目的:奶牛乳腺炎是奶牛養(yǎng)殖業(yè)常見的乳腺疾病,嚴(yán)重影響了奶牛的健康與生產(chǎn)性能,甚至對人類健康也有所影響,我國奶牛業(yè)奶牛乳腺炎的發(fā)病率一直居高不下,對社會經(jīng)濟(jì)造成了巨大的損害。金黃色葡萄球菌是奶牛乳腺炎的主要病原菌之一。TGF-β1是一種多功能的細(xì)胞因子,對調(diào)節(jié)機(jī)體免疫及細(xì)胞增殖發(fā)揮重要的作用。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)乳腺炎多發(fā)的奶牛群TGF-β1水平較高,并且TGF-β1會增加奶牛乳腺上皮細(xì)胞對金黃色葡萄球菌的易感性。然而,在TGF-β1作用下,奶牛乳腺上皮細(xì)胞是否會通過細(xì)胞間通訊影響免疫細(xì)胞的功能卻仍然是未知的。因此本研究假設(shè)在TGF-β1作用下,奶牛乳腺上皮細(xì)胞來源的外泌體會影響牛巨噬細(xì)胞的功能,旨在探討在TGF-β1作用下,奶牛乳腺上皮細(xì)胞來源的外泌體影響牛巨噬細(xì)胞的功能的機(jī)制。方法:在本研究中我們通過超速離心法和試劑盒法提取了正常牛乳腺上皮細(xì)胞（MAC-T）來源的外泌體（un-exo）和TGF-β1作用下牛乳腺上皮細(xì)胞來源的外泌體（t-exo）,分別作用于牛巨噬細(xì)胞,通過MTT實驗和細(xì)胞流式實驗檢測了兩種外泌體體對牛巨噬細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的影響,采用q RT-PCR和Western ... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

來源于未處理的MAC-T細(xì)胞（un-exo）和TGFβ1處理的MAC-T細(xì)胞（t-exo）

第二篇 研究內(nèi)容 第一章 TGF-β1 作用下牛乳腺上皮細(xì)胞來源外泌體對牛巨噬細(xì)胞增殖、凋亡和細(xì)胞周期的影響及機(jī)制研究 間的 BOSMAC 中 p38 的 mRNA 表達(dá)水平。如圖 3C 所示，t-exo 處理顯著提高了 BOSMAC 中 p38 的 mRNA 表達(dá)水平。這些結(jié)果表明，在 TGF-β1 作用下來源于牛乳腺上皮細(xì)胞的外泌體可誘導(dǎo)牛巨噬細(xì)胞中 p38 的表達(dá)和磷酸化。

且兩種來源外泌體對引起牛巨噬細(xì)胞凋亡的能力無顯著差異（圖5A 和圖 5B）。FADD 又名 fas 相關(guān)死亡域蛋白，可以與 caspase8 相互作用是后者激活，從而形成死亡誘導(dǎo)信號復(fù)合物，再激活一系列的 Caspase-1, 3, 7 等，促進(jìn)Fas 蛋白所在細(xì)胞的凋亡發(fā)生。Western blot 結(jié)果顯示，相比于對照組，un-exo 組和 t-exo 組 FADD 蛋白、caspase8 蛋白的表達(dá)量都顯著降低�？傊�，這些數(shù)據(jù)表明，牛乳腺上皮細(xì)胞來源的外泌體可以誘導(dǎo)牛巨噬細(xì)胞凋亡，這一過程不依賴FADD 信號通路，且 TGF-β1 作用對于牛乳腺上皮細(xì)胞來源的外泌體誘導(dǎo)牛巨噬細(xì)胞凋亡無顯著影響。


本文編號：3071298