在當(dāng)前的研究中,我們發(fā)現(xiàn)PLZF缺陷小鼠的胸腺細(xì)胞總數(shù)與野生型小鼠相比減少,早期T細(xì)胞祖細(xì)胞（ETP）數(shù)目減少,但PLZF缺陷小鼠的胸腺細(xì)胞減少不是造血干細(xì)胞內(nèi)在性的原因。通過PLZF-EGFP報告基因小鼠和新生小鼠胸腺的腎移植模型,我們發(fā)現(xiàn)PLZF在Rag2/γc^-/-受體小鼠胸腺移植物DN1（Lineage^-CD44⁺CD25^-）細(xì)胞中高表達(dá),且供體細(xì)胞PLZF的缺失會顯著影響胸腺移植物的DN1細(xì)胞中來源于供體細(xì)胞的比例。綜上所述,T細(xì)胞的正常分化發(fā)育不一定需要PLZF基因的參與,但很可能參與維持T細(xì)胞早期祖細(xì)胞的自我更新。本研究的目的是PLZF基因在小鼠T細(xì)胞早期發(fā)育和自我更新中的功能探究,主要包括四部分:第一,PLZF基因是否促進(jìn)小鼠造血干細(xì)胞產(chǎn)生;第二,PLZF基因缺失對小鼠的胸腺細(xì)胞減少是否為造血干細(xì)胞內(nèi)在性的;第三,PLZF在新生小鼠胸腺移植模型的移植物DN1細(xì)胞中高表達(dá)。第四,PLZF缺失可能影響新生小鼠胸腺移植模型的供體DN1細(xì)胞自我更新。現(xiàn)將研究內(nèi)容總結(jié)如下:1.本研究以PLZF... 

【文章來源】：西北民族大學(xué)甘肅省

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

BTB-ZF8個轉(zhuǎn)錄因子的主要結(jié)構(gòu)特征和功能介紹Fig.1Introductionofthemainstructuralfeaturesandfunctionsof8BTB-ZFtranscriptionfactor

11圖2.造血干細(xì)胞(HSCs)及其祖細(xì)胞Fig2.Hematopoiticstemcells(HSCs)andprogenitors2.2.2神經(jīng)前體細(xì)胞PLZF也在分裂的祖細(xì)胞中表達(dá)，并在神經(jīng)分化過程中下調(diào)[118]。在果蠅中，PLZF阻止神經(jīng)元分化，并調(diào)節(jié)神經(jīng)前體細(xì)胞的膠質(zhì)發(fā)育。在脊椎動物身上也觀察到了類似的效果。在小雞和小鼠中，PLZF的過表達(dá)促進(jìn)了神經(jīng)前體細(xì)胞的維持，并抑制了神經(jīng)發(fā)生。而shRNA降低PLZF活性會影響神經(jīng)前體細(xì)胞的維持，導(dǎo)致神經(jīng)元分化。進(jìn)一步的分子分析表明，PLZF通過上調(diào)FGFR3的表達(dá)和STAT3途徑的活性來維持神經(jīng)前體細(xì)胞的自我更新(圖3)。然而，PLZF的長期表達(dá)使神經(jīng)前體偏向于膠質(zhì)形成[118]。相反，Btbd6a是CUL3泛素連接酶復(fù)合物的接頭，與PLZF結(jié)合，促進(jìn)PLZF從細(xì)胞核移位到細(xì)胞質(zhì)，進(jìn)行泛素化和降解，導(dǎo)致神經(jīng)分化[119](圖3)。這些數(shù)據(jù)表明PLZF是維持神經(jīng)前體細(xì)胞并抑制其分化為神經(jīng)元所必需的。

12圖3神經(jīng)前體細(xì)胞(NPC)Fig3.NeuralProgenitorCells(NPCs)2.2.3精原祖細(xì)胞PLZF在維持精原細(xì)胞自我更新方面起著至關(guān)重要的作用。PLZF是斑馬魚中公認(rèn)的A型和B型精原細(xì)胞的生物標(biāo)志物[120]，與Oct4在未分化的精原細(xì)胞中共表達(dá)[110]。成體精原干細(xì)胞具有自我更新和產(chǎn)生大量分化后代的能力。PLZF的突變限制了幼鼠正常精子的數(shù)量[110]。缺乏PLZF的小鼠的精原細(xì)胞隨著年齡的增長而逐漸喪失，伴隨著凋亡增加和之后的小管結(jié)構(gòu)喪失，但沒有明顯的分化缺陷或支持細(xì)胞的喪失[109]。進(jìn)一步的研究已經(jīng)闡明了其潛在的分子機制。首先，PLZF的耗竭改變了新陳代謝、RNA結(jié)合、細(xì)胞周期、細(xì)胞骨架和轉(zhuǎn)錄相關(guān)的基因的表達(dá)。這些基因表達(dá)的失控破壞了精原細(xì)胞自我更新和分化之間的緊密平衡。減數(shù)分裂檢查點被激活，凋亡增加，導(dǎo)致精原干細(xì)胞自我更新能力的進(jìn)行性降低，從而導(dǎo)致依賴性生殖細(xì)胞丟失[109]。其次，PLZF直接抑制c-Kit的轉(zhuǎn)錄，c-Kit是精原細(xì)胞分化的標(biāo)志(圖4)。c-Kit受體酪氨酸激酶在精子產(chǎn)生中起重要作用。c-Kit基因點突變阻礙了精子產(chǎn)生的初始階段，并取消了A1-A4精原細(xì)胞分化過程中的DNA合成，導(dǎo)致不育[121]。PLZF結(jié)合位點的3-bp突變?nèi)∠薱-Kit啟動子對PLZF抑制的反應(yīng)性。相同的是，PLZF基因敲除的小鼠在其未分化的精原細(xì)胞中c-Kit的表達(dá)顯著增加，這表明PLZF通過直接轉(zhuǎn)錄抑制c-Kit來維持


本文編號：3076340