根據(jù)H9N2亞型禽流感病毒（AIV）的HA和NA基因的保守序列,設(shè)計2套特異性LAMP引物和2條探針引物,同時在2條探針的5′端分別標(biāo)記不同的熒光基團,在3′端都標(biāo)記猝滅基團,然后使用多色熒光成像儀觀察反應(yīng)后是否有熒光產(chǎn)生來判斷反應(yīng)管里是否有陽性擴增,通過熒光顏色的不同來分析陽性擴增產(chǎn)物的類型。特異性試驗結(jié)果顯示該方法能特異性擴增H9亞型和N2亞型AIV,對其他15個HA亞型和其余8個NA亞型AIV以及禽類常見病原體均無擴增;干擾性試驗結(jié)果顯示H9和N2兩種亞型AIV可以在同一反應(yīng)管中獨立完成擴增,二者互不干擾;敏感性試驗顯示其最低檢測限度為100拷貝/μL。試驗結(jié)果表明本試驗建立的二重?zé)晒釸T-LAMP檢測方法具備反應(yīng)快速、靈敏、特異性強同時可以用肉眼直接觀察辨別擴增產(chǎn)物的優(yōu)點,對H9N2亞型AIV臨床快速檢測具有較好的應(yīng)用前景。 

【文章來源】：中國獸醫(yī)學(xué)報. 2020,40(10)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

特異性試驗在多色熒光成像系統(tǒng)雙通道下的觀察結(jié)果

干擾性試驗在多色熒光成像系統(tǒng)下的觀察結(jié)果

RT-LAMP敏感性試驗實時濁度儀檢測結(jié)果

【參考文獻】：
期刊論文
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