P-gp是由Abcb1基因編碼的一種相對分子質(zhì)量為170 kda的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,屬于能量依賴的藥物外排泵。近年來的研究發(fā)現(xiàn),P-gp除了在腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)介導(dǎo)其對化療藥物的耐藥外,人和動(dòng)物的正常組織中也有分布,如膽小管、腸上皮、腎小管以及血腦屏障等,可限制藥物及其它外源性物質(zhì)在生物體內(nèi)的吸收、分布和排泄,是影響口服藥物生物利用度的一個(gè)重要因素。P-gp的表達(dá)可以受到多種因素影響,包括化學(xué)物質(zhì)、年齡、性別、生理狀態(tài)、疾病以及激素等。目前關(guān)于大腸桿菌感染對肉雞體內(nèi)P-gp表達(dá)和功能的影響以及對口服底物藥物藥動(dòng)學(xué)過程的研究仍較少,故本試驗(yàn)研究了大腸桿菌感染對肉雞P-gp mRNA表達(dá)的影響及其對恩諾沙星在肉雞體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)的影響,并初步探討了大腸桿菌對P-gp mRNA表達(dá)影響的調(diào)控機(jī)制。首先,采用P-gp誘導(dǎo)劑利福平以及抑制劑維拉帕米研究其對恩諾沙星在肉雞體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)的影響,證實(shí)恩諾沙星為P-gp的底物。本研究選取30只健康8周齡肉雞,隨機(jī)分為6組（n=5）,分別為單劑量口服恩諾沙星（10 mg/kg.bw）組、單劑量口服維拉帕米（15 mg/kg.bw）后口服恩諾沙星（10mg/kg.bw）組... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
符號及縮略語
引言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 P-gp的結(jié)構(gòu)和分布
    2 P-gp與藥物的吸收、分布、代謝和排泄
    3 影響P-gp表達(dá)和功能的因素
        3.1 疾病對P-gp表達(dá)和功能的影響
        3.2 年齡對P-gp表達(dá)和功能的影響
        3.3 激素對P-gp表達(dá)和功能的影響
        3.4 化學(xué)物對P-gp表達(dá)和功能的影響
            3.4.1 P-gp的誘導(dǎo)劑
            3.4.2 P-gp的抑制劑
    4 P-gp的表達(dá)調(diào)控
        4.1 核受體對P-gp編碼基因Abcbl的轉(zhuǎn)錄調(diào)控
            4.1.1 PXR/SXR對Abcb1基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控
            4.1.2 CAR對P-gp表達(dá)和功能的影響
        4.2 細(xì)胞因子對P-gp表達(dá)和功能的影響
            4.2.1 IL-6對P-gp表達(dá)和功能的影響
            4.2.2 IL-1p對P-gp表達(dá)和功能的影響
            4.2.3 IL-2和IL-4對P-gp表達(dá)和功能的影響
            4.2.4 TNFα對P-gp表達(dá)和功能的影響
            4.2.5 IFN-γ對P-gp表達(dá)和功能的影響
            4.2.6 TGF-β1對P-gp表達(dá)和功能的影響
            4.2.7 細(xì)胞因子對P-gp表達(dá)和功能的調(diào)控通路
        4.3 NOS對P-gp表達(dá)和功能的影響
        4.4 NF-κB對P-gp表達(dá)和功能的影響
        4.5 其它因子對P-gp表達(dá)和功能的影響
    5 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第二章 P-糖蛋白對恩諾沙星在肉雞體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)的影響
    1 材料和方法
        1.1 材料
            1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            1.1.2 藥品與試劑
            1.1.3 試驗(yàn)儀器
        1.2 方法
            1.2.1 血漿中恩諾沙星檢測的色譜條件
            1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
            1.2.3 主要工作液配制
            1.2.4 給藥方案與血樣的采集
            1.2.5 樣品處理
