本文分別采用彗星實驗法及TUNEL法確定荷斯坦奶牛性控凍精與常規(guī)凍精的DNA損傷程度，并對性控后代的健康狀況進(jìn)行綜合評價，初步分析，經(jīng)分選的精子是否能夠正常發(fā)育并繁殖后代。1.分別將奶牛的性控凍精和常規(guī)凍精凝膠混合液在裂解液中作用后，使用普通載玻片雙層鋪膠，15V，150mA，4℃電泳45min，吖啶橙染色后在熒光顯微鏡下檢測、拍照，CASP軟件分析后用SPSS11.5統(tǒng)計分析。結(jié)果：建立了奶牛精子DNA損傷的5級彗星圖譜；性控凍精的DNA損傷系數(shù)為116，顯著高于常規(guī)凍精的28（P<0.01）；彗星率為63.06%，顯著高于常規(guī)凍精的31.13%（P<0.01）。2.采用末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP末端標(biāo)記法（TUNEL）分別對性控凍精和常規(guī)凍精進(jìn)行檢測。結(jié)果：TUNEL法檢測性控凍精DNA的損傷率為（63.32±0.56）%，顯著高于常規(guī)凍精的（31.67±1.03）%（P<0.01）。3.對800頭健康青年荷斯坦奶牛分兩組進(jìn)行人工授精，400頭輸性控凍精，剩余400頭輸常規(guī)凍精作為對照。結(jié)果顯示：性控組受胎率為67.3%，產(chǎn)活率為84.2%，妊娠天數(shù)為275.8±4... 

【文章來源】：塔里木大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：39 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
第1章 文獻(xiàn)綜述
    前言
    1.1 SCGE 法檢測 DNA 損傷的研究進(jìn)展
        1.1.1 SCGE 法檢測機(jī)理的研究
        1.1.2 SCGE 檢測技術(shù)的改進(jìn)
        1.1.3 SCGE 的應(yīng)用
        1.1.4 存在的問題及展望
    1.2 TUNEL 的研究進(jìn)展
        1.2.1 TUNEL 法檢細(xì)胞凋亡的原理
        1.2.2 TUNEL 的應(yīng)用
        1.2.3 TUNEL 存在的問題及展望
    1.3 性控凍精后代的研究現(xiàn)狀
        1.3.1 性控技術(shù)
        1.3.2 性控凍精應(yīng)用效果研究現(xiàn)狀
        1.3.3 存在的問題及展望
    1.4 研究目的及意義
        1.4.1 建立 SCGE 檢測奶牛精子 DNA 損傷方法
        1.4.2 建立 TUNEL 檢測奶牛精子 DNA 損傷方法
        1.4.3 對性控后代的評價
第2章 奶牛性控與常規(guī)凍精 DNA 損傷的彗星檢測
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 主要試劑與儀器
        2.1.3 方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 奶牛精子 DNA 損傷各級彗星圖
        2.2.2 奶牛性控與常規(guī)凍精 DNA 完整性
    2.3 討論
第3章 TUNEL 法檢測奶牛性控凍精 DNA 損傷
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 試劑
        3.1.3 方法
    3.2 結(jié)果
    3.3 討論
第4章 荷斯坦奶牛性控凍精應(yīng)用效果的研究
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實驗材料
        4.1.2 實驗方法
        4.1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析
    4.2 結(jié)果
    4.3 討論及展望
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]小葉滿江紅共生藍(lán)細(xì)菌的細(xì)胞程序性死亡研究[D]. 高媛.福建農(nóng)林大學(xué) 2009



本文編號：3045421