精液超低溫冷凍保存技術(shù)是利用液氮作為冷凍源,經(jīng)特殊處理后保存在超低溫環(huán)境下,從而達到長期保存的目的。綿羊精子和其他物種相比,存在著生理生化方面的特性,對低溫的抵抗力較其他動物低,因此綿羊精液冷凍后精子活率、頂體完整率等精子質(zhì)量評價指標較低,冷凍效果一直不理想,難以在綿羊的人工授精中得以推廣應用。為了提高綿羊冷凍精液品質(zhì),本實驗以精液解凍后精子活率、頂體完整率、質(zhì)膜完整率和谷草轉(zhuǎn)氨酶及乳酸脫氫酶活性等為檢測指標,對綿羊精液稀釋液配方、細管凍精制作程序和離心除精漿技術(shù)進行了優(yōu)化研究,實驗結(jié)果如下：（1）在6種精液冷凍稀釋液配方中,以含有D-果糖、檸檬酸和Tris的F配方冷凍效果最好,解凍后精子活率達到了0.41。（2）細管凍精制作過程中的精液最佳平衡時間為：2.5h,隨著平衡時間的延長而解凍后精子品質(zhì)開始降低；冷凍效果最好的是在溫度為40℃,解凍時間為10s的條件下的解凍程序,解凍后精子活率極顯著（P<0.01）高于解凍條件為70℃,6s下的解凍程序。（3）在精液冷凍的關(guān)鍵環(huán)節(jié)-精液冷凍降溫速率中,以冷凍降溫程序b（4℃～-15℃區(qū)間內(nèi)降溫速率；5℃/min,-15℃～-90℃區(qū)間內(nèi)... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
插圖和附表清單
縮略語表
1 引言
    1.1 精液冷凍保存技術(shù)的研究進展
        1.1.1 精液冷凍保存研究歷史
        1.1.2 精液冷凍保存的意義
        1.1.3 家畜精液冷凍技術(shù)研究現(xiàn)狀
    1.2 綿羊精液冷凍保存技術(shù)的研究進展
        1.2.1 綿羊精子形態(tài)與結(jié)構(gòu)
        1.2.2 綿羊精液冷凍保存技術(shù)的研究現(xiàn)狀
        1.2.3 綿羊精液冷凍保存研究的主要問題
        1.2.4 綿羊精液冷凍保存研究的展望
    1.3 精液冷凍保存的機理
        1.3.1 玻璃態(tài)學說
        1.3.2 微晶學說
    1.4 精子冷凍過程受損機制
        1.4.1 溶液性損傷
        1.4.2 冰晶的機械性損傷
        1.4.3 氧化性性損傷
    1.5 精液冷凍保存的影響因素
        1.5.1 稀釋液
        1.5.2 冷凍保護劑
        1.5.3 溫度變化
        1.5.4 冷凍方法
        1.5.5 解凍程序
        1.5.6 離心除精漿
    1.6 綿羊精液品質(zhì)評定方法
        1.6.1 綿羊精液品質(zhì)評定的常規(guī)指標
        1.6.2 精液品質(zhì)評定的新方法
    1.7 技術(shù)路線
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗地點
        2.1.2 實驗動物
        2.1.3 實驗藥品
        2.1.4 實驗器材
    2.2 實驗方法
        2.2.1 精液稀釋液的配制
        2.2.2 精液的采集及品質(zhì)檢測
        2.2.3 精液的稀釋及分裝
        2.2.4 精液的平衡
        2.2.5 精液的冷凍
        2.2.6 精液解凍后的品質(zhì)檢測
3 結(jié)果與分析
    3.1 不同稀釋液對解凍后精子品質(zhì)的影響
    3.2 不同稀釋方法對解凍后精子品質(zhì)的影響
    3.3 不同平衡時間對解凍后精子品質(zhì)的影響
    3.4 不同冷凍降溫程序?qū)鈨龊缶悠焚|(zhì)的影響
    3.5 不同冷凍方法對解凍后精子品質(zhì)的影響
    3.6 不同解凍程序?qū)鈨龊缶悠焚|(zhì)的影響
    3.7 離心除精漿對解凍后精子品質(zhì)的影響
4 討論
    4.1 不同稀釋液對解凍后精子品質(zhì)的影響
    4.2 不同稀釋方法對解凍后精子品質(zhì)的影響
    4.3 不同平衡時間對解凍后精子品質(zhì)的影響
    4.4 不同解凍降溫程序?qū)鈨龊缶悠焚|(zhì)的影響
    4.5 不同冷凍方法對解凍后精子品質(zhì)的影響
    4.6 不同解凍程序?qū)鈨龊缶悠焚|(zhì)的影響
    4.7 離心除精漿對解凍后精子品質(zhì)的影響
5 結(jié)論
致謝
參考文獻
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]阿爾巴斯白絨山羊精液冷凍方法研究[D]. 胡潤環(huán).內(nèi)蒙古大學 2011
[3]綿羊冷凍精液人工授精及影響受胎率相關(guān)因素的研究[D]. 劉桂娟.東北農(nóng)業(yè)大學 2009
[4]豬精液5mL大管冷凍保存方法的建立及優(yōu)化[D]. 殷方芝.南京農(nóng)業(yè)大學 2008
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[7]綿羊冷凍精液稀釋液及解凍液的研究[D]. 哈福.甘肅農(nóng)業(yè)大學 2000



本文編號：3044969