發(fā)布時間：2021-02-23 03:46

　　沙門菌是一種腸道致病菌，對多種動物和人均有感染性，大部分有較強(qiáng)致病性。沙門菌進(jìn)入活的非可培養(yǎng)狀態(tài)即VBNC（viable but non-culturableiistate）后，細(xì)菌形態(tài)會發(fā)生明顯變化，且用普通方法培養(yǎng)細(xì)菌不能生長，但經(jīng)檢測其仍具有代謝活性。沙門菌感染因其對人類及動物來說，是一種嚴(yán)重的疾病并且造成危害，一旦其進(jìn)入VBNC狀態(tài)后極容易產(chǎn)生“漏檢”而對食品安全造成潛在危害，因而得到越來越多的重視。目前對細(xì)菌VBNC狀態(tài)發(fā)生機(jī)制的研究尚沒有定論，當(dāng)其進(jìn)入VBNC狀態(tài)后，面臨生存壓力時，某一（些）基因轉(zhuǎn)錄水平明顯強(qiáng)于正常狀態(tài)，運(yùn)用相應(yīng)的技術(shù)可將VBNC相關(guān)的差異表達(dá)基因直接篩選出來，進(jìn)而，VBNC發(fā)生機(jī)制的研究成果從客觀上得到證實(shí)。I本研究采用不同濃度冰醋酸和4℃聯(lián)合誘導(dǎo)條件建立VBNC狀態(tài)快速誘導(dǎo)方法獲得穩(wěn)定VBNC沙門菌和VBNC沙門菌突變體的模型菌株，以便短時間內(nèi)獲得足量的實(shí)驗(yàn)材料。本研究應(yīng)用抑制性消減雜交技術(shù)（SSH），構(gòu)建了VBNC沙門菌-沙門菌消減cDNA文庫，VBNC沙門菌-VBNC沙門菌突變體消減cDNA文庫，并將獲得的大量差異基因片段，與Ti載體相連接克隆到大... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    1.1 細(xì)菌 VBNC 狀態(tài)研究進(jìn)展
    1.2 建立細(xì)菌突變體模型在細(xì)菌 VBNC 狀態(tài)研究中的應(yīng)用意義
    1.3 構(gòu)建消減 cDNA 文庫在細(xì)菌 VBNC 狀態(tài)研究中的應(yīng)用
    1.4 生物信息學(xué)分析
    1.5 本研究的目的及意義
第二篇 研究內(nèi)容
    第一章 VBNC 沙門菌突變體和 VBNC 沙門菌誘導(dǎo)條件的建立
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 結(jié)果與分析
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第二章 SV-S 菌，SV-STV 菌消減 cDNA 文庫的建立及差異基因序列分析
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 試驗(yàn)結(jié)果
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]細(xì)菌的活的非可培養(yǎng)狀態(tài)研究概述[J]. 翟碩莉.  生物學(xué)教學(xué). 2013(02)
[2]分子遺傳學(xué)研究的新工具——大腸桿菌雙雜交系統(tǒng)聯(lián)合DNA定點(diǎn)誘變技術(shù)[J]. 路文盛,程樺.  中國臨床新醫(yī)學(xué). 2013(01)
[3]活的非可培養(yǎng)狀態(tài)沙門菌RT-PCR檢測[J]. 李影,王偉利,孟慶峰,錢愛東.  華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2013(01)
[4]活的非可培養(yǎng)狀態(tài)病原菌感染機(jī)制的研究現(xiàn)狀及研究策略[J]. 李影,王偉利.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2012(11)
[5]抑制性消減雜交技術(shù)在禽類差異表達(dá)相關(guān)基因篩選中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 徐文,欒新紅,曹中贊,劉梅,高明.  生物技術(shù)進(jìn)展. 2012(05)
[6]cDNA文庫構(gòu)建方法的研究進(jìn)展[J]. 劉太峰,孟慶峰,段小波,董浩.  中國畜牧獸醫(yī). 2012(07)
[7]抑制性消減雜交技術(shù)及其在細(xì)菌研究中的應(yīng)用[J]. 夏永祥,湯巧.  臨床檢驗(yàn)雜志. 2011(03)
[8]Nonculturability of the pathogenic Vibrio parahaemolyticus in live culture of Grateloupia turuturu is associated with bacterial attachment to the algal thalli[J]. LIU Feng 1,2,PANG Shaojun 1 1 Marine Biological Culture Collection Centre,Institute of Oceanology,Chinese Academy of Sciences,Qingdao 266071,China 2 Graduate University of Chinese Academy of Sciences,Beijing 100049,China.  Acta Oceanologica Sinica. 2010(06)
[9]細(xì)菌ClpX蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能[J]. 王琳,謝建平.  微生物學(xué)報(bào). 2010(10)
[10]非可培養(yǎng)狀態(tài)哈維氏弧菌（Vibrio harveyi）復(fù)蘇后生理特征及毒力相關(guān)基因表達(dá)[J]. 鐘琳紅,陳吉祥,姜瑩安,王蓉,賈俊濤.  海洋與湖沼. 2010(03)

博士論文
[1]水中腸道致病菌活的非可培養(yǎng)狀態(tài)及致病性的研究[D]. 孫宗科.中國疾病預(yù)防控制中心 2009

碩士論文
[1]氮離子束注入硅酸鹽細(xì)菌誘變選育研究[D]. 盧文軒.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號：3046968