MicroRNAs（miRNAs）是一類小的內(nèi)源性非編碼序列，廣泛地存在于多種組織和器官中，通過降解mRNA或阻礙其翻譯的方式調(diào)節(jié)靶基因，從而實(shí)現(xiàn)對生命體重要的調(diào)控作用。有研究表明，miRNAs在睪丸組織中也有表達(dá)，并且對曲細(xì)精管的發(fā)育及精子成熟都有重要的調(diào)控作用。miR-375和miR-499是經(jīng)過前人高通量測序鑒定出在軍牧1號白豬1月齡睪丸組織和6月齡睪丸組織中存在差異表達(dá)的兩個miRNAs，因此本研究針對miR-375和miR-499在1日齡，1-7月齡睪丸組織中的表達(dá)水平進(jìn)行檢測，并且對它們的靶基因進(jìn)行驗(yàn)證。首先觀察了1日齡，1-7月齡的軍牧1號種公豬睪丸組織形態(tài)。結(jié)果表明，隨月齡增大，睪丸組織中曲細(xì)精管管腔逐漸增大，同一視野下，曲細(xì)精管數(shù)目逐漸減少，并且曲細(xì)精管管腔之間的結(jié)締組織也逐漸減少，管腔中的支持細(xì)胞和精母細(xì)胞逐漸向基底膜靠近。與此同時，對不同月齡睪丸組織中生物信息學(xué)預(yù)測的miR-375可能的靶基因DIAPH2, YAP1, YBX1, ITPKB和NR5A2，miR-499可能的靶基因CYLC1, DMRT1,QKI, XRN2和ZNF313進(jìn)行了實(shí)時熒光定量檢測。結(jié)... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

HE染色法對不同發(fā)育階段睪丸組織的形態(tài)學(xué)觀察Fig.1.1MorphologyoftestisatdifferentdevelopmentalstageswereobservedbyHEstaining

篇 研究內(nèi)容 第 2 章 不同發(fā)育階段豬睪丸組織中 miR-375/499 及其預(yù)測的靶基因的表達(dá)規(guī)律的條帶時，將底片在清水中洗一下，再定影液中定影。最后將帶有實(shí)驗(yàn)結(jié)片掃描到電腦中，進(jìn)行結(jié)果分析。 結(jié)果.1 睪丸組織中 RNA 和蛋白質(zhì)提取，cDNA 合成檢測結(jié)果對不同月齡睪丸組織中提取的 RNA 進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測和分光光測，可以看出 RNA 提取結(jié)果較好，無降解，并且濃度均在 300ng/ul 左右于后面的實(shí)驗(yàn)（如圖 2.1-Fig.A-a）。

第二篇 研究內(nèi)容 第 2 章 不同發(fā)育階段豬睪丸組織中 miR-375/499 及其預(yù)測的靶基因的表達(dá)規(guī)律研究2.3.2 實(shí)時熒光定量檢測 miR-375 和 DIAPH2、YAP1、YBX1、NR5A2、ITPKB表達(dá)水平qPCR 對 1 日齡，1-7 月齡睪丸組織中 miR-375 的表達(dá)量檢測表明，8 個發(fā)育階段睪丸組織中 miR-375 表達(dá)量呈現(xiàn)上調(diào)趨勢，在前 5 個月齡表達(dá)量極低，5-7月迅速升高。靶基因 NR5A2 呈現(xiàn)先下調(diào)再上調(diào)趨勢，在 3-5 月齡時表達(dá)量較低。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3016553