犬瘟熱（CD）是由犬瘟熱病毒（CDV）引起的犬科、鼬鼠科及部分浣熊科的一種急性、高度接觸性、致死性傳染病。該病在全世界范圍內(nèi)普遍發(fā)生,我國(guó)是該病的多發(fā)地區(qū)。近年來(lái),報(bào)道顯示CDV的感染宿主范圍不斷擴(kuò)大,部分地區(qū)還出現(xiàn)了非典型癥狀的病例。雖然該病已有疫苗在使用,但并不能阻止該病在一些地區(qū)的爆發(fā)趨勢(shì)。因此,快速而有效的檢測(cè)方法是防控該病的關(guān)鍵。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）作為一種特異性強(qiáng)、敏感度高、操作簡(jiǎn)便的檢測(cè)技術(shù),在CDV的檢測(cè)上,有著很好的應(yīng)用前景。本研究在實(shí)驗(yàn)室已有的研究基礎(chǔ)上,建立了基于單克隆抗體的夾心ELISA檢測(cè)方法和基于桿狀病毒表達(dá)的重組CDVN蛋白的間接ELISA檢測(cè)方法,以用于CDV抗原和抗體的檢測(cè)。試驗(yàn)內(nèi)容包括：實(shí)驗(yàn)1：犬瘟熱病毒單克隆抗體夾心ELISA檢測(cè)方法的建立及臨床應(yīng)用本實(shí)驗(yàn)建立了檢測(cè)犬瘟熱病毒的單克隆抗體夾心ELISA方法：以純化的犬瘟熱病毒（CDV）單抗1D9作為捕獲抗體,以辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的單抗1E7作為檢測(cè)抗體,反應(yīng)條件為：捕獲抗體的包被濃度為2.4μg/mL,酶標(biāo)單抗1E7的稀釋度為1：4000,封閉液采用10%小牛血清。特異性試驗(yàn)結(jié)果... 

【文章來(lái)源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一篇 文獻(xiàn)綜述 犬癌熱病毒檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展
    1 犬瘟熱病原特性
    2 犬瘟熱病毒檢測(cè)技術(shù)
        2.1 病原學(xué)檢測(cè)方法
        2.2 血清學(xué)檢測(cè)方法
        2.3 分子生物學(xué)檢測(cè)方法
    參考文獻(xiàn)
第二篇 試驗(yàn)研究
    第一章 犬瘟熱病毒單克隆抗體夾心ELISA檢測(cè)方法的建立及臨床應(yīng)用
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 病毒和細(xì)胞
            1.2 主要試劑
            1.3 包被單抗和酶標(biāo)單抗的制備
            1.4 單抗夾心ELISA方法最佳工作條件的確定
            1.5 單抗夾心ELISA陽(yáng)性臨界值的確定
            1.6 特異性試驗(yàn)
            1.7 敏感性試驗(yàn)
            1.8 重復(fù)性試驗(yàn)
            1.9 對(duì)臨床樣品的檢測(cè)
        2 結(jié)果
            2.1 單抗夾心ELISA方法最佳工作條件的確定
            2.2 單抗夾心ELISA檢測(cè)方法操作程序的確定
            2.3 單抗夾心ELISA陽(yáng)性臨界值的確定
            2.4 特異性試驗(yàn)
            2.5 敏感性試驗(yàn)
            2.6 重復(fù)性試驗(yàn)
            2.7 對(duì)臨床樣品的檢測(cè)
        3 討論
        Abstract
        參考文獻(xiàn)
    第二章 犬瘟熱病毒抗體間接ELISA檢測(cè)方法的建立及臨床應(yīng)用
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 病毒、血清和細(xì)胞
            1.2 主要試劑
            1.3 抗原的制備
            1.4 間接ELISA檢測(cè)方法最佳工作條件的確定
            1.5 間接ELISA檢測(cè)方法結(jié)果的判定
            1.6 敏感性試驗(yàn)
            1.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)
            1.8 對(duì)臨床樣品的檢測(cè)
        2 結(jié)果
            2.1 抗原的制備
            2.2 間接ELISA檢測(cè)方法最佳工作條件的確定
            2.3 間接ELISA檢測(cè)方法操作程序的確定
            2.4 間接ELISA檢測(cè)方法結(jié)果的判定
            2.5 敏感性試驗(yàn)
            2.6 重復(fù)性試驗(yàn)
            2.7 對(duì)臨床樣品的檢測(cè)
        3 討論
        Abstract
        參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
附錄：常用試劑的配制
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]同時(shí)檢測(cè)犬瘟熱病毒、犬細(xì)小病毒、Ⅰ型和Ⅱ型犬腺病毒多重PCR方法的建立[J]. 劉大飛,姜一曈,戚亭,程景,劉立奎,林文君,柴洪亮,楊天闊,王翀,華育平,曲連東,張洪英.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2012(11)
[2]犬瘟熱病毒野毒株與疫苗株鑒別檢測(cè)RT-LAMP方法的建立[J]. 楊天闊,劉大飛,姜騫,張洪英,曲連東.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2012(06)
[3]犬瘟熱病毒RT-PCR檢測(cè)方法的建立[J]. 郭玲,萬(wàn)莉,馬磊,張琦,謝志勇,楊映,舒蕾,陳世界,楊曉農(nóng),顏其貴.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2012(02)
[4]熒光定量RT-PCR法對(duì)犬瘟熱病毒PS株感染犬血清和糞便中病毒的檢測(cè)[J]. 許紅麗,易立,王建科,楊莘,程世鵬.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2012(01)
[5]犬瘟熱病毒單抗夾心ELISA檢測(cè)方法的建立[J]. 張鴻,胡傳莉,賀生中,李玲,朱善元,翟曉虎.  揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版). 2011(04)
[6]非典型犬瘟熱病毒核衣殼蛋白基因序列分析及其在大腸桿菌中的表達(dá)[J]. 畢振威,王永山,范紅結(jié),王智群,吳曉悠,馬金榮,歐陽(yáng)偉,張海彬.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(08)
[7]膠體金免疫層析技術(shù)在動(dòng)物疾病診斷中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 李志源,張建斌,楊百亮.  天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào). 2011(01)
[8]犬瘟熱病毒反轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增診斷方法的建立[J]. 劉彩玉,王吉貴,袁道莉,王爽,朱新產(chǎn),劉維全.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2010(04)
[9]犬瘟熱病毒（CDV）ELISA檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用[J]. 王吉,衛(wèi)禮,付瑞,鞏薇,岳秉飛,賀爭(zhēng)鳴.  中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志. 2009(04)
[10]犬瘟熱病毒核蛋白基因的原核表達(dá)及其間接ELISA檢測(cè)方法的建立[J]. 袁寶,王琛,任文陟,張嘉保,趙志輝.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2008(07)

碩士論文
[1]犬常見(jiàn)病毒病診斷基因芯片的研究與應(yīng)用[D]. 張偉.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號(hào)：3071639