A型流感病毒（Influenza A virus,IAV）尤其是強(qiáng)毒力毒株感染機(jī)體后,肺組織內(nèi)的各種細(xì)胞釋放大量的炎性介質(zhì),進(jìn)而導(dǎo)致巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞的炎性浸潤,造成炎癥性病理損傷,加重病毒感染的嚴(yán)重程度,是流感病毒感染高病死率的重要原因之一。因此,調(diào)控機(jī)體對流感病毒的過度免疫反應(yīng),減輕肺組織的炎性損傷,不失為研制有效的抗流感藥物的重要手段。而且,由于IAV的高突變率,導(dǎo)致病毒對現(xiàn)有的多種抗流感病毒西藥已經(jīng)產(chǎn)生耐藥性。鑒于此,研制新的廣譜抗流感病毒藥物或者尋找新的治療方法,對于流感病毒的防治尤為關(guān)鍵。中藥在治療病毒性疾病等方面已積累了豐富的臨床經(jīng)驗。中藥可通過多種方式抑制病毒感染,例如抑制病毒復(fù)制、減輕由病毒感染介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)、增強(qiáng)免疫力等方面。本文旨在篩選和驗證能夠?qū)α鞲胁《靖腥窘閷?dǎo)的免疫損傷有干預(yù)作用的有效中藥單體,為抗流感病毒的天然藥物的研制奠定基礎(chǔ)。方法:（1）通過CCK8法檢測中藥在MDCK細(xì)胞上對PR8感染的保護(hù)作用,對現(xiàn)有的60多種中藥單體進(jìn)行了篩選。CCK8實驗檢測中藥對MDCK細(xì)胞半數(shù)中毒劑量(TD₅₀),建立體外細(xì)胞感染模型,通過給予中藥治療后... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

二氫丹參酮I化學(xué)結(jié)構(gòu)

第一篇文獻(xiàn)綜述第三章流感病毒蛋白PA-X研究概況7第三章流感病毒蛋白PA-X研究概況3.1PA-X蛋白研究背景PA-X是A型流感病毒片段3編碼的病毒基因產(chǎn)物，被發(fā)現(xiàn)是一種宿主的封閉蛋白。該蛋白包含了蛋白PAN-末端191個氨基酸序列與C-末端ORF編碼的41或61個氨基酸[82]。X-ORF是基因PA的一個核糖體移位所形成的(如圖3.1）[7,82,83]。盡管大多數(shù)IAVPA-X基因C-末端具有61個密碼子，但仍然存在一些分離株有41個密碼子[84]。攜帶這種截短形式的PA-X（41個密碼子X-ORF）,主要由第42個密碼子發(fā)生的無義突變而產(chǎn)生。這種截短的PA-X蛋白大多數(shù)來自2009年大流行的H1N1病毒[83]。圖3.1PA-X框架結(jié)構(gòu)Fig.3.1PA-Xframestructure（注：本圖片引自參考文獻(xiàn)[85]）3.2PA-X蛋白的功能自2012年P(guān)A-X蛋白被發(fā)現(xiàn)以來，這種小蛋白就已被證實具有多種功能。包括宿主關(guān)閉、調(diào)節(jié)聚合酶活性[84,86]、參與病毒復(fù)制[87,88]、病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡、PA核定位和毒力[87,89]等。然而，提出的許多功能都特定于菌株、亞型、宿主或細(xì)胞系。3.2.1PA-X蛋白的宿主關(guān)閉活性IAV感染導(dǎo)致細(xì)胞的宿主蛋白合成迅速下降，這個過程稱為宿主關(guān)閉。在這

第二篇研究內(nèi)容第一章二氫丹參酮I抗流感病毒研究191.3.2CCK8檢測DHTI藥物毒性結(jié)果將藥物按預(yù)計的濃度梯度依次分組，加入培養(yǎng)的細(xì)胞中處理24h。經(jīng)檢測如圖1.1所示，DHTI在濃度為10μM時無細(xì)胞毒性。圖1.1CCK8檢測DHTI對MDCK細(xì)胞毒性實驗Fig.1.1CytotoxicityofDHTItoMDCKcellsdetectedbyCCK81.3.2DHTI在細(xì)胞水平上抗IAV的研究結(jié)果1.Westernblot實驗結(jié)果通過構(gòu)建IAVH1N1PR8感染細(xì)胞模型，2h后加DHTI處理。結(jié)果表明，與PR8組，DMSO+PR8組相比，DHTI可抑制流感病毒M和NP蛋白的表達(dá)，顯著降低了MAPK信號通路中ERK和JNK激酶的磷酸化水平（圖1.2）。圖1.2DHTI降低IAV對ERK和JNK激酶的磷酸化Fig.1.2DHTIdecreasesphosphorylationofERKandJNKkinasesbyIAV2.熒光定量PCR實驗結(jié)果實驗結(jié)果顯示：與正常組相比，A549細(xì)胞感染H1N1PR8毒株后，經(jīng)DHT

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Research progress in human infection with avian influenza H7N9 virus[J]. Jing Tang,Dayan Wang.  Science China（Life Sciences）. 2017(12)
[2]金銀花注射液抗流感病毒作用的實驗研究[J]. 陳麗,顧燕.  現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2016(02)
[3]流感疫苗研究進(jìn)展[J]. 竇成利,于凱源,于喜冰.  現(xiàn)代畜牧獸醫(yī). 2015(10)
[4]中藥抗流感病毒的研究進(jìn)展[J]. 鐘恒斯.  廣東職業(yè)技術(shù)教育與研究. 2014(03)
[5]機(jī)體抗流感病毒免疫防御機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 張玫.  黑龍江醫(yī)藥. 2010(03)

博士論文
[1]我國雞群中H7N9亞型禽流感病毒的遺傳進(jìn)化及PA-X蛋白在高、低致病性毒株感染中的作用和機(jī)制研究[D]. 劉東.揚(yáng)州大學(xué) 2019
[2]中藥中神經(jīng)氨酸酶抑制劑的篩選及其抗流感病毒實驗研究[D]. 田莉.吉林大學(xué) 2011

碩士論文
[1]金銀花與山銀花抗流感病毒功效差異及關(guān)鍵藥效組分研究[D]. 張靜茹.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2018
[2]白及菲類化合物抗流感病毒藥效及其機(jī)理研究[D]. 張兵.浙江中醫(yī)藥大學(xué) 2018
[3]二氫丹參酮Ⅰ改善葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)的小鼠潰瘍性結(jié)腸炎實驗研究[D]. 郭艷玲.遵義醫(yī)學(xué)院 2018
[4]黃芪甲苷抗甲型流感病毒作用研究[D]. 周紅霞.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016



本文編號：3092665