新孢子蟲新疆株Nc-1體外培養(yǎng)及rELISA試劑盒的應(yīng)用研究
發(fā)布時間:2021-02-15 18:37
新孢子蟲。∟eosporosis)是由新孢子蟲寄生于犬、牛、羊等多種動物細(xì)胞內(nèi)所引起的一種原蟲病。該病造成病牛流產(chǎn)、死胎及產(chǎn)弱胎,對畜牧業(yè)生產(chǎn)造成重大的經(jīng)濟(jì)損失。目前,仍沒防治該病的有效藥物和疫苗,及時檢測、診斷,淘汰患畜是唯一的防治途徑。因此,地方蟲株的分離、體外培養(yǎng)、研發(fā)和應(yīng)用靈敏、快速的檢測試劑盒等,對該病的早期診斷、流行病學(xué)研究、治療和防控具有重大意義。(Ⅰ)本實驗以貼壁培養(yǎng)的Vero細(xì)胞為供養(yǎng)細(xì)胞接種新孢子蟲速殖子,建立新孢子蟲新疆株Nc-1的初始培養(yǎng)。借助顯微鏡每隔24h觀察新孢子蟲速殖子在Vero細(xì)胞中的寄生、增殖情況,并摸索其最佳傳代、保存、復(fù)蘇等試驗條件。結(jié)果顯示:在5%CO2,37℃條件下,在DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng),獲得生長旺盛、對數(shù)生長期的Vero細(xì)胞;在此基礎(chǔ)上成功建立了新孢子蟲新疆株Nc-1速殖子的體外培養(yǎng)。試驗表明新孢子蟲新疆株Nc-1速殖子可在Vero細(xì)胞中穩(wěn)定增值,其最佳培養(yǎng)基為RPMI-1640(含有100μg/mL雙抗和5%胎牛血清);其培養(yǎng)條件為5%CO2,37℃;蟲株凍存后最佳復(fù)蘇和保存時間為半年。本次試驗為實驗室條件下開展新孢子蟲地方蟲株的擴(kuò)繁...
【文章來源】:新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:70 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
新抱子蟲生活史模式圖
蟲體培養(yǎng)流程圖
傳代5d后的Vero細(xì)胞
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]伊犁昭蘇縣馬新孢子蟲病診斷報告[J]. 索意利·李吉,李佳,李永暢,張楊,巴音查汗. 草食家畜. 2013(06)
[2]牛新孢子蟲病最新研究進(jìn)展[J]. 張寧,趙博偉,胡曉悅,張軍,劉曉慧,王學(xué)會. 上海畜牧獸醫(yī)通訊. 2013(01)
[3]川西北牦牛新孢子蟲感染血清流行病學(xué)調(diào)查[J]. 張煥容,王言軒,周子雄,王遠(yuǎn)微. 中國動物檢疫. 2013(01)
[4]鄭州市奶牛場犬新孢子蟲血清學(xué)調(diào)查[J]. 王軍,石冬梅,陳益,皇甫和平. 中國獸醫(yī)雜志. 2012(09)
[5]牛巴貝斯蟲體外培養(yǎng)體系的建立[J]. 杜鵬飛,關(guān)貴全,劉愛紅,馬米玲,任巧云,殷宏,羅建勛. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2012(08)
[6]新孢子蟲和弓形蟲ELISA及western blot檢測方法的建立及應(yīng)用[J]. 陳亮,閆雙,劉啟生,曹雯麗,王真,巴音查汗. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2012(07)
[7]柔嫩艾美耳球蟲DF-1細(xì)胞培養(yǎng)體系的建立及應(yīng)用[J]. 姜連連,林矯矯,韓紅玉,董輝,趙其平,朱順海,馬衛(wèi)嬌,程軍,曾艷波,黃兵. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2011(06)
[8]牦牛新孢子蟲病ELISA檢測[J]. 鐵富萍,李德壽,李娟. 中國草食動物. 2011(03)
[9]巴州部分山區(qū)牦牛新孢子蟲病的rELISA檢測[J]. 哈希巴特,劉進(jìn),陳亮,岳城,巴音查汗. 新疆畜牧業(yè). 2010(12)
[10]湟中縣藏羊群中犬新孢子蟲病的調(diào)查[J]. 段國芳,汪生林,馬利青. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2010(22)
本文編號:3035350
【文章來源】:新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:70 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
新抱子蟲生活史模式圖
蟲體培養(yǎng)流程圖
傳代5d后的Vero細(xì)胞
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]伊犁昭蘇縣馬新孢子蟲病診斷報告[J]. 索意利·李吉,李佳,李永暢,張楊,巴音查汗. 草食家畜. 2013(06)
[2]牛新孢子蟲病最新研究進(jìn)展[J]. 張寧,趙博偉,胡曉悅,張軍,劉曉慧,王學(xué)會. 上海畜牧獸醫(yī)通訊. 2013(01)
[3]川西北牦牛新孢子蟲感染血清流行病學(xué)調(diào)查[J]. 張煥容,王言軒,周子雄,王遠(yuǎn)微. 中國動物檢疫. 2013(01)
[4]鄭州市奶牛場犬新孢子蟲血清學(xué)調(diào)查[J]. 王軍,石冬梅,陳益,皇甫和平. 中國獸醫(yī)雜志. 2012(09)
[5]牛巴貝斯蟲體外培養(yǎng)體系的建立[J]. 杜鵬飛,關(guān)貴全,劉愛紅,馬米玲,任巧云,殷宏,羅建勛. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2012(08)
[6]新孢子蟲和弓形蟲ELISA及western blot檢測方法的建立及應(yīng)用[J]. 陳亮,閆雙,劉啟生,曹雯麗,王真,巴音查汗. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2012(07)
[7]柔嫩艾美耳球蟲DF-1細(xì)胞培養(yǎng)體系的建立及應(yīng)用[J]. 姜連連,林矯矯,韓紅玉,董輝,趙其平,朱順海,馬衛(wèi)嬌,程軍,曾艷波,黃兵. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2011(06)
[8]牦牛新孢子蟲病ELISA檢測[J]. 鐵富萍,李德壽,李娟. 中國草食動物. 2011(03)
[9]巴州部分山區(qū)牦牛新孢子蟲病的rELISA檢測[J]. 哈希巴特,劉進(jìn),陳亮,岳城,巴音查汗. 新疆畜牧業(yè). 2010(12)
[10]湟中縣藏羊群中犬新孢子蟲病的調(diào)查[J]. 段國芳,汪生林,馬利青. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2010(22)
本文編號:3035350
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