超濾濃縮技術(shù)是去除原液雜蛋白,收集目標(biāo)蛋白的一種有效的手段。超濾濃縮是以切向流為動(dòng)力,利用分子篩原理進(jìn)行膜分離的過(guò)程^[1]。是以一定的壓力為條件,溶劑及小分子量的透過(guò)液透過(guò)對(duì)稱微孔膜,而直徑較大的大分子物質(zhì)被截流,截流部分也就是濃縮液,濃縮液返回至原料液,原料液的濃度便會(huì)升高,控制好剪切力反復(fù)進(jìn)行,實(shí)現(xiàn)小分子量分離的目的,去除雜蛋白及特異性蛋白保留目標(biāo)蛋白,達(dá)到對(duì)原料液濃縮純化的目的。 

【文章來(lái)源】：吉林畜牧獸醫(yī). 2020,41(10)

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【部分圖文】：

不同濃縮倍數(shù)純化結(jié)果

表2 溫度對(duì)雜蛋白去除率、146 S、濃縮時(shí)間測(cè)定結(jié)果 溫度/℃ 原毒樣雜蛋白含量μg/mL 濃縮樣雜蛋白含量μg/mL 雜蛋白去除率% 原毒樣146 S 濃縮樣146 S 146 S損耗率% 濃縮倍數(shù) 濃縮時(shí)間/min 壓力/bar 37 3 901 2 394 89.77 2.4 11.5 20.14 6 41 0.5 35 4 013 2 462 89.77 2.6 13 16.67 6 42 0.5 32 3 921 2 438 89.63 2.2 11.4 13.64 6 42 0.5 30 3 684 2 376 89.25 2.3 12.4 10.14 6 42 0.5 28 3 721 2 441 89.07 2.8 15.6 7.14 6 43 0.5 26 3 642 2 416 88.94 2.3 13.3 3.62 6 41 0.5 24 3 724 2 988 86.62 2.2 12.7 3.79 6 42 0.5由圖2可看出,溫度的改變,對(duì)濃縮時(shí)間無(wú)明顯影響,溫度降低對(duì)雜蛋白去除率影響不大。由于在溫度高的情況下,病毒活性高,剪切力對(duì)146 S的損害較大,因此,隨著料液溫度的降低,146 S損失逐漸降低。但是溫度過(guò)低,容易造成超濾膜表面“凝膠層”的形成,在24 ℃時(shí),雜蛋白去除率有降低趨勢(shì)。而且該情況下繼續(xù)濃縮,也極易造成膜透過(guò)量下降,對(duì)146 S損耗影響比較明顯,綜合可得出26 ℃是最適宜的濃縮溫度。

表3 壓力對(duì)雜蛋白去除率、146 S、濃縮時(shí)間測(cè)定結(jié)果 壓力/bar 原毒樣雜蛋白含量μg/mL 濃縮樣雜蛋白含量μg/mL 雜蛋白去除率% 原毒樣146 S 濃縮樣146 S 146 S損耗率% 濃縮倍數(shù) 濃縮時(shí)間/min 溫度/℃ 0.5 3 654 2 366 89.21 2.7 15.6 3.70 6 42 26 0.6 3 984 2 408 89.93 2.6 15 3.63 6 37 26 0.7 3 894 2 378 89.80 2.7 15.6 3.70 6 33 26 0.8 3 901 2 244 90.41 2.4 12.9 10.42 6 30 26 0.9 3 789 2 066 90.91 2.5 13 13.33 6 28 26由圖3可看出,壓力的改變,對(duì)雜蛋白去除率無(wú)明顯變化,隨著壓力的增加,料液切向流速增大,因而不會(huì)造成膜堵塞,雜蛋白去除率會(huì)有所增加,同時(shí),濃縮時(shí)間也會(huì)逐漸減短。但是,在超濾濃縮的過(guò)程中,料液切向流速的增加,也會(huì)加大膜表面的剪切力,使得146 S有一定的損耗[4]。結(jié)合圖中數(shù)據(jù)可以看出,在壓力為0.8 bar時(shí),146 S損耗率明顯上升,因此,為了降低146 S的損耗,最適宜的超濾濃縮壓力為0.7 bar。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]牛O型口蹄疫高倍濃縮滅活疫苗的研制[D]. 王家福.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005



本文編號(hào)：3019061