本文關鍵詞：藏豬源益生芽孢桿菌的分離鑒定及候選益生菌株的篩選，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：抗生素可降低動物患病機率,提高動物生長性能,提高養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟效益,但隨著抗生素的過量使用,出現(xiàn)如病原菌耐藥、畜產(chǎn)品抗生素殘留等問題。微生態(tài)制劑中的益生菌可以在胃腸道調(diào)節(jié)動物體微生態(tài)平衡,實現(xiàn)預防疾病、提高動物生產(chǎn)性能,因此使用微生態(tài)制劑替代抗生素已成為一種趨勢,而其中的芽孢桿菌制劑因其具有較高的抗逆性而應用得較為廣泛。藏豬是中國特有的國寶級高原放牧型食草豬種,其適應力極強,能夠在青藏高原低氧、嚴寒的惡劣環(huán)境中依靠草等粗纖維作為營養(yǎng)物進行生長繁殖,且極少患病,藏豬資源開發(fā)具有可觀的前景。本試驗以西藏林芝地區(qū)健康藏豬糞便為試驗材料,從中分離有益生潛力的芽孢桿菌,首先將健康藏豬糞便濾液于90℃水浴處理10分鐘殺死樣品中的非芽孢桿菌,再進行拮抗試驗篩選能抑制常見病原菌的芽孢桿菌,綜合形態(tài)學、生理生化特征及16S rDNA序列分析對篩選菌株進行鑒定,通過菌株耐受性試驗、產(chǎn)水解酶試驗、抗生素敏感試驗等對菌株生物學特性進行研究,選出最佳菌株,最后對最佳菌株在小鼠和飼料應用方面進行了初步探索。具體結果如下:1、從4份健康藏豬糞便樣品中分離到56株芽孢桿菌,通過拮抗試驗從中篩選到3株對常見病原菌(沙門氏菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌)具有一定抑制作用的芽孢桿菌,然后通過生理生化試驗和16S rDNA鑒定分析,確定菌株SWUN-TP13和SWUN-TP22為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、菌株SWUN-TP23為解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)。2、對篩選到的枯草芽孢桿菌SWUN-TP13、SWUN-TP22和解淀粉芽孢桿菌SWUN-TP23的生物學特性進行研究,發(fā)現(xiàn)解淀粉芽孢桿菌SWUN-TP23具有良好的潛在益生能力,其在不利環(huán)境中具有較強的穩(wěn)定性,可代謝產(chǎn)生纖維素酶、淀粉酶和蛋白酶,菌體對大多數(shù)含常用獸用抗生素敏感。3、通過對解淀粉芽孢桿菌SWUN-TP23在小鼠和飼料應用方面的初步研究,發(fā)現(xiàn)該菌株能在一定程度上提高小鼠生長性能和免疫力,且對黃曲霉毒素B1(AFB1)具有一定的降解作用。
【關鍵詞】：藏豬 芽孢桿菌 益生菌 分離 鑒定 解淀粉芽孢桿菌
【學位授予單位】：西南民族大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S852.6
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-11
• 第一章 緒論11-20
• 1 抗生素在畜牧業(yè)生產(chǎn)中使用現(xiàn)狀及存在問題11-12
• 1.1 飼用抗生素的使用現(xiàn)狀11-12
• 1.2 過量使用抗生素存在的問題12
• 2 替代抗生素添加的物質(zhì)種類12-14
• 2.1 微生態(tài)制劑13
• 2.2 飼用酶制劑13
• 2.3 抗菌肽制劑13
• 2.4 天然中草藥制劑13-14
• 3 微生態(tài)制劑研究現(xiàn)狀14-16
• 3.1 微生態(tài)制劑概述14
• 3.2 微生態(tài)制劑益生機理14-15
• 3.3 影響微生態(tài)制劑益生因素15-16
• 4 益生芽孢桿菌研究進展16-17
• 4.1 芽孢桿菌概述16
• 4.2 益生芽孢桿菌應用現(xiàn)狀16-17
• 5 解淀粉芽孢桿菌研究進展17-18
• 5.1 解淀粉芽孢桿菌概況17
• 5.2 解淀粉芽孢桿菌研究現(xiàn)狀17-18
• 6 本研究背景及目的意義18-20
• 第二章 藏豬源益生芽孢桿菌的分離和鑒定20-32
• 1 試驗材料20-22
• 1.1 樣品來源20
• 1.2 試驗菌株20
• 1.3 主要試劑及配制20-21
• 1.4 培養(yǎng)基21
• 1.5 主要儀器21-22
• 2 試驗方法22-26
• 2.1 芽孢桿菌的分離及純化22-23
• 2.2 抑菌菌株的篩選23
• 2.3 篩選菌株生理生化試驗23-24
• 2.4 菌株分子生物學鑒定24-26
• 3 結果與分析26-30
• 3.1 芽孢桿菌的分離及篩選26
• 3.2 生理生化特性26-27
• 3.3 16S rDNA分子生物學鑒定分析27-30
• 4 討論30
• 5 小結30-32
• 第三章 候選益生菌株生物學特性研究32-42
• 1 試驗材料32-34
• 1.1 試驗菌種32
• 1.2 主要試劑及配制32-33
• 1.3 培養(yǎng)基33
• 1.4 主要儀器33-34
• 2 試驗方法34-35
• 2.1 耐人工胃液試驗34
• 2.2 耐人工腸液試驗34
• 2.3 耐膽鹽試驗34
• 2.4 水解酶試驗34-35
• 2.5 藥敏試驗35
• 2.6 耐高溫試驗35
• 3 結果與分析35-40
• 3.1 枯草芽孢桿菌SWUN-TP13在人工胃液環(huán)境中具有較強的抗逆性35-36
• 3.2 解淀粉芽孢桿菌SWUN-TP23在人工腸液環(huán)境中具有較強的抗逆性36-37
• 3.3 枯草芽孢桿菌SWUN-TP13和解淀粉芽孢桿菌SWUN-TP23在膽鹽環(huán)境中抗逆性相當37
• 3.4 解淀粉芽孢桿菌SWUN-TP23可產(chǎn)生纖維素酶、蛋白酶和淀粉酶37-38
• 3.5 各菌株對大多數(shù)獸用抗生素敏感38-39
• 3.6 解淀粉芽孢桿菌SWUN-TP23在熱環(huán)境中穩(wěn)定性較好39-40
• 4 討論40-41
• 5 小結41-42
• 第四章 菌株SWUN-TP23對小鼠影響及黃曲霉毒素降解研究42-51
• 1 試驗材料42-44
• 1.1 試驗菌種42
• 1.2 主要試劑及配制42-43
• 1.3 培養(yǎng)基及飼料43
• 1.4 主要儀器43-44
• 1.5 試驗動物44
• 2 試驗方法44-46
• 2.1 小鼠體重影響試驗44
• 2.2 小鼠內(nèi)臟影響試驗44-45
• 2.3 對黃曲霉毒素B1（AFB1）降解試驗45-46
• 3 結果與分析46-49
• 3.1 解淀粉芽孢桿菌SWUN-TP23可促進小鼠生長和刺激免疫器官發(fā)育46-47
• 3.2 解淀粉芽孢桿菌SWUN-TP23對小鼠內(nèi)臟器官無損害47-48
• 3.3 解淀粉芽孢桿菌SWUN-TP23具有降解黃曲霉毒素B1的能力48-49
• 4 討論49-50
• 5 小結50-51
• 第五章 結論與展望51-52
• 1 結論51
• 2 展望51-52
• 參考文獻52-57
• 致謝57-58

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