嗜水氣單胞菌鞭毛蛋白的純化及重組蛋白FlaB多抗的制備
發(fā)布時(shí)間:2021-02-01 18:55
嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)屬于弧菌科、氣單胞菌屬,廣泛存在于水體環(huán)境中,能夠感染多種水生和陸生動(dòng)物,是一種重要的人-獸-魚(yú)共患的細(xì)菌病原菌。嗜水氣單胞菌可以使淡水魚(yú)類(lèi)發(fā)生癤病和敗血癥,給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)了嚴(yán)重危害。人感染致病性嗜水氣單胞菌后會(huì)發(fā)生腹瀉、食物中毒、繼發(fā)感染的臨床癥狀,嚴(yán)重威脅到人類(lèi)公共衛(wèi)生安全。鞭毛是嗜水氣單胞菌的一個(gè)特殊結(jié)構(gòu)。鞭毛在細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)方面有著重要作用,它使菌朝著更加有利的環(huán)境運(yùn)動(dòng)或者避開(kāi)不利的外界條件,增強(qiáng)與其他微生物的競(jìng)爭(zhēng)能力。此外,鞭毛在黏附、生物膜形成以及病原菌定植中起關(guān)鍵作用,是一種重要的毒力因子。本研究提取和純化了嗜水氣單胞菌天然鞭毛蛋白,透射電鏡初步觀察鑒定了鞭毛的形態(tài),SDS-PAGE結(jié)果顯示,純化的鞭毛蛋白在40kDa處有一條蛋白帶。并用天然鞭毛蛋白免疫了鯽魚(yú),純化鯽魚(yú)免疫后血清中的IgM,制備了HRP標(biāo)記的兔抗魚(yú)免疫球蛋白抗體,為魚(yú)類(lèi)血清學(xué)檢測(cè)提供了工具。另外,根據(jù)GenBank上已經(jīng)公布的基因序列設(shè)計(jì)引物,成功克隆了嗜水氣單胞菌鞭毛flaB基因,序列長(zhǎng)度為912bp。雙酶切后構(gòu)建了重組表達(dá)載體30a-flaB,并在...
【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:59 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
細(xì)菌鞭毛結(jié)構(gòu)示意圖
鞭毛蛋白SDS-PAGE分析
圖 1.1 鞭毛蛋白 SDS-PAGE 分析 Marker(14-100kDa);1:鞭毛蛋白;2:粗提取Fig.1.1 SDS-PAGE analysis of flagellinin molecular marker;1:purified flagellin; 2:imp胞菌鞭毛透射電鏡樣品稀釋到適當(dāng)濃度,用 H-7650 型透射電鏡進(jìn)在一起,見(jiàn)圖 1.2M140kD2
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]嗜水氣單胞菌毒力因子及病害控制技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 蔣啟歡,葉應(yīng)旺,胡王,江河,陸劍鋒. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2012(06)
[2]嗜水氣單胞菌相關(guān)毒力基因的研究進(jìn)展[J]. 李文艷,張偉偉,馬秀娟,于建芳. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(09)
[3]應(yīng)用電鏡負(fù)染色技術(shù)檢測(cè)嗜水氣單胞菌[J]. 張文麗,張玉芬,張秀軍. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(27)
[4]嗜水氣單胞菌氣溶素的純化及其溶血特性分析[J]. 龔暉,林天龍,徐長(zhǎng)安,張曉佩,楊先樂(lè). 中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào). 2009(05)
[5]水產(chǎn)動(dòng)物致病性嗜水氣單胞菌的分離鑒定[J]. 呂愛(ài)軍,胡秀彩,李槿年,余為一. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(02)
[6]嗜水氣單胞菌的研究進(jìn)展[J]. 沈錦玉. 浙江海洋學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2008(01)
[7]黃鰭棘鯛血清IgM的純化及兔抗血清的制備[J]. 劉振興,張殿昌,蘇天鳳,姜巨峰,龔世園,江世貴. 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué). 2008(01)
[8]鱖致病性嗜水氣單胞菌GYK1株的鑒定、毒力及溶血性[J]. 潘厚軍,吳淑勤,董傳甫,石存斌,葉美茜,林天龍,黃志斌. 上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào). 2004(01)
[9]嗜水氣單胞菌毒力基因的研究進(jìn)展[J]. 朱大玲,李?lèi)?ài)華,錢(qián)冬,汪建國(guó). 水生生物學(xué)報(bào). 2004(01)
[10]西藏雛鴨嗜水氣單胞菌病的病原研究[J]. 查果,索郎斯珠,李小軍,亢小飛. 畜牧與獸醫(yī). 2001(06)
本文編號(hào):3013264
【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:59 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
細(xì)菌鞭毛結(jié)構(gòu)示意圖
鞭毛蛋白SDS-PAGE分析
圖 1.1 鞭毛蛋白 SDS-PAGE 分析 Marker(14-100kDa);1:鞭毛蛋白;2:粗提取Fig.1.1 SDS-PAGE analysis of flagellinin molecular marker;1:purified flagellin; 2:imp胞菌鞭毛透射電鏡樣品稀釋到適當(dāng)濃度,用 H-7650 型透射電鏡進(jìn)在一起,見(jiàn)圖 1.2M140kD2
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]嗜水氣單胞菌毒力因子及病害控制技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 蔣啟歡,葉應(yīng)旺,胡王,江河,陸劍鋒. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2012(06)
[2]嗜水氣單胞菌相關(guān)毒力基因的研究進(jìn)展[J]. 李文艷,張偉偉,馬秀娟,于建芳. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(09)
[3]應(yīng)用電鏡負(fù)染色技術(shù)檢測(cè)嗜水氣單胞菌[J]. 張文麗,張玉芬,張秀軍. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(27)
[4]嗜水氣單胞菌氣溶素的純化及其溶血特性分析[J]. 龔暉,林天龍,徐長(zhǎng)安,張曉佩,楊先樂(lè). 中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào). 2009(05)
[5]水產(chǎn)動(dòng)物致病性嗜水氣單胞菌的分離鑒定[J]. 呂愛(ài)軍,胡秀彩,李槿年,余為一. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(02)
[6]嗜水氣單胞菌的研究進(jìn)展[J]. 沈錦玉. 浙江海洋學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2008(01)
[7]黃鰭棘鯛血清IgM的純化及兔抗血清的制備[J]. 劉振興,張殿昌,蘇天鳳,姜巨峰,龔世園,江世貴. 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué). 2008(01)
[8]鱖致病性嗜水氣單胞菌GYK1株的鑒定、毒力及溶血性[J]. 潘厚軍,吳淑勤,董傳甫,石存斌,葉美茜,林天龍,黃志斌. 上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào). 2004(01)
[9]嗜水氣單胞菌毒力基因的研究進(jìn)展[J]. 朱大玲,李?lèi)?ài)華,錢(qián)冬,汪建國(guó). 水生生物學(xué)報(bào). 2004(01)
[10]西藏雛鴨嗜水氣單胞菌病的病原研究[J]. 查果,索郎斯珠,李小軍,亢小飛. 畜牧與獸醫(yī). 2001(06)
本文編號(hào):3013264
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