隨著飼料中長(zhǎng)期大量應(yīng)用抗生素造成的耐藥菌株出現(xiàn)及畜產(chǎn)品中藥物殘留對(duì)人類健康的影響的日益嚴(yán)重,抗生素逐漸被全世界禁用或限用。因此,開(kāi)發(fā)能夠有效替代抗生素的綠色飼料添加劑成為飼料研究的熱點(diǎn)。丁酸梭菌是一種厭氧腸道益生菌,和抗生素及化學(xué)合成藥物相比,具有既無(wú)殘留又能提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能特性。這些特有的性能決定了其能夠廣泛地應(yīng)用于畜禽日糧中,以增加養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。然而,微生物作為一種種類繁多、功能各異的生命體,其生理特性因種屬差異而存在巨大的差別。因此,本試驗(yàn)旨在研究特定種屬的一株丁酸梭菌的生長(zhǎng)特性、抵抗飼料加工時(shí)制粒環(huán)境的能力以及體外益生性能,以期該研究能夠?yàn)槎∷崴缶谛笄萆a(chǎn)中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。丁酸梭菌種屬鑒定試驗(yàn)采用固體平板培養(yǎng)法確定其菌落形態(tài),用液體培養(yǎng)法確定其產(chǎn)氣能力;對(duì)菌體進(jìn)行革蘭氏染色觀察細(xì)菌形態(tài);對(duì)其16s rDNA進(jìn)行提取及測(cè)序,確定其種屬分類;丁酸梭菌抗逆性試驗(yàn)分別對(duì)丁酸梭菌的高溫、高壓、人工胃液及腸道消化酶耐受性進(jìn)行評(píng)價(jià);丁酸梭菌體外益生特性的評(píng)價(jià)應(yīng)用吸光度法測(cè)定丁酸梭菌生長(zhǎng)曲線及pH變化曲線;應(yīng)用牛津杯法分別用丁酸梭菌發(fā)酵液上清、排酸及過(guò)氧化氫酶、胰蛋白酶、蛋白酶K處... 

【文章來(lái)源】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

丁酸梭菌系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)

圖 2 丁酸梭菌生長(zhǎng)曲線及 pH 曲線Fig.2 growth curve and pH change curve of Clostridium butyricum.2 丁酸梭菌抑菌能力試驗(yàn)由表 8 可知，丁酸梭菌對(duì) 5 種肉仔雞常見(jiàn)腸道致病菌均有一定的抑制作用。經(jīng)排酸及過(guò)氫酶處理后的清液所產(chǎn)生的抑菌圈直徑均與上清原液的抑菌圈直徑無(wú)顯著差異（P＞0.05液中的酸性物質(zhì)被中和后，菌液對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌失去抑制能力；經(jīng)胰蛋白酶、蛋白酶 K 處，菌液對(duì)大腸埃希氏菌、副溶血性弧菌、金黃色葡萄球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌失去抑制能力；酶 K 處理后，菌液對(duì)銅綠假單胞菌失去抑制能力。表 8 不同處理抑菌圈直徑（mm）Table8 Bacteriostasis in different treatments目tem處理組 1Group 1處理組 2Group 2處理組 3Group 3處理組 4Group 4處理組5Group 5對(duì)照Con腸埃希氏菌scherichia coli11.15±0.46a11.47±0.17a10.90±0.35a- - -綠假單胞桿菌11.49±0.08a10.85±0.30a10.37±1.64a11.72±0.96a- -

丁酸梭菌抗逆性能及其對(duì)肉仔雞益生性能的體外研究梭菌產(chǎn)酸能力試驗(yàn)、丙酸、丁酸的保留時(shí)間分別為 8.1min、9.1min 和 10.2min，峰形正常。時(shí)間內(nèi)出峰的峰面積進(jìn)行分析，以峰面積 y 對(duì)質(zhì)量濃度 x 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線表 9 VFA 標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程Table9 Standard curve regression equation of VFA項(xiàng)目Item相關(guān)系數(shù)Correlation coefficient回歸方程Regression equation酸 Acetic Acid 0.9988 y = 71.523x - 25013 Propionic Acid 0.9986 y = 136.91x - 25059酸 Butyric acid 0.9987 y = 179.38x - 60250

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
[1]密碼子優(yōu)化的蛋白酶K在畢赤酵母中的表達(dá)及分離純化[D]. 孫風(fēng)敏.大連理工大學(xué) 2014
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本文編號(hào)：3102680