隨著飼用抗生素的濫用所導(dǎo)致的耐藥性、藥物殘留、環(huán)境等問題的出現(xiàn)，抗生素替代品的研究成為熱點(diǎn)。微生態(tài)制劑是通過改善宿主腸道內(nèi)的微生態(tài)平衡從而發(fā)揮益生作用的生物制品，芽孢桿菌是微生態(tài)制劑的一種，其能形成內(nèi)生孢子，具有強(qiáng)耐受性等優(yōu)點(diǎn)。本研究從健康仔豬的糞便中分離篩選出對腸道常見病原菌具有拮抗作用的豬源益生芽孢桿菌、然后對其益生特性和安全性進(jìn)行研究，得到一株安全無毒且具有良好益生性能的蠟樣芽孢桿菌BC158，并通過單因素試驗和響應(yīng)面設(shè)計優(yōu)化其發(fā)酵工藝，從而獲得高密度培養(yǎng)工藝，具體研究結(jié)果如下：1、從健康仔豬（15-40日齡）糞便中分離到46株芽孢桿菌，通過對腸道常見病原菌拮抗性研究，篩選到3株能夠拮抗病原菌（大腸桿菌O8、腸炎沙門氏菌和金黃色葡萄球菌）的芽孢桿菌，然后通過生理生化實(shí)驗和16SrDNA序列分析，結(jié)果表明，3株菌都是蠟樣芽孢桿菌，分別命名為芽孢桿菌BC158、BC234、BC236。2、對篩選到的三株蠟樣芽孢桿菌BC158、BC234、BC236的益生性和安全性進(jìn)行了研究，結(jié)果表明， BC158具有最好的潛在益生性，如粘附和抑菌性，且安全無毒，使其在動物飼料工業(yè)中具有良好的應(yīng)用前景... 

【文章來源】：河南科技大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 飼用抗生素的使用及存在的問題
    1.2 抗生素飼料添加劑的替代品
        1.2.1 益生菌制劑
        1.2.2 酶制劑
        1.2.3 酸化劑
        1.2.4 植物提取物
    1.3 飼用益生菌制劑的研究進(jìn)展
        1.3.1 益生菌制劑的分類
        1.3.2 益生菌制劑需要具備的條件
        1.3.3 益生菌制劑在生產(chǎn)和使用中面臨的問題
    1.4 飼用益生芽孢桿菌的研究
        1.4.1 芽孢桿菌的簡述
        1.4.2 益生芽孢桿菌的種類
        1.4.3 益生芽孢桿菌的作用機(jī)理
        1.4.4 益生芽孢桿菌的應(yīng)用
        1.4.5 影響飼用益生芽孢桿菌飼喂效果的因子
    1.5 蠟樣芽孢桿菌（Bacillus cereus）概況
    1.6 本課題的主要研究意義、研究內(nèi)容
        1.6.1 本課題的研究意義
        1.6.2 主要研究內(nèi)容
第2章 益生芽孢桿菌的分離篩選與鑒定
    2.1 材料
        2.1.1 樣品
        2.1.2 菌種
        2.1.3 試劑
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 培養(yǎng)基
    2.2 試驗方法
        2.2.1 芽孢桿菌的分離篩選
        2.2.2 分離菌株的革蘭氏染色和芽孢染色
        2.2.3 抑菌試驗
        2.2.4 生理生化實(shí)驗
        2.2.5 16SrDNA 分子生物學(xué)鑒定
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 芽孢桿菌的分離篩選
        2.3.2 抑菌性
        2.3.3 生理生化鑒定
        2.3.4 16SrDNA 的鑒定分析
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
第3章 芽孢桿菌的益生性和安全性研究
    3.1 材料和試劑
        3.1.1 菌種
        3.1.2 實(shí)驗試劑盒儀器
        3.1.3 培養(yǎng)基
        3.1.4 試驗動物
    3.2 試驗方法
        3.2.1 粘附性
        3.2.2 耐酸、耐膽鹽試驗
        3.2.3 水解酶試驗
        3.2.4 耐高溫試驗
        3.2.5 抗生素抗性試驗
        3.2.6 蠟樣芽孢桿菌腸毒素檢測
        3.2.7 小鼠飼喂試驗
        3.2.8 平板計數(shù)
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 粘附性
        3.3.2 酸、膽鹽耐受性
        3.3.3 水解酶特性
        3.3.4 耐高溫能力
        3.3.5 抗生素敏感性
        3.3.6 分離菌株的腸毒素檢測
        3.3.7 小鼠飼喂試驗
    3.4 討論
    3.5 本章小結(jié)
第4章 高密度培養(yǎng)工藝研究
    4.1 材料與試劑
        4.1.1 菌種
        4.1.2 儀器和試劑
        4.1.3 培養(yǎng)基
    4.2 試驗方法
        4.2.1 菌株生長特性研究
        4.2.2 發(fā)酵培養(yǎng)基單因素試驗
        4.2.3 發(fā)酵培養(yǎng)基的響應(yīng)面優(yōu)化
        4.2.4 平板計數(shù)
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 菌株生長特性
        4.3.2 發(fā)酵培養(yǎng)基單因素試驗
        4.3.3 發(fā)酵培養(yǎng)基組成的響應(yīng)面優(yōu)化
    4.4 討論
    4.5 本章小結(jié)
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄 16SrDNA 序列測定結(jié)果
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]世界益生菌安全性評價方法[J]. 劉勇,張勇,張和平.  中國食品學(xué)報. 2011(06)
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[3]過量使用抗生素對畜牧業(yè)生產(chǎn)的影響[J]. 毛雪燕.  畜牧獸醫(yī)科技信息. 2011(04)
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[6]4株乳酸菌對14種抗生素的敏感性試驗[J]. 甄麗,陳琳,彭虹旎,呂左航,王增元,孔垂彬.  中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2010(05)
[7]納豆芽孢桿菌對泌乳期奶牛產(chǎn)奶量、牛奶品質(zhì)的影響[J]. 欒廣春,王加啟,卜登攀,劉仕軍,鄧露芳,陳強(qiáng),周振峰,單安山.  東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2008(09)
[8]飼用抗生素的研究與應(yīng)用進(jìn)展[J]. 郭福有,馬杰.  飼料工業(yè). 2007(18)
[9]飼料添加山姜和蠟樣芽孢桿菌對小鼠腸道菌群的影響[J]. 張金輝,潘康成,袁朝富,王艷明.  廣東飼料. 2007(03)
[10]利用PCR技術(shù)檢測致病性臘樣芽孢桿菌的研究[J]. 王振國,劉金華,肖成蕊,蔡陽,羅雁菲,劉和平,牟峻.  生物技術(shù). 2005(05)

博士論文
[1]豬源益生芽孢桿菌的分離篩選與應(yīng)用研究[D]. 趙述淼.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009

碩士論文
[1]乳酸芽孢桿菌益生素的制備及對斷奶仔豬生產(chǎn)性能和血清學(xué)指標(biāo)的影響[D]. 韓偉.廣東海洋大學(xué) 2010
[2]益生芽孢桿菌的篩選、鑒定及發(fā)酵條件優(yōu)化的研究[D]. 曹曉敏.福建師范大學(xué) 2009
[3]仔豬腸道益生菌的分離篩選及生物學(xué)特性研究[D]. 張麗芳.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005



本文編號：3035899