森林革蜱半飽血雄蜱抑制性消減cDNA文庫的構(gòu)建及功能性基因的篩選
發(fā)布時(shí)間:2021-02-27 07:39
森林革蜱(Dermacentor silvarum)存在于中國北部、俄羅斯和蒙古地區(qū),是一種專性吸血節(jié)肢動(dòng)物,也是一種蜱傳播的疾病攜帶介質(zhì),可以傳播多種疾病,如森林腦炎病毒、貝氏立克次體、西伯利亞立克次氏體和布魯士桿菌等。蜱可對(duì)人畜造成嚴(yán)重危害并引起巨大經(jīng)濟(jì)損失。目前,對(duì)蜱通過化學(xué),生物學(xué),遺傳學(xué)和免疫學(xué)的四個(gè)階段的控制,前三者取得了一定的成效,由于化學(xué)防治存在藥物殘留和環(huán)境污染,生物學(xué)和遺傳學(xué)防治手段存在不可控性,因此,免疫學(xué)防治方法成為現(xiàn)如今防治蜱炙手可熱的研究方向。抑制消減雜交技術(shù)是用于篩選差異基因的技術(shù),該技術(shù)以PCR為基礎(chǔ),放大差異表達(dá)cDNA(互補(bǔ)DNA),同時(shí)抑制共有的cDNA擴(kuò)增,同時(shí)根據(jù)雜交二級(jí)動(dòng)力學(xué)原理:同源雜交時(shí),單鏈cDNA在高豐度時(shí)退火速度較之低豐度的cDNA快,從而分離出豐度趨于一致的差異基因。本實(shí)驗(yàn)正是利用抑制消減雜交技術(shù)(suppression subtractive hybridization SSH),以森林革蜱半飽血雄蜱為實(shí)驗(yàn)組,饑餓雄蜱為對(duì)照組,構(gòu)建以PMD-18T為載體的cDNA消減文庫,得到森林革蜱雄蜱在半飽血狀態(tài)下的差異表達(dá)基因,轉(zhuǎn)化至DH...
【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁數(shù)】:76 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
緒論
第一篇 前言
第一章 蜱及蜱功能性基因的研究進(jìn)展
1.1 森林革蜱
1.2 蜱的捕捉
1.3 蜱的重要功能性基因的研究進(jìn)展
第二章 篩選差異表達(dá)基因方法的研究現(xiàn)狀
2.1 篩選差異表達(dá)基因在獸醫(yī)領(lǐng)域的應(yīng)用
2.2 結(jié)語
第二篇 研究內(nèi)容
第一章 森林革蜱半飽血雄蜱抑制消減 cDNA 文庫的構(gòu)建
1.1 材料
1.2 試驗(yàn)方法
1.3 結(jié)果與分析
1.4 討論
第二章 森林革蜱半飽血雄蜱抑制消減 cDNA 文庫差異基因基因的鑒定與分析
2.1 材料
2.2 試驗(yàn)方法
2.3 結(jié)果
2.4 討論
第三章 DS27、DS30 基因的克隆和功能分析
3.1 材料
3.2 試驗(yàn)方法
3.3 結(jié)果與分析
3.4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡介
致謝
本文編號(hào):3053910
【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁數(shù)】:76 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
緒論
第一篇 前言
第一章 蜱及蜱功能性基因的研究進(jìn)展
1.1 森林革蜱
1.2 蜱的捕捉
1.3 蜱的重要功能性基因的研究進(jìn)展
第二章 篩選差異表達(dá)基因方法的研究現(xiàn)狀
2.1 篩選差異表達(dá)基因在獸醫(yī)領(lǐng)域的應(yīng)用
2.2 結(jié)語
第二篇 研究內(nèi)容
第一章 森林革蜱半飽血雄蜱抑制消減 cDNA 文庫的構(gòu)建
1.1 材料
1.2 試驗(yàn)方法
1.3 結(jié)果與分析
1.4 討論
第二章 森林革蜱半飽血雄蜱抑制消減 cDNA 文庫差異基因基因的鑒定與分析
2.1 材料
2.2 試驗(yàn)方法
2.3 結(jié)果
2.4 討論
第三章 DS27、DS30 基因的克隆和功能分析
3.1 材料
3.2 試驗(yàn)方法
3.3 結(jié)果與分析
3.4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
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致謝
本文編號(hào):3053910
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