)上使用最廣泛的為兔瘟組織滅活苗和巴氏桿菌滅活疫苗以及弱毒疫苗,兔瘟組織滅活苗的主要缺陷是在疫苗制備過程中可能存在的散毒風(fēng)險(xiǎn),以及制作成本較高且疫苗成分復(fù)雜;兔巴氏桿菌滅活苗的缺陷是對(duì)不同血清型缺乏有效的交叉保護(hù)力,而兔巴氏桿菌弱毒疫苗多采用化學(xué)突變法,背景不明。如今,越來越多的學(xué)者將目光轉(zhuǎn)向兔瘟病毒和兔巴氏桿菌新型疫苗的研發(fā)上,希望能研制出一種安全有效的疫苗。CRISPR/Cas9等基因編輯技術(shù)可通過切割基因組而達(dá)到基因編輯的目的。盡管g DNA/Ng Ago基因編輯系統(tǒng)并不能介導(dǎo)真核細(xì)胞基因組的切割,但本實(shí)驗(yàn)室已有研究應(yīng)用該系統(tǒng)及同源重組原理成功構(gòu)建了多株巴氏桿菌基因缺失株,即△lyi-GXPM、△opa-GXPM、△hyae-GXPM、△pilia-GXPM和△fhgb-GXPM,該研究成功的驗(yàn)證了Na Ago/g DNA基因編輯系統(tǒng)在巴氏桿菌中操作的可行性。因此,本研究擬通過g DNA/Ng Ago基因編輯系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)巴氏桿... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

RHDV的基因組結(jié)構(gòu)(Abrantesetal2012)

的免疫保護(hù)作用（Le Gall-Recule G 2011）。對(duì) RHDV 毒株的核苷酸序列同源性分析比對(duì)，將致G1、G2、G3、G4、G5 和 G6 共 6 個(gè)基因群(Le G 1997 年，RHDV 遺傳進(jìn)化關(guān)系首次被系統(tǒng)性的分不同地域的 RHDV 毒株(Nowotny N et al 1997)。同源性，并將樣品分為三個(gè)分支，與之前的報(bào)道所發(fā)生的年份而不是地域進(jìn)行分支(Oem JK et alt al 2004)。Le Gall 等人在法國(guó)毒株中也發(fā)現(xiàn)同樣三個(gè)基因群：G1、G2 和 G3(Le Gall G et al 1998國(guó)消失了，取而代之的出現(xiàn)了新的三個(gè)基因群：的基因群 G5；G6，基因群 G6 為抗原突變株 1998)。

圖 3-1 pSHK5Ts 質(zhì)粒圖譜Fig3-1 Plasmid of pSHK5Ts及酶工具r-Fidelity DNA polymerase，Taq DNA polymerase，D Biotech 公司）；T4-PNK、T4-DNA ligase bufferolymerase，dNTPs，Trans 2K plus DNA marker，Tran司）；質(zhì)粒小提試劑盒、細(xì)菌基因組提取試劑盒、無21

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]兔多殺性巴氏桿菌C51-17株在疫苗效力檢驗(yàn)中保存方法的研究[J]. 張媛,李建,張磊,王秀麗,張立春,丁家波.  中國(guó)獸藥雜志. 2014(03)
[2]檢測(cè)兔出血癥病毒熒光定量方法的建立與應(yīng)用[J]. 劉行波,原東偉,劉家森,郭冬春,姜騫,林歡,司昌德,崔玉東,曲連東.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2013(03)
[3]兔出血癥病毒膠體金免疫層析試紙條診斷方法的建立及初步應(yīng)用[J]. 蔡少平,王芳,賈華敏,張海彬,李超美,范志宇,胡波,熊富強(qiáng),魏后軍.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2012(11)
[4]兔出血癥病毒RT-PCR檢測(cè)方法的建立及其臨床應(yīng)用[J]. 胡波,魏后軍,王芳,范志宇,徐鵬,徐為中,薛家賓,何孔旺.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(11)
[5]禽多殺性巴氏桿菌PCR診斷方法的建立[J]. 亓英芳,劉家森,張?jiān)谄?劉思國(guó),曲連東.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2008(07)
[6]應(yīng)用巢氏PCR方法快速檢測(cè)豬鼻拭子樣品中產(chǎn)毒素多殺性巴氏桿菌[J]. 湯細(xì)彪,吳斌,劉國(guó)平,楊明柳,羅勇,盧順,陳煥春.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2007(10)
[7]兔病毒性出血癥基因工程疫苗的研究進(jìn)展[J]. 張夏蘭,王紅寧,張昌菊,向菁,徐永莉,余協(xié)中.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2007(10)
[8]豬源多殺性巴氏桿菌的生物學(xué)鑒定與莢膜PCR分型[J]. 李永明,羅阿東,徐景峨,袁翠霞.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2007(07)
[9]禽巴氏桿菌C48-1株成熟外膜蛋白H基因的原核融合表達(dá)[J]. 曹素芳,黃青云,韓先干,陳紅英,鄧憲方.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2006(01)
[10]原核表達(dá)的兔出血癥病毒衣殼蛋白對(duì)兔的免疫保護(hù)效果[J]. 王永山,陸承平,周宗安,薛家賓.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2004(11)

碩士論文
[1]兔波氏桿菌和巴氏桿菌LAMP快速診斷技術(shù)研究[D]. 李科.浙江師范大學(xué) 2013
[2]以兔粘液瘤病毒為載體構(gòu)建兔出血熱病毒重組疫苗的研究[D]. 于倩.華中師范大學(xué) 2010
[3]兔巴氏桿菌外膜蛋白A基因的克隆、表達(dá)和快速診斷方法的建立[D]. 龐安娜.浙江師范大學(xué) 2010



本文編號(hào)：3105500