發(fā)布時(shí)間：2021-03-19 17:40

　　目的:為探討豬紅細(xì)胞免疫黏附受體CR1-like（ECR1-like）的多態(tài)性特點(diǎn),本實(shí)驗(yàn)從個(gè)體水平上分析ECR1-like的分子量、膜表達(dá)數(shù)量及免疫黏附水平等方面是否具有個(gè)體差異,以期探討天然狀態(tài)下影響ECR1-like發(fā)揮免疫黏附活性的生物學(xué)因素,為后期深入研究疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中豬ECR1-like發(fā)揮免疫功能的分子機(jī)理提供理論數(shù)據(jù)。方法:隨機(jī)選取健康長(zhǎng)白豬為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,前腔靜脈無(wú)菌采血,制備紅細(xì)胞懸液。以免疫沉淀技術(shù)和western blot檢測(cè)不同個(gè)體的ECR1-like的分子量大小,采用SPSS Statistics V21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,使用單樣本Kolmogorov-Smirnov（K-S）分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)是否屬于正態(tài)分布,以散點(diǎn)分布及t檢驗(yàn)分析比較ECR1-like分子量大小不同分布區(qū)間的熒光平均值與總體熒光平均值;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ECR1-like表達(dá)水平,使用單因素方差分析,檢測(cè)紅細(xì)胞是否表達(dá)CR1-like,使用單樣本K-S分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)是否屬于正態(tài)分布,以散點(diǎn)分布及t檢驗(yàn)分析比較紅細(xì)胞熒光值不同分布區(qū)間的熒光平均值與總體熒光平均值;以熒光大腸桿菌為報(bào)告菌株,流... 

【文章來(lái)源】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖ICRI的基因位座

１豬紅細(xì)胞ＣＲｌ－ｌｉｋｅ分子量大小的檢測(cè)結(jié)果??１．１豬紅細(xì)胞ＣＲ１－ｌｉｋｅ?ＳＤＳ－ＰＡＧＥ電泳結(jié)果及ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測(cè)結(jié)果??�。担殿^長(zhǎng)白豬ＥＣＲｌ－ｌｉｋｅ共沉淀蛋白進(jìn)行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ?（含２－ＭＥ）電泳，如圖１所??示：結(jié)果可見(jiàn)圖ｌａ中１？６泳道中具有３條蛋白條帶，對(duì)比ｍａｒｋｅｒ可知條帶大小依次為??７０ｋＤ、５０ｋＤ、１５ｋＤ，經(jīng)ＷＢ檢測(cè)（圖ｌｂ），結(jié)果可見(jiàn)？６’泳道中２條蛋白條帶，分子??量大小依次為５０ｋＤ、１５ｋＤ，經(jīng)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)有４２頭長(zhǎng)白豬紅細(xì)胞ＣＲｌ－ｌｉｋｅ蛋白樣本為此??類(lèi)型；圖ｌｃ中１？６泳道中具有２條蛋白條帶，對(duì)比ｍａｒｋｅｒ可知條帶大小依次為７０ｋＤ、??５０ｋＤ，經(jīng)ＷＢ檢測(cè)（圖ｌｄ），結(jié)果可見(jiàn)１’？６’泳道中１條蛋白條帶，分子量大小為５０ｋＤ，??經(jīng)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)有８頭長(zhǎng)白豬紅細(xì)胞ＣＲｌ－ｌｉｋｅ蛋白樣本為此類(lèi)型；圖ｌｅ中１？６泳道中具有??２條蛋白條帶，對(duì)比ｍａｒｋｅｒ可知條帶大小依次為７０ｋＤ、１５ｋＤ，經(jīng)ＷＢ檢測(cè)（圖ｌｆ），??結(jié)果可見(jiàn)１’？６’泳道中１條蛋白條帶，分子量大�。保担耄模�(jīng)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)有５頭長(zhǎng)白豬??ＥＣＲｌ－ｌｉｋｅ蛋白樣本為此類(lèi)型。依據(jù)基于蛋白ｍａｒｋｅｒ的分子量大小與其條帶同濃縮膠和??分離膠的分界線之間的距離繪制而成的標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖２）

結(jié)果可見(jiàn)１’？６’泳道中１條蛋白條帶，分子量大�。保担耄�，經(jīng)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)有５頭長(zhǎng)白豬??ＥＣＲｌ－ｌｉｋｅ蛋白樣本為此類(lèi)型。依據(jù)基于蛋白ｍａｒｋｅｒ的分子量大小與其條帶同濃縮膠和??分離膠的分界線之間的距離繪制而成的標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖２），將經(jīng)測(cè)量得到的ＣＲｌ－ｌｉｋｅ條??帶與濃縮膠和分離膠的分界線之間的距離帶入相應(yīng)的曲線方程中得到不同有樣本的實(shí)??際蛋白分子量大小。??１９??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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