本論文運用實時熒光定量（RT-PCR）技術(shù),研究了不同生理階段對荷斯坦奶牛瘤胃中總細菌、白色瘤胃球菌、黃色瘤胃球菌、產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌、溶纖維丁酸弧菌、普雷沃氏菌、牛鏈球菌以及嗜淀粉瘤胃桿菌數(shù)量的影響;同時運用16S rRNA高通量測序技術(shù)探究了不同生理階段奶牛瘤胃細菌多樣性的變化規(guī)律,并與泌乳性能進行了相關(guān)分析;此外,還探究了生理階段對奶牛瘤胃發(fā)酵參數(shù)和養(yǎng)分表觀消化率的影響。本研究采用單因素隨機試驗設(shè)計,選取圍產(chǎn)前期、泌乳前期、泌乳中期、泌乳后期和干奶期經(jīng)產(chǎn)荷斯坦奶牛各4頭。在奶牛晨飼后6h,采集瘤胃食糜,用于測定不同生理階段奶牛瘤胃中8株細菌的數(shù)量、細菌多樣性和瘤胃發(fā)酵參數(shù);采集各生理階段奶牛飼料樣與糞樣,用于測定不同生理階段奶牛養(yǎng)分表觀消化率。試驗結(jié)果表明:（1）奶牛從圍產(chǎn)前期進入泌乳期,黃色瘤胃球菌、產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌和總細菌的數(shù)量顯著降低（P<0.05）,進入干奶期后,顯著升高（P<0.05）隨后恢復到與圍產(chǎn)前期相似水平（P>0.05）。然而牛鏈球菌、普雷沃氏菌和嗜淀粉瘤胃球菌數(shù)量的變化趨勢與之相反。白色瘤胃球菌和溶纖維丁酸弧菌數(shù)量在各個生理階段無顯著差異（P&... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

瘤胃基因組DNA凝膠圖

圖 3 8種瘤胃細菌 PCR擴增結(jié)果Fig.3 PCR amplification results of 8 ruminal bacteria白色瘤胃球菌、黃色瘤胃球菌、產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌、總細菌、溶纖雷沃氏菌 PCR擴增結(jié)果。 eight were amplification results of R.albus, R.flavefaciens, F.succinorevotella and Ruminobacter amylophilus.菌陽性克隆測序結(jié)果膠回收之后進行克隆，挑選單克隆菌落于液體培養(yǎng) 檢測，被確證為目的片段后送檢測序。對克隆成功得目的基因片段與 8 種瘤胃細菌的片段同源性很完整，說明成功構(gòu)建了含有目的片段的質(zhì)粒。粒的標準曲線貝數(shù)與 Ct 值的對應(yīng)關(guān)系繪制標準曲線（見圖 4），

八株瘤胃細菌的標準曲線


本文編號：3058305