發(fā)布時(shí)間：2021-02-12 07:47

　　旨在研究能夠快速、準(zhǔn)確、靈敏地鑒別、診斷引起仔豬先天性震顫的豬非典型瘟病毒（Atypical porcine pestivirus, APPV）、豬瘟病毒（Classical swine fever virus,CSFV）、豬圓環(huán)病毒3型（Porcine circoviruses type 3, PCV-3）及豬捷申病毒1型（Porcine teschovirus 1,PTV-1）的方法。通過對GenBank中登錄的APPV的NS3基因序列、CSFV的E2基因序列、PCV-3的ORF2基因序列和PTV-1的VP1基因序列進(jìn)行分析,設(shè)計(jì)針對4種病毒的特異性引物和TaqMan水解探針。通過對反應(yīng)條件和反應(yīng)程序進(jìn)行優(yōu)化,擬建立針對仔豬先天性震顫相關(guān)病毒的多重TaqMan熒光定量PCR檢測方法。結(jié)果顯示,研究得到的多重TaqMan熒光定量PCR檢測方法能夠特異性檢測APPV、CSFV、PCV-3和PTV-1,而與其他病原無交叉反應(yīng);該研究方法對APPV、CSFV、PCV-3和PTV-1的最低檢測量分別為1μl 9.2×10²拷貝、48拷貝、56拷貝和17拷貝。重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)... 

【文章來源】：江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2020,36(04)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 病毒與病料
    1.2 主要試劑
    1.3 引物的設(shè)計(jì)及合成
    1.4 重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的制備
    1.5 多重TaqMan熒光定量PCR檢測方法的建立
        1.5.1 反應(yīng)條件的優(yōu)化
        1.5.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
        1.5.3 特異性試驗(yàn)
        1.5.4 靈敏性試驗(yàn)
        1.5.5 重復(fù)性試驗(yàn)
    1.6 臨床樣品檢測
2 結(jié)果與分析
    2.1 多重TaqMan熒光定量PCR方法的建立
    2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
    2.3 特異性
    2.4 靈敏性
    2.5 重復(fù)性
    2.6 臨床樣品檢測
3 討 論
4 結(jié) 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]豬瘟引起仔豬先天性震顫的診斷與防制[J]. 羅建,楊小燕,李曉華,戴愛玲.  福建畜牧獸醫(yī). 2005(05)
[2]豬瘟造成的仔豬先天性震顫[J]. 陸文俊,王世昌.  養(yǎng)豬. 1998(01)
[3]仔豬先天性肌陣攣病[J]. 趙文遠(yuǎn),徐福南,羅清生.  中國畜牧獸醫(yī). 1962(08)



本文編號：3030507