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VBNC鼠傷寒沙門菌消減cDNA文庫的構建及差異基因克隆與分析

發(fā)布時間:2021-02-23 03:46
  沙門菌是一種腸道致病菌,對多種動物和人均有感染性,大部分有較強致病性。沙門菌進入活的非可培養(yǎng)狀態(tài)即VBNC(viable but non-culturableiistate)后,細菌形態(tài)會發(fā)生明顯變化,且用普通方法培養(yǎng)細菌不能生長,但經檢測其仍具有代謝活性。沙門菌感染因其對人類及動物來說,是一種嚴重的疾病并且造成危害,一旦其進入VBNC狀態(tài)后極容易產生“漏檢”而對食品安全造成潛在危害,因而得到越來越多的重視。目前對細菌VBNC狀態(tài)發(fā)生機制的研究尚沒有定論,當其進入VBNC狀態(tài)后,面臨生存壓力時,某一(些)基因轉錄水平明顯強于正常狀態(tài),運用相應的技術可將VBNC相關的差異表達基因直接篩選出來,進而,VBNC發(fā)生機制的研究成果從客觀上得到證實。I本研究采用不同濃度冰醋酸和4℃聯(lián)合誘導條件建立VBNC狀態(tài)快速誘導方法獲得穩(wěn)定VBNC沙門菌和VBNC沙門菌突變體的模型菌株,以便短時間內獲得足量的實驗材料。本研究應用抑制性消減雜交技術(SSH),構建了VBNC沙門菌-沙門菌消減cDNA文庫,VBNC沙門菌-VBNC沙門菌突變體消減cDNA文庫,并將獲得的大量差異基因片段,與Ti載體相連接克隆到大... 

【文章來源】:吉林農業(yè)大學吉林省

【文章頁數(shù)】:64 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻綜述
    1.1 細菌 VBNC 狀態(tài)研究進展
    1.2 建立細菌突變體模型在細菌 VBNC 狀態(tài)研究中的應用意義
    1.3 構建消減 cDNA 文庫在細菌 VBNC 狀態(tài)研究中的應用
    1.4 生物信息學分析
    1.5 本研究的目的及意義
第二篇 研究內容
    第一章 VBNC 沙門菌突變體和 VBNC 沙門菌誘導條件的建立
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 結果與分析
        1.4 討論
        1.5 小結
    第二章 SV-S 菌,SV-STV 菌消減 cDNA 文庫的建立及差異基因序列分析
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 試驗結果
        2.4 討論
        2.5 小結
結論
參考文獻
作者簡介
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]細菌的活的非可培養(yǎng)狀態(tài)研究概述[J]. 翟碩莉.  生物學教學. 2013(02)
[2]分子遺傳學研究的新工具——大腸桿菌雙雜交系統(tǒng)聯(lián)合DNA定點誘變技術[J]. 路文盛,程樺.  中國臨床新醫(yī)學. 2013(01)
[3]活的非可培養(yǎng)狀態(tài)沙門菌RT-PCR檢測[J]. 李影,王偉利,孟慶峰,錢愛東.  華南農業(yè)大學學報. 2013(01)
[4]活的非可培養(yǎng)狀態(tài)病原菌感染機制的研究現(xiàn)狀及研究策略[J]. 李影,王偉利.  中國獸醫(yī)科學. 2012(11)
[5]抑制性消減雜交技術在禽類差異表達相關基因篩選中的應用進展[J]. 徐文,欒新紅,曹中贊,劉梅,高明.  生物技術進展. 2012(05)
[6]cDNA文庫構建方法的研究進展[J]. 劉太峰,孟慶峰,段小波,董浩.  中國畜牧獸醫(yī). 2012(07)
[7]抑制性消減雜交技術及其在細菌研究中的應用[J]. 夏永祥,湯巧.  臨床檢驗雜志. 2011(03)
[8]Nonculturability of the pathogenic Vibrio parahaemolyticus in live culture of Grateloupia turuturu is associated with bacterial attachment to the algal thalli[J]. LIU Feng 1,2,PANG Shaojun 1 1 Marine Biological Culture Collection Centre,Institute of Oceanology,Chinese Academy of Sciences,Qingdao 266071,China 2 Graduate University of Chinese Academy of Sciences,Beijing 100049,China.  Acta Oceanologica Sinica. 2010(06)
[9]細菌ClpX蛋白酶的結構和功能[J]. 王琳,謝建平.  微生物學報. 2010(10)
[10]非可培養(yǎng)狀態(tài)哈維氏弧菌(Vibrio harveyi)復蘇后生理特征及毒力相關基因表達[J]. 鐘琳紅,陳吉祥,姜瑩安,王蓉,賈俊濤.  海洋與湖沼. 2010(03)

博士論文
[1]水中腸道致病菌活的非可培養(yǎng)狀態(tài)及致病性的研究[D]. 孫宗科.中國疾病預防控制中心 2009

碩士論文
[1]氮離子束注入硅酸鹽細菌誘變選育研究[D]. 盧文軒.安徽農業(yè)大學 2006



本文編號:3046968

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