脂肪間充質(zhì)干細胞（Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells,ADSCs）是具有多向分化潛能的成體干細胞。在嚴重的創(chuàng)傷性疾病、自身免疫病、代謝性疾病和退行性疾病等多種疾病模型中,ADSCs移植都能表現(xiàn)出良好的治療效果。另外,由于其獲取方便,沒有倫理道德爭議,沒有致瘤性,取材對機體損傷較小等優(yōu)點使其成為干細胞治療的理想種子細胞和研究熱點。在獸醫(yī)臨床中,犬的ADSCs移植也具有廣闊的應(yīng)用前景。但是由于ADSCs移植前體外富集擴增的過程不可避免的會引起細胞的衰老,影響移植存活率和治療效果。而褪黑素（Melatonin,Mel）在多種動物、細胞模型中都被報道具有調(diào)節(jié)生物節(jié)律,抗氧化和抗衰老的作用。因此,本研究以體外多次傳代衰老的c ADSCs為模型,針對Mel抗ADSCs衰老的作用效果,Mel介導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激延緩cADSCs衰老的機制開展了研究,獲得以下研究結(jié)果:1.體外多次傳代可以造成cADSCs衰老,且Mel能通過降低ERS緩解cADSCs衰老。通過衰老相關(guān)β半乳糖苷酶染色、體外誘導(dǎo)分化試驗、端粒相對長度和端粒酶活性檢測、real-time PCR和west... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：110 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

細胞衰老表型

8 褪黑素介導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激延緩犬脂肪間充質(zhì)干細胞衰老作用的機制量控制有關(guān)基因的表達，其中也包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)蛋白降解途徑（endoplasmireticulum-associated degradation，ERAD）相關(guān)基因的表達。由于 IRE1 攜帶的RNase 活性區(qū)域，它可以識別特定的序列和二級結(jié)構(gòu)，降解許多 mRNA、核糖體RNA、和 microRNA，這一作用被稱為 RIDD（regulated IRE1-dependent decay）IRE1a 通過 RIDD 調(diào)控細胞中許多生理過程，如炎癥和細胞凋亡（Maurel et a2014）。IRE1 還可以通過與一些接頭蛋白識別參與應(yīng)激相關(guān)細胞通路，如 JNK通路和 NF-κB 通路（Hetz et al. 2015）。

Mel 還能刺激細胞內(nèi)的抗氧化酶，包括超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶的基因表達，提高線粒體功能（Tan et al. 2013）。在體內(nèi)和體外試驗中都已經(jīng)證明，Mel 具有清除 ROS 和誘導(dǎo)抗氧化反應(yīng)的作用。然而在一些試驗中證實高濃度的 Mel 還具有促氧化的能力（Zhang andZhang 2014），并且具有細胞種類的偏向性，在腫瘤細胞中 Mel 表現(xiàn)出促氧化作用，而在正常細胞中卻表現(xiàn)出抗氧化，抗凋亡作用。目前，Mel 的促氧化作用機制還不明確，可能與鈣調(diào)素激活或線粒體功能障礙有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)源性的 Mel 存在于包括細菌在內(nèi)的任何生物細胞中（Manchesteret al. 2015）。隨著生物的進化，Mel 由最初的抗氧化功能衍生出生物鐘調(diào)節(jié)功能（Schippers and Nichols 2014）（圖 2-1）。Mel 的抗氧化能力與線粒體和葉綠體之間的聯(lián)系尤為密切。線粒體和葉綠體是有毒的自由基大量形成的部位，同時也是 Mel 產(chǎn)生的場所（Tan et al. 2013）。因此，在這些細胞器中 Mel 的存在高效的清除自由基，避免鄰近的脂質(zhì)、蛋白和 DNA 遭到破壞。如果 Mel 不能在這些細胞器中合成，受損的分子將造成這些細胞器的功能加速退化，線粒體功能的下降或喪失，細胞發(fā)生衰老（Parihar et al. 2015）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]乙肝扶正排毒膠囊聯(lián)合醫(yī)用三氧對犬四氯化碳肝損傷的保護作用[J]. 李莉潔,楊運高,王程,張志凌,霍荻,華何與,陳佩禪,張紅栓,郭亞兵.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2007(05)



本文編號：3059609