發(fā)布時間：2021-03-23 22:38

　　豬嗜血支原體（Mycoplasmasuis,Msuis）能夠引起豬嗜血支原體病,給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴重經(jīng)濟損失。本試驗分析了M.suis的MSG1（Msuis GAPDH-like protein 1,磷酸甘油醛脫氫酶樣蛋白1）和ENO1（Alpha-烯醇化酶,α-enolase,ENO1）黏附蛋白的特性,研究了單味中藥對其mRNA表達影響,以揭示單味中藥對M.suis黏附作用的影響。根據(jù)M.suis ENO1和MSG1基因的參考序列設(shè)計引物,對M.suis MSG1和ENO1 mRNA進行反轉(zhuǎn)錄、PCR擴增其完整CDS區(qū)基因,并進行測序,在線生物信息學分析。用含不同濃度單味中藥的培養(yǎng)基對M.suis進行體外培養(yǎng),通過qRT-PCR技術(shù)測定藥物作用后M.suis ENO1和MSG1 mRNA的相對表達量,采用Western Blotting技術(shù)檢測藥物作用后兩種黏附蛋白MSG1和ENO1的表達情況。結(jié)果:（1）ENO1和MSG1蛋白理化性質(zhì)穩(wěn)定,均含有疏水區(qū)域,均不存在信號肽,均存在二級結(jié)構(gòu),不存在跨膜結(jié)構(gòu),說明這兩種蛋白分布于M.suis表面;兩種蛋白均存在糖基化位點,預(yù)測其具備信號傳導功... 

【文章來源】：山西農(nóng)業(yè)大學山西省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２?血液懸滴鏡檢（４０〇ｘ）??

ＥＮ０１和ＭＳＧ１蛋白的疏水性預(yù)測??經(jīng)ＥｘＰＡＳｙ的ＰｒｏｔＳｃａｌｅ分析，系統(tǒng)自動繪制出了?的ＥＮＯ１和ＭＳＧ１蛋白的??性圖（圖７），根據(jù)Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ原則，氨基酸親水標準小于０為親水區(qū)，大于０??水區(qū)，因此的ｆｉＶＯｌ和ＭＳＧ１?ｃＤＮＡ編碼的氨基酸均含有疏水區(qū)域。??Ｐｒｏｔ?Ｓｃａｌｅ?ｏｕｔｐｕｔ?ｆｏｒ?ｕｓｅ?ｒｅｓｅｑｕｅｎｃｅ??

３．３?ＥＮ０１和ＭＳＧ１蛋白的信號肽預(yù)測??米用?Ｓｉｇｎａｌ?Ｐ?３＿０?程序（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｂｓ．ｄｔｕ．ｄｋ／ｓｅｒｖｉｃｅｓ／ＳｉｇｎａｌＰ／）對?ＥＮ０１?和?ＭＳＧ１??氨基酸序列進行信號肽分析（圖８）。ＳｉｇｎａｌＰ?３．０根據(jù)信號肽序列特征預(yù)測信號肽位置。??Ｃ－ｓｃｏｒｅ?ｍａｘｉｍｕｍ：可能的信號肽切割位點得分；Ｓ－ｓｃｏｒｅ?ｍａｘｉｍｕｍ：信號肽組成部分??的可能性；Ｙ－ｓｃｏｒｅ?ｍａｘｉｍｕｍ：真實的信號肽切割位點；Ｓ－ｓｃｏｒｅ?ｍｅａｎ：?Ｓ－ｓｃｏｒｅ的平均??分，如果Ｓ－ｓｃｏｒｅｍｅａｎ＞０．５，則預(yù)測該蛋白為分泌蛋白且存在信號肽，ＥＮ０１和ＭＳＧ１??氨基酸序列預(yù)測結(jié)果顯示：最大Ｃ值分別為１７、５４，最大Ｙ值分別為１７、２８，最大Ｓ??值為１４、３，從圖上看出Ｓ－ｓｃｏｒｅ?ｍｅａｎ＜０．５，表明二者不存在信號肽。??ＳｉｇｎａｌＰ－４?１?ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ?（ｅｕｋ?ｎｅｔｗｏｒｋｓ）：?Ｓｅｑｕｅｎｃｅ??＇?＇?１?＇－＇——??

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]應(yīng)用qPCR研究中藥對豬嗜血支原體的體外作用[D]. 董耀澤.山西農(nóng)業(yè)大學 2016
[2]復方中藥對豬嗜血支原體自然感染豬血液指標的影響[D]. 劉雅瓊.山西農(nóng)業(yè)大學 2015
[3]豬嗜血支原體阻斷ELISA抗體檢測試劑盒組裝及漢賽巴爾通體間接ELISA方法的建立[D]. 程王琨.南京農(nóng)業(yè)大學 2013
[4]豬嗜血支原體的豬體感染試驗和小鼠感染試驗研究[D]. 王帥彪.南京農(nóng)業(yè)大學 2013
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本文編號：3096543