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嗜水氣單胞菌鞭毛蛋白的純化及重組蛋白FlaB多抗的制備

發(fā)布時(shí)間:2021-02-01 18:55
  嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)屬于弧菌科、氣單胞菌屬,廣泛存在于水體環(huán)境中,能夠感染多種水生和陸生動(dòng)物,是一種重要的人-獸-魚(yú)共患的細(xì)菌病原菌。嗜水氣單胞菌可以使淡水魚(yú)類(lèi)發(fā)生癤病和敗血癥,給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)了嚴(yán)重危害。人感染致病性嗜水氣單胞菌后會(huì)發(fā)生腹瀉、食物中毒、繼發(fā)感染的臨床癥狀,嚴(yán)重威脅到人類(lèi)公共衛(wèi)生安全。鞭毛是嗜水氣單胞菌的一個(gè)特殊結(jié)構(gòu)。鞭毛在細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)方面有著重要作用,它使菌朝著更加有利的環(huán)境運(yùn)動(dòng)或者避開(kāi)不利的外界條件,增強(qiáng)與其他微生物的競(jìng)爭(zhēng)能力。此外,鞭毛在黏附、生物膜形成以及病原菌定植中起關(guān)鍵作用,是一種重要的毒力因子。本研究提取和純化了嗜水氣單胞菌天然鞭毛蛋白,透射電鏡初步觀察鑒定了鞭毛的形態(tài),SDS-PAGE結(jié)果顯示,純化的鞭毛蛋白在40kDa處有一條蛋白帶。并用天然鞭毛蛋白免疫了鯽魚(yú),純化鯽魚(yú)免疫后血清中的IgM,制備了HRP標(biāo)記的兔抗魚(yú)免疫球蛋白抗體,為魚(yú)類(lèi)血清學(xué)檢測(cè)提供了工具。另外,根據(jù)GenBank上已經(jīng)公布的基因序列設(shè)計(jì)引物,成功克隆了嗜水氣單胞菌鞭毛flaB基因,序列長(zhǎng)度為912bp。雙酶切后構(gòu)建了重組表達(dá)載體30a-flaB,并在... 

【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

嗜水氣單胞菌鞭毛蛋白的純化及重組蛋白FlaB多抗的制備


細(xì)菌鞭毛結(jié)構(gòu)示意圖

鞭毛蛋白,條帶,波長(zhǎng)


鞭毛蛋白SDS-PAGE分析

透射電鏡,鞭毛,嗜水氣單胞菌,鞭毛蛋白


圖 1.1 鞭毛蛋白 SDS-PAGE 分析 Marker(14-100kDa);1:鞭毛蛋白;2:粗提取Fig.1.1 SDS-PAGE analysis of flagellinin molecular marker;1:purified flagellin; 2:imp胞菌鞭毛透射電鏡樣品稀釋到適當(dāng)濃度,用 H-7650 型透射電鏡進(jìn)在一起,見(jiàn)圖 1.2M140kD2

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3013264

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