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靶向DEC-205的豬圓環(huán)病毒Capsid疫苗的設(shè)計及其免疫應(yīng)答研究

發(fā)布時間:2021-02-27 08:47
  豬圓環(huán)病毒(Porcine circovirus,PCV)是一種導致豬群免疫力下降的病毒,并與豬斷奶后多系統(tǒng)衰弱綜合癥(Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome,PMWS)、豬皮炎及腎病綜合癥(Porcine Dermatitis and Nephropathy Syndrome,PDNS)等多種疾病有著聯(lián)系。疫苗是預(yù)防和控制豬群PCV感染的有效方式,目前已研發(fā)出病毒滅活苗、亞單位疫苗等多種PCV疫苗,但存在疫苗制備工藝復雜,減毒疫苗的低安全性、亞單位疫苗低免疫原性免疫保護效力局限等一些問題。豬圓環(huán)病毒主要由衣殼蛋白Cap蛋白和基因組構(gòu)成,其中Cap蛋白是公認的主要免疫保護性抗原,將是PCV疫苗研制的有效候選抗原。DEC-205是一種表達于大多數(shù)APCs表面的受體,屬于甘露糖受體家族,在抗原內(nèi)化、處理及提呈的過程中扮演重要角色,尤其在對外源性抗原交叉提呈的過程中受到廣大研究者的關(guān)注。目前國內(nèi)外許多研究表明:將病毒的主要保護性抗原,如gag(Human Immunodeficiency Virus,HIV),EDⅢ(Dengue Virus,D... 

【文章來源】:重慶大學重慶市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:120 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

靶向DEC-205的豬圓環(huán)病毒Capsid疫苗的設(shè)計及其免疫應(yīng)答研究


豬圓環(huán)病毒平面示意圖(A)、三維立體示意圖(B)和電子顯微鏡圖片(C)(圖

示意圖,預(yù)冷,重組載體構(gòu)建,重鏈可變區(qū)


基不添加任何抗生素;培養(yǎng)大腸桿菌 DH5α(contain vector pTARA)、TOP10(containvector pTARA)、BL21(plus)和 Rosetta(DE3) plysS 的 LB 培養(yǎng)基添加終濃度為34ug/ml 的氯霉素),37℃,160 rpm 培養(yǎng),待細菌生長至對數(shù)生長早期(OD600=0.4)。將菌液放置冰上預(yù)冷 20min,隨后 4℃,4000 rpm/min 離心 10 min,棄上清,用 1%體積(1ml)預(yù)冷的CaCl2溶液重懸細菌沉淀,隨后繼續(xù)4℃,4000 rpm/min離心10 min,棄上清。最后添加預(yù)冷的 CaCl2溶液,冰浴 24-48h,最后添加終濃度為 20%的甘油,放置-80℃保存?zhèn)溆谩?.3.2 載體構(gòu)建示意圖

質(zhì)粒


圖 2.2 構(gòu)建重組克隆質(zhì)粒 pUC57-scFvDEC205-Cap2.2 The construction of recombinant clone vector pUC57-scFvDEC20

【參考文獻】:
期刊論文
[1]負載重組口蹄疫病毒VP4蛋白的樹突狀細胞啟動的T細胞應(yīng)答[J]. 安鵬麗,李娜,李麗敏,張麗,張雷,高云歡,王家鑫.  畜牧獸醫(yī)學報. 2012(10)



本文編號:3053984

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