A型流感病毒（Influenza A virus,IAV）尤其是強(qiáng)毒力毒株感染機(jī)體后,肺組織內(nèi)的各種細(xì)胞釋放大量的炎性介質(zhì),進(jìn)而導(dǎo)致巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞的炎性浸潤(rùn),造成炎癥性病理?yè)p傷,加重病毒感染的嚴(yán)重程度,是流感病毒感染高病死率的重要原因之一。因此,調(diào)控機(jī)體對(duì)流感病毒的過(guò)度免疫反應(yīng),減輕肺組織的炎性損傷,不失為研制有效的抗流感藥物的重要手段。而且,由于IAV的高突變率,導(dǎo)致病毒對(duì)現(xiàn)有的多種抗流感病毒西藥已經(jīng)產(chǎn)生耐藥性。鑒于此,研制新的廣譜抗流感病毒藥物或者尋找新的治療方法,對(duì)于流感病毒的防治尤為關(guān)鍵。中藥在治療病毒性疾病等方面已積累了豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)。中藥可通過(guò)多種方式抑制病毒感染,例如抑制病毒復(fù)制、減輕由病毒感染介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)、增強(qiáng)免疫力等方面。本文旨在篩選和驗(yàn)證能夠?qū)α鞲胁《靖腥窘閷?dǎo)的免疫損傷有干預(yù)作用的有效中藥單體,為抗流感病毒的天然藥物的研制奠定基礎(chǔ)。方法:（1）通過(guò)CCK8法檢測(cè)中藥在MDCK細(xì)胞上對(duì)PR8感染的保護(hù)作用,對(duì)現(xiàn)有的60多種中藥單體進(jìn)行了篩選。CCK8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)中藥對(duì)MDCK細(xì)胞半數(shù)中毒劑量(TD₅₀),建立體外細(xì)胞感染模型,通過(guò)給予中藥治療后... 

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二氫丹參酮I化學(xué)結(jié)構(gòu)

第一篇文獻(xiàn)綜述第三章流感病毒蛋白PA-X研究概況7第三章流感病毒蛋白PA-X研究概況3.1PA-X蛋白研究背景PA-X是A型流感病毒片段3編碼的病毒基因產(chǎn)物，被發(fā)現(xiàn)是一種宿主的封閉蛋白。該蛋白包含了蛋白PAN-末端191個(gè)氨基酸序列與C-末端ORF編碼的41或61個(gè)氨基酸[82]。X-ORF是基因PA的一個(gè)核糖體移位所形成的(如圖3.1）[7,82,83]。盡管大多數(shù)IAVPA-X基因C-末端具有61個(gè)密碼子，但仍然存在一些分離株有41個(gè)密碼子[84]。攜帶這種截短形式的PA-X（41個(gè)密碼子X-ORF）,主要由第42個(gè)密碼子發(fā)生的無(wú)義突變而產(chǎn)生。這種截短的PA-X蛋白大多數(shù)來(lái)自2009年大流行的H1N1病毒[83]。圖3.1PA-X框架結(jié)構(gòu)Fig.3.1PA-Xframestructure（注：本圖片引自參考文獻(xiàn)[85]）3.2PA-X蛋白的功能自2012年P(guān)A-X蛋白被發(fā)現(xiàn)以來(lái)，這種小蛋白就已被證實(shí)具有多種功能。包括宿主關(guān)閉、調(diào)節(jié)聚合酶活性[84,86]、參與病毒復(fù)制[87,88]、病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡、PA核定位和毒力[87,89]等。然而，提出的許多功能都特定于菌株、亞型、宿主或細(xì)胞系。3.2.1PA-X蛋白的宿主關(guān)閉活性IAV感染導(dǎo)致細(xì)胞的宿主蛋白合成迅速下降，這個(gè)過(guò)程稱為宿主關(guān)閉。在這

第二篇研究?jī)?nèi)容第一章二氫丹參酮I抗流感病毒研究191.3.2CCK8檢測(cè)DHTI藥物毒性結(jié)果將藥物按預(yù)計(jì)的濃度梯度依次分組，加入培養(yǎng)的細(xì)胞中處理24h。經(jīng)檢測(cè)如圖1.1所示，DHTI在濃度為10μM時(shí)無(wú)細(xì)胞毒性。圖1.1CCK8檢測(cè)DHTI對(duì)MDCK細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)Fig.1.1CytotoxicityofDHTItoMDCKcellsdetectedbyCCK81.3.2DHTI在細(xì)胞水平上抗IAV的研究結(jié)果1.Westernblot實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過(guò)構(gòu)建IAVH1N1PR8感染細(xì)胞模型，2h后加DHTI處理。結(jié)果表明，與PR8組，DMSO+PR8組相比，DHTI可抑制流感病毒M和NP蛋白的表達(dá)，顯著降低了MAPK信號(hào)通路中ERK和JNK激酶的磷酸化水平（圖1.2）。圖1.2DHTI降低IAV對(duì)ERK和JNK激酶的磷酸化Fig.1.2DHTIdecreasesphosphorylationofERKandJNKkinasesbyIAV2.熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與正常組相比，A549細(xì)胞感染H1N1PR8毒株后，經(jīng)DHT

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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