隨著抗生素耐藥性問題的日趨嚴(yán)峻,研究和篩選具有新型作用機(jī)理的抗菌藥物已成為當(dāng)前醫(yī)藥領(lǐng)域里亟待解決的問題。而抗菌肽具有獨(dú)特的,不同于抗生素的抗菌機(jī)制,僅作用于原核細(xì)胞和發(fā)生病變的真核細(xì)胞,對(duì)正常的真核細(xì)胞幾乎沒有影響,且不易產(chǎn)生耐藥性。家蠅長(zhǎng)期生長(zhǎng)于雜菌橫生的惡劣環(huán)境,卻具備極強(qiáng)的生存能力,這說明其體內(nèi)的自身免疫防御機(jī)制發(fā)揮著作用,自身產(chǎn)生抗菌活性物質(zhì)的結(jié)果。因此,越來越多的人將目光投向家蠅抗菌肽的研究,并期望成為新一代有效抗癌、抗病毒、抗細(xì)菌藥物。本研究以3日齡家蠅幼蟲為材料,將全部家蠅幼蟲隨機(jī)分為兩組,其中一組以致病性較強(qiáng)的牛源多殺性巴氏桿菌為誘導(dǎo)菌對(duì)蟲體進(jìn)行針刺誘導(dǎo),作為實(shí)驗(yàn)組（Tester）;另一組以同樣的方法對(duì)蟲體進(jìn)行無菌針刺,作為對(duì)照組（Driver）。相同條件培養(yǎng)24h后,分別提取活體RNA并分離純化mRNA,逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA。運(yùn)用抑制性消減雜交技術(shù)成功構(gòu)建了牛多殺性巴氏桿菌誘導(dǎo)家蠅幼蟲的正向、反向cDNA文庫(kù),以PCR法和反Northern點(diǎn)雜交法進(jìn)行兩次篩選成功獲取差異表達(dá)基因,最后利用RACE技術(shù)成功獲得部分差異表達(dá)基因的全長(zhǎng)序列,并進(jìn)行核酸、氨基酸等功能的分析預(yù)測(cè)... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
緒論
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 昆蟲抗菌肽的研究進(jìn)展
        1.1 昆蟲抗菌肽的分類及結(jié)構(gòu)
        1.2 昆蟲抗菌肽的抗菌機(jī)制
        1.3 昆蟲抗菌肽的應(yīng)用
        1.4 昆蟲抗菌肽研究中存在的問題
        1.5 家蠅抗菌肽的國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀
第二篇 研究?jī)?nèi)容
    第一章 牛多殺性巴氏桿菌誘導(dǎo)家蠅幼蟲抑制性消減文庫(kù)的構(gòu)建及篩選鑒定
        1.1 材料與方法
        1.2 結(jié)果
        1.3 討論
        1.4 小結(jié)
    第二章 牛多殺性巴氏桿菌誘導(dǎo)家蠅幼蟲部分差異表達(dá)基因的克隆及序列分析
        2.1 材料與方法
        2.2 結(jié)果
        2.3 討論
        2.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]昆蟲抗菌肽的抗菌效應(yīng)及在畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用前景[J]. 駱雪,張春勇,郭榮富.  家畜生態(tài)學(xué)報(bào). 2012(05)
[2]生物抗菌肽的作用機(jī)制與研究進(jìn)展[J]. 勒步尚,崔永康,施進(jìn)文.  養(yǎng)殖技術(shù)顧問. 2011(11)
[3]家蠅抗菌肽抑菌活性及其穩(wěn)定性研究[J]. 張悅,蔣林,王德友,周立武,常志英.  日用化學(xué)品科學(xué). 2011(09)
[4]抗菌肽的研究進(jìn)展及其在畜牧業(yè)上的運(yùn)用[J]. 陳星星,陳宏惠,鄭新添.  福建畜牧獸醫(yī). 2011(01)
[5]昆蟲抗菌肽結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和基因調(diào)控[J]. 王義鵬,賴仞.  動(dòng)物學(xué)研究. 2010(01)
[6]全長(zhǎng)家蠅抗菌肽基因diptericin的克隆及生物信息學(xué)分析[J]. 楊小蓉,金小寶,曾愛華,朱家勇.  中國(guó)媒介生物學(xué)及控制雜志. 2009(05)
[7]抗菌肽在食品防腐劑中的研究應(yīng)用[J]. 趙紅艷,慕玉,趙寶華.  衛(wèi)生研究. 2009(04)
[8]Molecular characterization and expression analysis of a chicken-type lysozyme gene from housefly （Musca domestica）[J]. Qian Ren, Xiaofan Zhao, Jinxing Wang School of Life Sciences, Shandong University, Jinan 250100, China.  遺傳學(xué)報(bào). 2009(01)
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[10]家蠅抗菌肽的分離純化及生物學(xué)活性[J]. 屈軍梅,黃庭汝,屈孝初,李文平,陳平潔.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2007(03)

博士論文
[1]家蠅抗菌肽的分離及對(duì)細(xì)菌壁膜和DNA的作用[D]. 唐亞麗.江南大學(xué) 2009

碩士論文
[1]大孔吸附樹脂吸附分離家蠅抗菌肽的研究[D]. 過振宇.江南大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3045356