A型流感病毒屬于正黏病毒科單股負(fù)鏈RNA病毒，其作為重要的呼吸道病原體，自20世紀(jì)以來全球范圍內(nèi)已發(fā)生多次流感大流行，對人類的健康、公共衛(wèi)生及財(cái)產(chǎn)安全造成一定的影響。更令人擔(dān)憂的是，人感染H5N1高致病性禽流感后，死亡率可高達(dá)60%左右，若一旦引起該種流感病毒的大范圍流行，將會(huì)產(chǎn)生不可估量的損失。有研究者發(fā)現(xiàn)，高致病性禽流感感染機(jī)體產(chǎn)生強(qiáng)烈的細(xì)胞因子風(fēng)暴，是導(dǎo)致宿主死亡的主要原因。SOCS家族在先天性免疫調(diào)節(jié)和獲得性免疫調(diào)節(jié)中起到關(guān)鍵作用，并能夠抑制細(xì)胞因子信號通路。本研究利用豚鼠作為模式動(dòng)物，研究SOCS家族蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞因子和抵抗流感病毒中所發(fā)揮的作用。首先，建立了SOCS家族蛋白熒光定量RT-PCR檢測方法，分別通過相對定量和絕對定量方法驗(yàn)證了豚鼠體內(nèi)SOCS家族感染H5N1流感病毒后基因的表達(dá)量。本實(shí)驗(yàn)分別設(shè)計(jì)了8對針對SOCS家族的熒光定量PCR引物，利用SYBR-Green染料方法，建立了檢測方法，通過擴(kuò)增曲線和溶解曲線進(jìn)行分析，證明建立方法具有很好的特異性。進(jìn)一步利用高致病性禽流感病毒H5N1通過滴鼻的方式感染豚鼠，感染后對豚鼠肺臟中的SOCSmRNA表達(dá)水平進(jìn)行分析，檢... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 流感病毒病原學(xué)基礎(chǔ)
        1.1 流感病毒概述
        1.2 流感病毒的復(fù)制機(jī)制
        1.3 禽流感病毒的致病力
        1.4 禽流感病毒流行現(xiàn)狀
        1.5 流感病毒中常用動(dòng)物模型
    2 流感病毒引起的宿主先天免疫應(yīng)答研究
        2.1 固有免疫應(yīng)答識(shí)別機(jī)制
        2.2 細(xì)胞因子
    3 細(xì)胞因子信號抑制（SOCS）蛋白家族研究
第二章 豚鼠在感染流感病毒后 SOCS 家族基因表達(dá)水平分析
    1 引言
    2 材料和方法
        2.1 病毒
        2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.3 主要儀器設(shè)備
        2.4 主要試劑
        2.5 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 目的片段 PCR 擴(kuò)增
        3.2 重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建
        3.3 熒光定量 RT-PCR 檢測方法的建立
        3.4 豚鼠感染 AIV 后 SOCS 家族 mRNA 表達(dá)變化
    4 討論
    5 小結(jié)
第三章 豚鼠 SOCS1 和 SOCS3 對調(diào)節(jié)細(xì)胞因子及病毒復(fù)制能力的影響
    1 引言
    2 材料和方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)病毒及細(xì)胞
        2.2 主要儀器設(shè)備
        2.3 主要試劑
        2.4 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 細(xì)胞感染 AIV 后 SOCS 家族 mRNA 表達(dá)變化
        3.2 豚鼠 SOCS1 和 SOCS3 真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建
        3.3 重組質(zhì)粒過表達(dá)對細(xì)胞因子調(diào)節(jié)及病毒復(fù)制力影響
    4 討論
    5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝



本文編號：3012486