H5N1血清亞型禽流感病毒引起的高致病性禽流感（HPAI）是具有畜牧業(yè)經(jīng)濟(jì)價(jià)值和全球公共衛(wèi)生意義的重要傳染病。迄今防控該病的策略主要有疫苗接種健康動(dòng)物與撲殺染疫動(dòng)物兩種主要方式，前者不適用于候鳥(niǎo)并且無(wú)法應(yīng)對(duì)新的病毒變異株，后者經(jīng)濟(jì)成本高昂。針對(duì)能代表機(jī)體細(xì)胞免疫水平的廣譜抗病毒細(xì)胞因子γ干擾素（IFN-γ）和迄今公認(rèn)具有高度等位基因多態(tài)性的疾病抗性基因群主要組織相容復(fù)合體（MHC），本研究以文獻(xiàn)報(bào)道HPAI抗病力較強(qiáng)的紅色原雞（Gallus gallus）為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，接種H5N1高致病性禽流感滅活疫苗，采用病毒血凝抑制（HI）試驗(yàn)檢測(cè)血清抗體效價(jià)，通過(guò)PCR+1擴(kuò)增IFN-γ啟動(dòng)子序列，再經(jīng)克隆及測(cè)序確定其單核苷酸多態(tài)性（SNP）位點(diǎn)、數(shù)量、類型及頻率，同時(shí)采用常規(guī)PCR擴(kuò)增MHC-BL區(qū)域內(nèi)的微衛(wèi)星序列LEI0258與MCW0371以確定MHC單倍型。應(yīng)用Pearson卡方檢驗(yàn)分析IFN-γ啟動(dòng)子SNP等位基因分布是否處于Hardy-Weinberg平衡，隨后采用普通線性模型（GLM）對(duì)特定SNP基因型頻率與抗體效價(jià)的相關(guān)性進(jìn)行最小二乘分析。應(yīng)用單因素方差分析檢查MHC單倍型與抗體效... 

【文章來(lái)源】：云南農(nóng)業(yè)大學(xué)云南省

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1兩個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)在MHC上的位置

圖 2 MHC I 類分子和 MHC II 類的結(jié)構(gòu)示意圖L:信號(hào)肽;α1, α2, α3, β1 ,β2；Tm：跨膜區(qū)；C：胞漿區(qū)PBR：抗原結(jié)合區(qū)；β2m：β2 微球蛋白；N-氨基端；C- 羧基端。Figure 2 The structure profiles of MHC class I and II molecululesL: signal peptide; α1,α2, α3, β1 ,β2; Tm:Trans-membrane region; C: cytoplasmicdomain; PBR: peptide binding region;β2m：β2 microglobulin.N- amino terminal; C-: carboxyl terminal.1.3.3.1 MHC 與馬立克氏病抗性的關(guān)系盡管人和鼠等哺乳動(dòng)物的 MHC 分子的結(jié)構(gòu)和功能研究已經(jīng)很詳細(xì)[62-65]，而雞研究相對(duì)較落后，尤其是雞 MHC-BL 分子。BL 基因編碼對(duì)應(yīng)著的 MHCⅡ類抗原主要存在淋巴細(xì)胞表面，對(duì)體液免疫有重要作用 Pharr 等（Pharr 等，1998）大量研已經(jīng)證實(shí)，雞 BL 單倍型與多種傳染性疾病的遺傳抗性高度相關(guān)[66] [67]。對(duì)雞 MHC 病性研究最成熟的應(yīng)為馬立克氏病(Marek's disease, MD)。雞對(duì) MD 具有明顯的遺傳性抗性，一般認(rèn)為其遺傳力為 0.60~0.67 或者是 0.40[68因此，抗性選育是一個(gè)控制 MD 的有效途徑。雞的 MD 是由皰疹病毒引起的，近

1.4 紅色原雞概述紅色原雞作為云南特有較強(qiáng)抗病力的原始雞品種，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，有豐富的群體遺傳多樣性[75-77]，并且被認(rèn)為對(duì)我國(guó)家雞遺傳多樣性的品種貢獻(xiàn)率最高，是改良、培育雞品種不可多得的遺傳素材。紅色原雞長(zhǎng)期生活在濕熱的熱帶環(huán)境，具有適應(yīng)性強(qiáng)、耐粗放飼養(yǎng)的特點(diǎn)（圖 3）�，F(xiàn)滇南有散養(yǎng)紅色原雞并且?guī)缀鯊牟粚?duì)其接種任何疫苗的傳統(tǒng)。在 2004 年初東南亞暴發(fā) H5N1 高致病性禽流感（HPAI）期間，西雙版納紅色原雞雖未接種過(guò) HPAI 疫苗，也未見(jiàn)該病在其中流行（針對(duì)該病的國(guó)家強(qiáng)制免疫計(jì)劃始于 2008 年），這與流傳紅色原雞抗病力強(qiáng)的說(shuō)法基本吻合[78]，固很可能具有類似對(duì) HPAI 的強(qiáng)抗病力。但現(xiàn)有國(guó)內(nèi)外還未對(duì)相應(yīng)的抗性機(jī)理做深入調(diào)查。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2009—2011年湖南省禽流感外環(huán)境監(jiān)測(cè)結(jié)果分析[J]. 胡世雄,孫倩萊,劉富強(qiáng),楊浩,黃一偉.  疾病監(jiān)測(cè). 2014(03)
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博士論文
[1]紅腹錦雞MHC I類座位的分離及其適應(yīng)性進(jìn)化研究[D]. 曾倩倩.浙江大學(xué) 2013
[2]紅腹錦雞SSR和Ⅱ類MHC位點(diǎn)的分離及種群遺傳結(jié)構(gòu)分析[D]. 何珂.浙江大學(xué) 2012

碩士論文
[1]慢性丙型肝炎患者I型干擾素受體啟動(dòng)子基因多態(tài)性與抗病毒療效的關(guān)系[D]. 郭潔.天津醫(yī)科大學(xué) 2013
[2]雞Mx基因和MHC基因座的遺傳多樣性[D]. 金麗娜.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3069260