        1.3 數(shù)據(jù)的處理
    2 結(jié)果
        2.1 色譜行為
        2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        2.3 藥時(shí)曲線與藥動(dòng)學(xué)參數(shù)
            2.3.1 對照組和維拉帕米處理組雞體內(nèi)恩諾沙星的藥時(shí)曲線
            2.3.2 對照組和維拉帕米處理組雞體內(nèi)恩諾沙星的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)
            2.3.3 對照組和利福平處理組雞體內(nèi)恩諾沙星的藥時(shí)曲線
            2.3.4 對照組和利福平處理組雞體內(nèi)恩諾沙星的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)
    3 討論
    參考文獻(xiàn)
第三章 大腸桿菌感染對肉雞組織中P-gp的表達(dá)及對口服恩諾沙星的影響
    1 材料與方法
        1.1 試劑
        1.2 試驗(yàn)儀器
        1.3 菌株
        1.4 試驗(yàn)動(dòng)物及處理
        1.5 方法
            1.5.1 感染模型的建立
            1.5.2 real time RT-PCR方法測定肉雞組織中Abcb1 mRNA的表達(dá)量
                1.5.2.1 樣品采集及處理
            1.5.3 SABC免疫組織化學(xué)方法檢測P-gp的蛋白表達(dá)
            1.5.4 HPLC測定口服恩諾沙星的血藥濃度
    2 結(jié)果
        2.1 肉雞大腸桿菌感染模型的建立
        2.2 健康和大腸桿菌感染肉雞組織中Abcb1 mRNA的表達(dá)水平變化
            2.2.1 RNA完整性鑒定
            2.2.2 RNA及cDNA檢測
        2.3 P-gp蛋白在健康和大腸桿菌感染肉雞組織中的表達(dá)差異
            2.3.1 P-gp在健康和感染肉雞肝臟中的定位
            2.3.2 P-gp在健康和感染肉雞腎臟中的定位
            2.3.3 P-gp在健康和感染肉雞空腸中的定位
            2.3.4 P-gp在健康和感染肉雞回腸中的定位
            2.3.5 P-gp在健康和大腸桿菌感染肉雞組織中的半定量分析
        2.4 大腸桿菌感染對口服恩諾沙星藥代動(dòng)力學(xué)的影響
            2.4.1 恩諾沙星在健康和大腸桿菌感染肉雞的藥時(shí)曲線
            2.4.2 恩諾沙星在健康和大腸桿菌感染肉雞的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)
            2.4.3 感染肉雞恩諾沙星與維拉帕米聯(lián)合用藥的藥時(shí)曲線
            2.4.4 P-gp抑制劑維拉帕米對感染肉雞體內(nèi)恩諾沙星藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的影響
    3 討論
    參考文獻(xiàn)
第四章 大腸桿菌對肉雞體內(nèi)P-gp表達(dá)的調(diào)控機(jī)制初探
    1 材料與方法
        1.1 試劑
        1.2 試驗(yàn)儀器
        1.3 菌株
        1.4 試驗(yàn)動(dòng)物及處理
        1.5 方法
    2 結(jié)果
α、CXR和NF-κB1基因的擴(kuò)增曲線和熔解曲線">        2.1 IL-6、IL-1β、TNF_α、CXR和NF-κB1基因的擴(kuò)增曲線和熔解曲線
        2.2 主要促炎因子在健康和大腸桿菌感染肉雞不同組織中的表達(dá)差異
            2.2.1 IL-6 mRNA在健康和感染肉雞不同組織中的相對表達(dá)量
            2.2.2 IL-1β mRNA在健康和感染肉雞不同組織中的相對表達(dá)量
            2.2.3 TNFα mRNA在健康和感染肉雞不同組織中的相對表達(dá)量
        2.3 核受體CXR在健康和感染肉雞不同組織中的表達(dá)差異
        2.4 核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB1在健康和感染肉雞不同組織中的表達(dá)差異
    3 討論
    參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]異源物代謝核受體PXR與腫瘤多藥耐藥相關(guān)性的研究進(jìn)展[J]. 倪彥彬,章國良.  生理科學(xué)進(jìn)展. 2011(01)



本文編號：3038480