【目的】評價健康奶牛生殖道分離乳酸菌益生特性,發(fā)掘其作為益生菌制劑細菌成分的可能性,為開發(fā)防治奶牛子宮內(nèi)膜炎的微生態(tài)制劑提供科學依據(jù)�！痉椒ā恳灾蹦c把握法無菌采集產(chǎn)后40～60 d健康奶牛子宮分泌物,采用MRS培養(yǎng)基在厭氧條件（氧氣濃度<1.2%,37℃）下分離乳酸菌,通過擴增16S r DNA序列進行鑒定,并進行抑菌活性、耐藥性、黏附子宮內(nèi)膜上皮細胞特性及安全性評估,分析其開發(fā)成益生菌制劑的可能性�！窘Y(jié)果】經(jīng)16S r DNA測序分析共獲得8株乳酸菌,分別為植物乳桿菌、副干酪乳桿菌、蠟樣芽孢桿菌、鼠李糖桿菌、蒙氏腸球菌、德氏乳桿菌、戊糖乳桿菌和嗜熱鏈球菌,根據(jù)預試驗結(jié)果選取其中3株（植物乳桿菌、副干酪乳桿菌和鼠李糖桿菌）進行益生特性評價。3株奶牛生殖道乳酸菌培養(yǎng)上清液對大腸桿菌、無乳鏈球菌及金黃色葡萄球菌均表現(xiàn)出良好的抑制效果,約在接種3 h后進入典型的指數(shù)生長期,生長至平臺期后植物乳桿菌OD_{620 nm}為1.375、鼠李糖桿菌OD_{620 nm}為1.314、副干酪乳桿菌OD_{620 nm}為1.250。副干酪乳桿菌的... 

【文章來源】：南方農(nóng)業(yè)學報. 2020,51(09)北大核心

【文章頁數(shù)】：9 頁

【部分圖文】：

乳酸菌16S r DNA的PCR擴增電泳結(jié)果

3株奶牛生殖道乳酸菌均隨生長時間的推移，其菌體濃度逐漸增加，約在接種3 h后即進入典型的指數(shù)生長期，至接種9 h后生長曲線趨于平坦，在接種13～14 h時達最大值（圖4）。乳酸菌生長至平臺期后，植物乳桿菌OD620 nm為1.375，鼠李糖桿菌OD620 nm為1.314，副干酪乳桿菌OD620 nm為1.250。由圖5可看出，3株奶牛生殖道乳酸菌的產(chǎn)酸情況在接種14～16 h時達平臺期，但在接種16 h后發(fā)酵液p H還在繼續(xù)降低，直到接種24 h后發(fā)酵液p H才趨于穩(wěn)定，說明植物乳桿菌、副干酪乳桿菌和鼠李糖桿菌在接種16 h后其產(chǎn)酸過程仍在繼續(xù)，并于接種24 h時達產(chǎn)酸最大值。其中，副干酪乳桿菌最先到達穩(wěn)定期且產(chǎn)酸能力最強，其發(fā)酵液p H達3.68；植物乳桿菌和鼠李糖桿菌的產(chǎn)酸能力幾乎相同，發(fā)酵結(jié)束后其p H分別為3.80和3.82。此外，植物乳桿菌、副干酪乳桿菌和鼠李糖桿菌在MRS培養(yǎng)基上形成的菌落顏色均無明顯變化，說明不產(chǎn)H2O2。

由圖5可看出，3株奶牛生殖道乳酸菌的產(chǎn)酸情況在接種14～16 h時達平臺期，但在接種16 h后發(fā)酵液p H還在繼續(xù)降低，直到接種24 h后發(fā)酵液p H才趨于穩(wěn)定，說明植物乳桿菌、副干酪乳桿菌和鼠李糖桿菌在接種16 h后其產(chǎn)酸過程仍在繼續(xù)，并于接種24 h時達產(chǎn)酸最大值。其中，副干酪乳桿菌最先到達穩(wěn)定期且產(chǎn)酸能力最強，其發(fā)酵液p H達3.68；植物乳桿菌和鼠李糖桿菌的產(chǎn)酸能力幾乎相同，發(fā)酵結(jié)束后其p H分別為3.80和3.82。此外，植物乳桿菌、副干酪乳桿菌和鼠李糖桿菌在MRS培養(yǎng)基上形成的菌落顏色均無明顯變化，說明不產(chǎn)H2O2。圖4 奶牛生殖道乳酸菌的生長曲線

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[2]奶牛生殖道內(nèi)益生乳酸菌的分離、篩選及功能特性研究[D]. 李向楠.吉林農(nóng)業(yè)大學 2014
[3]奶牛生殖道菌群分析和乳酸菌的分離與鑒定及其生物學特性研究[D]. 侯榮倫.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學 2011
[4]奶牛子宮內(nèi)膜炎菌群分析及微生態(tài)制劑對其療效觀察[D]. 李炳志.西北農(nóng)林科技大學 2008



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