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血清4型Ⅰ亞群禽腺病毒的分離鑒定及其卵黃抗體的研制與應用

發(fā)布時間:2021-02-03 10:58
  禽類心包積水綜合征(Hydropericardium syndrome,HPS)又稱安卡拉病(Angara disease,AD),是由血清4型Ⅰ亞群禽腺病毒(Fowl Adenovirus serotype 4,FadV-4)引起禽類以心包積液為主要特征的一種高度接觸性、致病性傳染病。2014年以來,該病從我國山東、江蘇、廣東等沿海地區(qū)逐步向河北、河南、山西、安徽、湖北等內陸省份陸續(xù)擴散,給我國養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大的經濟損失。本研究對山東某雞場臨床診斷為疑似FadV-4感染的病死雞進行了病毒分離與鑒定試驗,獲得了FadV-4分離毒株,并利用該分離毒株制備了油乳劑滅活疫苗及高免卵黃抗體,并進行臨床實驗效果評估。獲得了以下結果:(1)針對送檢臨床疑似病料,采用FadV-Ⅰ特異性引物進行PCR檢測,結果為陽性,確診為安卡拉病病毒。(2)將臨床病料接種SPF雞胚進行動物回歸試驗,可引起雞胚規(guī)律性死亡以及心包積液等典型病變,ELD50為10-6.78/0.1 mL。取上清,經血凝性檢測分離株病毒對雞紅細胞無凝集性。采用Hexon基因的特異性引物進行分離株... 

【文章來源】:西北農林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:63 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

血清4型Ⅰ亞群禽腺病毒的分離鑒定及其卵黃抗體的研制與應用


PCR擴增結果

雞胚,稀釋度,病毒,血凝性


圖 2-2 雞胚病變觀察結果Fig.2-2 Results of observation of the disease of chicken embryo2.3.3 分離毒株血凝性的測定結果凝集性試驗結果顯示 SD 株對 1 %雞紅細胞無凝集性。2.3.4 分離毒株病毒含量的測定結果各稀釋度的病變情況如表2-1所示,按Reed-Muench法計算SD株病毒對SPF雞胚的ELD50為10-6.78/0.1 mL,即10-7.78/mL,SD株病毒具有較高的病毒含量。表2-1 病毒含量的測定結果Table 2-1 Results of the determination of virus content稀釋度Dilutiondegree接種雞胚數(shù)(枚)Inoculation of the number ofchicken embryos (pieces)死亡雞胚數(shù)(枚)Number of dead chickenembryos (pieces)未死亡雞胚數(shù)(枚)Number of immaturechicken embryos (pieces10-15 5 0

基因,PCR擴增,毒株,血清型


果毒株經FadV-Ⅰ Hexon基因特,與預期大小相符。將其回收錄的34株FadV-Ⅰ的Hexon基因的系統(tǒng)進化樹(圖2-4)及SD株分離毒株的Hexon基因與中,其與23株FadV-4血清型毒株處于不同分支中,其與11株F,進而從分子水平證實SD株M 1 2

【參考文獻】:
期刊論文
[1]禽腺病毒血清4型河南株的分離鑒定及對雞胚致病性的研究[J]. 李京帥,李銀聚,張春杰,程相朝,吳庭才,余祖華,賈艷艷,李靜,廖成水.  中國獸醫(yī)科學. 2018(04)
[2]卵黃抗體的結構與功能其在人及動物疾病中應用進展[J]. 余運運,孫麗娜,孫萬邦.  中國人獸共患病學報. 2018(01)
[3]獸用疫苗佐劑的研究進展[J]. 鄧碧華,朱俊,馬鶴毓,徐海,盧宇.  畜牧獸醫(yī)科學(電子版). 2017(12)
[4]血清4型禽腺病毒纖突蛋白的真核表達及其免疫反應性[J]. 王偉康,梁廣成,管雪冰,張俊,王萍,張建軍,鄭文鋁,邵紅霞,秦愛建,葉建強.  中國家禽. 2017(23)
[5]AIV、NDV和安卡拉病毒多重PCR檢測方法的建立及應用[J]. 張曼,韓飛.  西北農林科技大學學報(自然科學版). 2018(02)
[6]禽安卡拉病研究進展[J]. 常超越,吳同壘,李蘊玉,張建文,張召興,張志強,賈青輝,李佩國.  安徽農業(yè)科學. 2017(33)
[7]雞血清4型禽腺病毒與HH9亞型禽流感病毒亞型禽流感病毒、新城疫病毒混合感染的鑒定[J]. 梅梅,陸吉虎,張雪花,唐應華,侯繼波.  中國家禽. 2017(22)
[8]西南部分地區(qū)Ⅰ群禽腺病毒的分子流行病學調查及致病性研究[J]. 姚克昌,劉月月,游國進,李淑蕓,夏靜,何肖,李雯雯,杜莉靜,韓新鋒,黃勇.  浙江農業(yè)學報. 2017(11)
[9]動物疾病防治中卵黃抗體的應用初探[J]. 溫馨.  中國動物保健. 2017(11)
[10]禽腺病毒4型抗體間接ELISA檢測方法的建立[J]. 劉延珂,萬文妍,王貝貝,吳艷陽,楊東東,高冬生,李永濤,王新衛(wèi),常洪濤,陳陸,王川慶,趙軍.  中國預防獸醫(yī)學報. 2017(11)

碩士論文
[1]禽腺病毒血清4型的分離鑒定及環(huán)介導等溫擴增技術診斷方法的建立[D]. 白元斌.西北農林科技大學 2017
[2]血清4型禽腺病毒的分離、致病性及其抗體間接免疫熒光方法的初步建立[D]. 梁廣成.揚州大學 2017



本文編號:3016387

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