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一種高產(chǎn)L-賴氨酸枯草芽孢桿菌的構(gòu)建研究

發(fā)布時間:2021-02-01 05:31
  為了選育一種非抗性、高產(chǎn)出、遺傳穩(wěn)定性好、低生產(chǎn)成本的L-賴氨酸生產(chǎn)菌株,以辣椒花藥和枯草芽孢桿菌為試驗材料,以穿梭表達載體pHT43和基因敲除載體pK18mobsacB為媒介,將辣椒花藥中的高賴氨酸基因CFLR轉(zhuǎn)化到枯草芽孢桿菌中。經(jīng)過2次細胞內(nèi)同源交換和培養(yǎng)基篩選,最終獲得不帶質(zhì)?剐詷擞浀母弋a(chǎn)L-賴氨酸枯草芽孢桿菌株CMCC(B)63501/pK18mobsacB-ΔALA::CFLR,該菌株連續(xù)傳代20次后仍具有明顯高于野生型的CFLR基因拷貝數(shù),經(jīng)HPLC驗證,重組菌株L-賴氨酸含量比野生菌株提高了64.89%。結(jié)果表明,本研究所構(gòu)建的非抗性高產(chǎn)L-賴氨酸枯草芽孢桿菌株產(chǎn)量高、遺傳穩(wěn)定性好、低純化成本,具有良好的應(yīng)用潛力。 

【文章來源】:中國農(nóng)學(xué)通報. 2020,36(30)

【文章頁數(shù)】:8 頁

【部分圖文】:

一種高產(chǎn)L-賴氨酸枯草芽孢桿菌的構(gòu)建研究


CFLR克隆及鑒定結(jié)果

一種高產(chǎn)L-賴氨酸枯草芽孢桿菌的構(gòu)建研究


p K18mobsac B-ΔALA的構(gòu)建

質(zhì)粒,菌落,基因


酶切鑒定重組質(zhì)粒p K18mobsac B-ΔALA::CFLR

【參考文獻】:
期刊論文
[1]構(gòu)建重組枯草芽孢桿菌催化制備D-對羥基苯甘氨酸[J]. 李法彬,劉露,杜燕,班睿.  中國生物工程雜志. 2019(03)
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[10]HPLC測定飼料源小肽產(chǎn)品中賴氨酸含量[J]. 黃建國,高學(xué)軍,佟慧麗,劉曉飛.  乳業(yè)科學(xué)與技術(shù). 2009(02)

博士論文
[1]中心代謝優(yōu)化促進枯草芽孢桿菌積累N-乙酰氨基葡萄糖[D]. 馬文龍.江南大學(xué) 2018

碩士論文
[1]基于代謝工程構(gòu)建大腸桿菌L-賴氨酸高產(chǎn)菌[D]. 趙德周.重慶大學(xué) 2017



本文編號:3012259

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