目的:奶牛乳腺炎是奶牛養(yǎng)殖業(yè)常見的乳腺疾病,嚴重影響了奶牛的健康與生產(chǎn)性能,甚至對人類健康也有所影響,我國奶牛業(yè)奶牛乳腺炎的發(fā)病率一直居高不下,對社會經(jīng)濟造成了巨大的損害。金黃色葡萄球菌是奶牛乳腺炎的主要病原菌之一。TGF-β1是一種多功能的細胞因子,對調(diào)節(jié)機體免疫及細胞增殖發(fā)揮重要的作用。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)乳腺炎多發(fā)的奶牛群TGF-β1水平較高,并且TGF-β1會增加奶牛乳腺上皮細胞對金黃色葡萄球菌的易感性。然而,在TGF-β1作用下,奶牛乳腺上皮細胞是否會通過細胞間通訊影響免疫細胞的功能卻仍然是未知的。因此本研究假設在TGF-β1作用下,奶牛乳腺上皮細胞來源的外泌體會影響牛巨噬細胞的功能,旨在探討在TGF-β1作用下,奶牛乳腺上皮細胞來源的外泌體影響牛巨噬細胞的功能的機制。方法:在本研究中我們通過超速離心法和試劑盒法提取了正常牛乳腺上皮細胞（MAC-T）來源的外泌體（un-exo）和TGF-β1作用下牛乳腺上皮細胞來源的外泌體（t-exo）,分別作用于牛巨噬細胞,通過MTT實驗和細胞流式實驗檢測了兩種外泌體體對牛巨噬細胞增殖和細胞周期的影響,采用q RT-PCR和Western ... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

來源于未處理的MAC-T細胞（un-exo）和TGFβ1處理的MAC-T細胞（t-exo）

第二篇 研究內(nèi)容 第一章 TGF-β1 作用下牛乳腺上皮細胞來源外泌體對牛巨噬細胞增殖、凋亡和細胞周期的影響及機制研究 間的 BOSMAC 中 p38 的 mRNA 表達水平。如圖 3C 所示，t-exo 處理顯著提高了 BOSMAC 中 p38 的 mRNA 表達水平。這些結(jié)果表明，在 TGF-β1 作用下來源于牛乳腺上皮細胞的外泌體可誘導牛巨噬細胞中 p38 的表達和磷酸化。

且兩種來源外泌體對引起牛巨噬細胞凋亡的能力無顯著差異（圖5A 和圖 5B）。FADD 又名 fas 相關死亡域蛋白，可以與 caspase8 相互作用是后者激活，從而形成死亡誘導信號復合物，再激活一系列的 Caspase-1, 3, 7 等，促進Fas 蛋白所在細胞的凋亡發(fā)生。Western blot 結(jié)果顯示，相比于對照組，un-exo 組和 t-exo 組 FADD 蛋白、caspase8 蛋白的表達量都顯著降低�？傊�，這些數(shù)據(jù)表明，牛乳腺上皮細胞來源的外泌體可以誘導牛巨噬細胞凋亡，這一過程不依賴FADD 信號通路，且 TGF-β1 作用對于牛乳腺上皮細胞來源的外泌體誘導牛巨噬細胞凋亡無顯著影響。


本文編號：3071298