小鵝瘟是導(dǎo)致雛鵝死亡的常見疾病之一,可造成巨大經(jīng)濟(jì)損失,嚴(yán)重危害養(yǎng)鵝業(yè)的發(fā)展。現(xiàn)有弱毒活疫苗和小鵝瘟抗體的廣泛應(yīng)用,在我國小鵝瘟疫病防控過程中發(fā)揮了巨大的作用。但活毒疫苗存在毒力返強(qiáng)的潛在危害,從而限制了其生產(chǎn)應(yīng)用,因此研究小鵝瘟滅活疫苗顯得尤為重要。本研究對(duì)小鵝瘟分離毒株的生物學(xué)特性進(jìn)行了系統(tǒng)研究,篩選出免疫原性好、繁殖滴度高的小鵝瘟野毒株作為滅活疫苗候選株,并開展了生產(chǎn)工藝、乳化工藝和免疫效力研究工作,以期制備出安全、高效的小鵝瘟滅活疫苗,為我國小鵝瘟疫病的防控和凈化提供有力工具。1、小鵝瘟病毒疫苗候選株的篩選為了研制與當(dāng)前小鵝瘟流行株匹配的疫苗,本研究對(duì)從2009～2011年江蘇省養(yǎng)鵝地區(qū)疑似小鵝瘟的臨床樣品中共分離了 5株鵝細(xì)小病毒（GPV）,同時(shí)對(duì)分離株進(jìn)行VP3基因測(cè)序并繪制遺傳進(jìn)化樹,序列分析結(jié)果表明GPV分離株與國內(nèi)大部分分離株屬于同一分支,明顯不同于國內(nèi)疫苗株SY61和臺(tái)灣主要分支。對(duì)獲得的毒株經(jīng)有限稀釋法純化,并對(duì)純化后的病毒進(jìn)行繁殖性能、毒力、特異性及免疫原性等進(jìn)行了測(cè)定,5株病毒均屬于強(qiáng)毒株,其中 Gosling plague virus/taizhou/10（... 

【文章來源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖２－１胚體病變照??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ?ｃｈａｎ?ｇｅｎｓ?ｏｆ?ｅｇｇ?ｂｏｄｙ??

２．?２．?４．１?ＶＰ３基因擴(kuò)增及鑒定??ＧＰＶ各分離株ＶＰ３基因擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)１％瓊脂糖凝膠電泳分析，均可見約５３９ｂｐ的目的??條帶，ＤＮＡ大小與預(yù)期的結(jié)果相符，電泳圖片見圖２－３。?????－？??■■■■??圖２－３分離株ＶＰ３基因ＰＣＲ鑒定結(jié)果??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３?Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＶＰ３?ｇｅｎｅｂｙ?ＰＣＲ??Ｍ：?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ?ＮＪ０９?株?２：?ＴＪ１０?株?３：?ＮＴ０９?株??４：?ＹＺｌｌ株５：?ＹＺ１０株＋：陽性對(duì)照陰性對(duì)照??２．?２．４．２?ＶＰ３基因序列分析??將擴(kuò)增的目的片段送南京金斯瑞生物科技有限公司測(cè)序后，對(duì)測(cè)定的基因進(jìn)行序列分??析，ＢＬＡＳＴ結(jié)果顯示，５株分離株的基因序列均與ＧｅｎＢａｎｋ數(shù)據(jù)庫中的ＧＰＶ最為相近（見??圖２－４）。其中，ＮＪ０９株和ＹＺ１１株基因與ＧｅｎＢａｎｋ數(shù)據(jù)庫中收錄的Ｇｏｏｓｅ?ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ?ｓｔｒａｉｎ??ＬＨ?（ＧｅｎＢａｎｋ登錄號(hào)：ＫＭ２７２５６０）具有最高的相似性；ＴＺ１０株基因與ＧｅｎＢａｎｋ數(shù)據(jù)庫??中收錄的?Ｇｏｏｓｅ?ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ?ｓｔｒａｉｎ?ＹＺ９９－６?（ＧｅｎＢａ

Ｅ（Ｇｅｎｂａｎｋ登錄號(hào)：ＫＣ１８４１３３）遺傳關(guān)系最近，該毒株基因組全長為５１２５ｂｐ。ＴＺＩ０株全??基因組與疫苗株ＳＹＧ６１ｖ株（Ｇｅｎｂａｎｋ登錄號(hào)：ＫＣ９９６７２９）相比在４６３６ｂｐ－４６８５ｂｐ處有多??處序列插入，見

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]吉林省養(yǎng)鵝業(yè)現(xiàn)狀及產(chǎn)業(yè)化分析[D]. 劉洪亮.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]鵝細(xì)小病毒的分離鑒定及其全基因測(cè)序及結(jié)構(gòu)蛋白的表達(dá)[D]. 徐浩.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]鵝細(xì)小病毒病油乳劑滅活疫苗的研制[D]. 李琳.吉林大學(xué) 2008
[4]檢測(cè)GPV抗體的間接ELISA方法的建立及初步應(yīng)用[D]. 李永軒.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



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