為建立一種切實(shí)可行的鴨甲肝病毒抗體的檢測方法,將1株臨床分離的3型鴨甲肝病毒的VP3基因進(jìn)行原核表達(dá)的純化蛋白作為包被抗原,初步建立了檢測鴨肝炎病毒抗體的間接ELISA方法。通過條件優(yōu)化,得到VP3蛋白最佳包被濃度為0.159 5μg/mL,血清最佳稀釋倍數(shù)為1∶200。結(jié)果顯示,建立的ELISA方法具有較好的特異性、敏感性和重復(fù)性,與商品化的雙抗原夾心ELISA的符合率為92.5%,且該方法可同時(shí)檢測1型和3型鴨甲肝病毒抗體,因而可用于臨床免疫鴨甲肝病毒的種鴨血清抗體水平的檢測和卵黃抗體的效價(jià)測定。 

【文章來源】：中國獸醫(yī)雜志. 2020,56(03)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料
2 間接ELISA方法的建立
    2. 1 包被抗原和抗體最佳工作濃度確定
    2.2 酶標(biāo)二抗最佳工作濃度確定
    2.3 臨界值確定
    2.4 特異性試驗(yàn)
    2.5 敏感性試驗(yàn)
    2.6 重復(fù)性試驗(yàn)
    2.7 間接ELISA與雙抗原夾心ELISA符合率試驗(yàn)
3 結(jié)果
    3.1 VP3重組蛋白的純化
    3.2 包被抗原和抗體最佳工作濃度測定結(jié)果
    3.3 酶標(biāo)二抗最佳工作濃度測定
    3.4 臨界值測定
    3.5 特異性試驗(yàn)
    3.6 敏感性試驗(yàn)
    3.7 重復(fù)性試驗(yàn)
    3.8 間接ELISA與雙抗原夾心ELISA符合率試驗(yàn)
4 討論



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