一種高產(chǎn)L-賴氨酸枯草芽孢桿菌的構(gòu)建研究
發(fā)布時間:2021-02-01 05:31
為了選育一種非抗性、高產(chǎn)出、遺傳穩(wěn)定性好、低生產(chǎn)成本的L-賴氨酸生產(chǎn)菌株,以辣椒花藥和枯草芽孢桿菌為試驗材料,以穿梭表達載體pHT43和基因敲除載體pK18mobsacB為媒介,將辣椒花藥中的高賴氨酸基因CFLR轉(zhuǎn)化到枯草芽孢桿菌中。經(jīng)過2次細胞內(nèi)同源交換和培養(yǎng)基篩選,最終獲得不帶質(zhì)?剐詷擞浀母弋a(chǎn)L-賴氨酸枯草芽孢桿菌株CMCC(B)63501/pK18mobsacB-ΔALA::CFLR,該菌株連續(xù)傳代20次后仍具有明顯高于野生型的CFLR基因拷貝數(shù),經(jīng)HPLC驗證,重組菌株L-賴氨酸含量比野生菌株提高了64.89%。結(jié)果表明,本研究所構(gòu)建的非抗性高產(chǎn)L-賴氨酸枯草芽孢桿菌株產(chǎn)量高、遺傳穩(wěn)定性好、低純化成本,具有良好的應(yīng)用潛力。
【文章來源】:中國農(nóng)學(xué)通報. 2020,36(30)
【文章頁數(shù)】:8 頁
【部分圖文】:
CFLR克隆及鑒定結(jié)果
p K18mobsac B-ΔALA的構(gòu)建
酶切鑒定重組質(zhì)粒p K18mobsac B-ΔALA::CFLR
【參考文獻】:
期刊論文
[1]構(gòu)建重組枯草芽孢桿菌催化制備D-對羥基苯甘氨酸[J]. 李法彬,劉露,杜燕,班睿. 中國生物工程雜志. 2019(03)
[2]歐盟批準一種賴氨酸硫酸鹽作為飼料添加劑[J]. 食品與生物技術(shù)學(xué)報. 2017(05)
[3]枯草芽孢桿菌表達系統(tǒng)及其啟動子研究進展[J]. 余小霞,田健,劉曉青,伍寧豐. 生物技術(shù)通報. 2015(02)
[4]ε-聚-L-賴氨酸生產(chǎn)菌株的遺傳改造與發(fā)酵優(yōu)化控制[J]. 唐蕾,毛忠貴. 食品與發(fā)酵工業(yè). 2014(08)
[5]高賴氨酸蛋白基因Cflr在枯草芽孢桿菌中表達[J]. 武彩霞,高學(xué)軍,李慶章,駱超超,畢微微,史琳琳,張莉. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2013(09)
[6]轉(zhuǎn)Sb401基因高賴氨酸蛋白玉米植株的獲得[J]. 鐵雙貴,陳小潔,岳潤清,齊建雙,燕樹鋒,韓小花,徐玉隔,林鴻. 華北農(nóng)學(xué)報. 2013(04)
[7]微生物發(fā)酵法生產(chǎn)L-賴氨酸的研究進展[J]. 張軍華. 生物加工過程. 2012(02)
[8]犬細小病毒VP2基因在枯草芽孢桿菌中的表達及鑒定[J]. 李爽,黃文斌,黃愛玲,呂暾. 生物技術(shù)通報. 2011(12)
[9]側(cè)孢短芽孢桿菌堿性蛋白酶基因BLG4在枯草芽孢桿菌WB600中的高效表達[J]. 郭菁,田寶玉,蔡婉玲,黃薇,江賢章,黃建忠. 福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2011(02)
[10]HPLC測定飼料源小肽產(chǎn)品中賴氨酸含量[J]. 黃建國,高學(xué)軍,佟慧麗,劉曉飛. 乳業(yè)科學(xué)與技術(shù). 2009(02)
博士論文
[1]中心代謝優(yōu)化促進枯草芽孢桿菌積累N-乙酰氨基葡萄糖[D]. 馬文龍.江南大學(xué) 2018
碩士論文
[1]基于代謝工程構(gòu)建大腸桿菌L-賴氨酸高產(chǎn)菌[D]. 趙德周.重慶大學(xué) 2017
本文編號:3012259
【文章來源】:中國農(nóng)學(xué)通報. 2020,36(30)
【文章頁數(shù)】:8 頁
【部分圖文】:
CFLR克隆及鑒定結(jié)果
p K18mobsac B-ΔALA的構(gòu)建
酶切鑒定重組質(zhì)粒p K18mobsac B-ΔALA::CFLR
【參考文獻】:
期刊論文
[1]構(gòu)建重組枯草芽孢桿菌催化制備D-對羥基苯甘氨酸[J]. 李法彬,劉露,杜燕,班睿. 中國生物工程雜志. 2019(03)
[2]歐盟批準一種賴氨酸硫酸鹽作為飼料添加劑[J]. 食品與生物技術(shù)學(xué)報. 2017(05)
[3]枯草芽孢桿菌表達系統(tǒng)及其啟動子研究進展[J]. 余小霞,田健,劉曉青,伍寧豐. 生物技術(shù)通報. 2015(02)
[4]ε-聚-L-賴氨酸生產(chǎn)菌株的遺傳改造與發(fā)酵優(yōu)化控制[J]. 唐蕾,毛忠貴. 食品與發(fā)酵工業(yè). 2014(08)
[5]高賴氨酸蛋白基因Cflr在枯草芽孢桿菌中表達[J]. 武彩霞,高學(xué)軍,李慶章,駱超超,畢微微,史琳琳,張莉. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2013(09)
[6]轉(zhuǎn)Sb401基因高賴氨酸蛋白玉米植株的獲得[J]. 鐵雙貴,陳小潔,岳潤清,齊建雙,燕樹鋒,韓小花,徐玉隔,林鴻. 華北農(nóng)學(xué)報. 2013(04)
[7]微生物發(fā)酵法生產(chǎn)L-賴氨酸的研究進展[J]. 張軍華. 生物加工過程. 2012(02)
[8]犬細小病毒VP2基因在枯草芽孢桿菌中的表達及鑒定[J]. 李爽,黃文斌,黃愛玲,呂暾. 生物技術(shù)通報. 2011(12)
[9]側(cè)孢短芽孢桿菌堿性蛋白酶基因BLG4在枯草芽孢桿菌WB600中的高效表達[J]. 郭菁,田寶玉,蔡婉玲,黃薇,江賢章,黃建忠. 福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2011(02)
[10]HPLC測定飼料源小肽產(chǎn)品中賴氨酸含量[J]. 黃建國,高學(xué)軍,佟慧麗,劉曉飛. 乳業(yè)科學(xué)與技術(shù). 2009(02)
博士論文
[1]中心代謝優(yōu)化促進枯草芽孢桿菌積累N-乙酰氨基葡萄糖[D]. 馬文龍.江南大學(xué) 2018
碩士論文
[1]基于代謝工程構(gòu)建大腸桿菌L-賴氨酸高產(chǎn)菌[D]. 趙德周.重慶大學(xué) 2017
本文編號:3012259
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/dongwuyixue/3012259.html
最近更新
教材專著