世界各國養(yǎng)禽業(yè)都存在MD，MD首先由匈牙利馬立克（Marek）氏于1907年報導(dǎo)。MD是一個多因素影響的疾病，即是宿主、病原和環(huán)境管理因素等復(fù)合作用的結(jié)果。MDV不能垂直傳播（Witter et al.,1972），但是，在雞羽毛囊角質(zhì)層的上皮細(xì)胞、皮屑、雞舍塵埃、糞便及唾液均可作為傳染的來源（Osterrieder et al.,2006; Butter et al.,2007），因此，深入認(rèn)識MD的水平傳染途徑對于該病防控有積極意義。本研究為深入探討雞馬立克氏病病毒（Marek’s disease virus,MDV）的氣源性水平傳染機制,開展了該病毒氣溶膠的發(fā)生、傳播與感染過程監(jiān)測,建立MDV氣溶膠的傳染模式。把兩個飼養(yǎng)著SPF雞的正負(fù)壓隔離器用一根密閉的管道連接。為了客觀的評估，進行了兩輪實驗為Trial-1（T1）和Trial-2（T2）。采用AGI-30采樣器收集空氣樣品，熒光定量PCR（Real-time quantitative PCR, QRT-PCR）檢測空氣樣品和羽毛囊樣品中病毒DNA；同時用間接免疫熒光實驗（Indirect immunofluorescence... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
課題資助
略詞說明
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 馬立克氏病病原
        1.1.1 馬立克氏病病原結(jié)構(gòu)
        1.1.2 馬立克氏病病毒的流行病學(xué)
        1.1.3 馬立克氏病的臨診癥狀
        1.1.4 馬立克氏病的發(fā)病機理和病理變化
        1.1.5 馬立克氏病的診斷
        1.1.6 防制
        1.1.7 免疫失敗原因及防止方法
    1.2 病毒氣溶膠
        1.2.1 氣溶膠的概念
        1.2.2 病毒氣溶膠的特性
        1.2.3 病毒氣溶膠的產(chǎn)生和傳播
        1.2.4 病毒氣溶膠的危害
        1.2.5 氣溶膠采樣原理和儀器
        1.2.6 病毒氣溶膠的采集和檢測
        1.2.7 微生物氣溶膠國內(nèi)研究現(xiàn)狀
        1.2.8 微生物氣溶膠國外研究現(xiàn)狀
    1.3 實時熒光定量 PCR
    1.4 本研究的意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 SPF 雞胚和 SPF 雞
        2.1.2 病毒的制備
        2.1.3 引物和探針
        2.1.4 主要試劑及配制
    2.2 方法
        2.2.1 引物探針的合成
        2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)品的制備
            2.2.2.1 提取病毒 DNA
            2.2.2.2 PP38 基因片段的擴增
            2.2.2.3 陽性 PCR 產(chǎn)物的純化回收
            2.2.2.4 PCR 產(chǎn)物與載體連接
            2.2.2.5 轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
            2.2.2.6 陽性質(zhì)粒的提取
            2.2.2.7 菌種保存
            2.2.2.8 標(biāo)準(zhǔn)品的獲取與定量
        2.2.3 試驗設(shè)計
        2.2.4 雞胚成纖維細(xì)胞的制備和培養(yǎng)
        2.2.5 病毒的復(fù)蘇、擴增和凍存
        2.2.6 接種病毒
        2.2.7 樣品的采集程序
        2.2.8 全玻璃沖擊式采樣
        2.2.9 空氣和羽毛囊樣品中病毒 DNA 的提取
        2.2.10 實時熒光定量 PCR 檢測空氣及羽毛囊病毒 DNA 含量
        2.2.11 間接免疫熒光試驗
        2.2.12 臨床觀察和剖檢
        2.2.13 組織切片的制備
3 結(jié)果
    3.1 標(biāo)準(zhǔn)品制備結(jié)果
    3.2 MDV 氣溶膠發(fā)生時間和含量
    3.3 攻毒雞和氣溶膠被動感染組雞病毒血癥的檢測
    3.4 G1、G2 組羽毛囊樣品病毒 DNA 含量
    3.5 臨床觀察、剖檢及切片
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文


【參考文獻】：
期刊論文
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[3]養(yǎng)殖環(huán)境真菌氣溶膠的研究[J]. 王雅玲,柴同杰,呂國忠,楊奎振.  家畜生態(tài)學(xué)報. 2005(06)
[4]兔舍內(nèi)氣載需氧菌和氣載葡萄球菌的檢測[J]. 段會勇,王磊,柴同杰.  家畜生態(tài)學(xué)報. 2005(04)
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[6]雞舍環(huán)境耐藥細(xì)菌氣溶膠及其向環(huán)境傳播的研究[J]. 柴同杰,趙云玲,劉文波,劉輝.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2003(03)
[7]漢坦病毒空氣傳播感染的實驗室和野外采樣研究[J]. 李勁松,鹿建春,車鳳翔,孟令英,劉敏霞.  中國病毒學(xué). 2001(02)
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本文編號：3044866