豬帶絳蟲烯醇化酶基因的克
發(fā)布時(shí)間:2021-01-30 11:46
豬囊尾蚴是帶科帶屬的豬帶絳蟲(Taenia solium)幼蟲,常見于肌肉組織,引起豬和人的囊蟲病,進(jìn)而影響?zhàn)B豬業(yè)的發(fā)展和人類的健康。由于寄生環(huán)境的影響,豬帶絳蟲以糖酵解為主,進(jìn)行物質(zhì)和能量代謝。烯醇化酶(enolase,ENO,酶分類編號(hào):EC4.2.1.11)是一種多功能蛋白,廣泛存在于許多生物體內(nèi),不僅作為糖酵解酶影響細(xì)胞的物質(zhì)和能量代謝,又具有參與病原體入侵宿主、免疫刺激蛋白及熱激蛋白等多種功能。因此,本文對enolase進(jìn)行了克隆、表達(dá)及功能的研究。取得如下結(jié)果:1.以豬帶絳蟲的cDNA為模板,首次擴(kuò)增獲得豬帶絳蟲enolase基因。Real-time PCR結(jié)果表明,enolase在成蟲期表達(dá)量高。利用生物信息學(xué)軟件,對該基因進(jìn)行序列分析。序列分析表明該基因ORF大小為1302bp,編碼433個(gè)氨基酸,理論分子質(zhì)量為46.56ku,分析了豬帶絳蟲烯醇化酶可能的纖溶酶原結(jié)合基序(238GKVKIGMDVAASEFYQDGKYNLDF261)。2.成功構(gòu)建了重組表達(dá)質(zhì)粒pET-30a(+)-ENO,并獲得了以可溶性形式高效表達(dá)的重組蛋白rTsENO,大小約為53ku。Weste...
【文章來源】:新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
豬帶絳蟲生活史(引自GARCIAHH等[1]
選擇性翻譯的結(jié)果,可抑制 Myc 的轉(zhuǎn)錄[60]。另外,enolase 可作的研究中,發(fā)現(xiàn)擬南芥 LOS2 是負(fù)責(zé)低溫應(yīng)答基因轉(zhuǎn)錄的部位,通編碼 enolase 的基因上,顯示 LOS2 突變體可損害低溫誘導(dǎo)下集南芥 enolase 可結(jié)合、抑制并調(diào)節(jié) STZ/ZAT10 的基因啟動(dòng)子,該迅速且短暫誘導(dǎo)的鋅指轉(zhuǎn)錄因子[62]。
表面表達(dá)的 enolase 可能源于 enolase 的分泌或者再結(jié)合到表面的未是存在于病原體表面的纖溶酶原結(jié)合蛋白,這種相互作用可以促使纖參與入侵宿主的過程[65, 72]。在蠕蟲中,如牛血吸蟲體壁、肝片吸蟲盤尾絲蟲的一些組織中的 enolase 也可以作為纖溶酶原結(jié)合蛋白[28, 39酶原結(jié)合特性提示其可以參與組織入侵和致病過程。在廣泛的病理及的纖溶酶原參與細(xì)胞外蛋白水解作用和血栓降解。在腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移過lase 可以與細(xì)胞的骨架系統(tǒng)相互作用,為促進(jìn)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移提供 AT激活膠原酶原為膠原酶,并降解纖維蛋白以及包括纖連蛋白和層黏蛋組分,包括組織修復(fù)、傷口愈合、正常和惡性細(xì)胞在體內(nèi)的傳播以及表明,某些哺乳動(dòng)物細(xì)胞以及病原生物可能利用相同的策略將 enol結(jié)合并進(jìn)一步激活血纖維溶酶原,最終導(dǎo)致組織入侵,并在體內(nèi)傳與與病原生物侵染過程的機(jī)理見圖 1-3。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]快速檢測豬囊蟲抗體的金免疫層析法的建立及應(yīng)用[J]. 唐雨德,周東明,陸承平. 中國人獸共患病雜志. 2003(05)
[2]豬囊尾蚴病免疫治療研究[J]. 張京,張中庸,李靚如,馬春艷,吳蓮英. 中國人獸共患病雜志. 2000(06)
博士論文
[1]表達(dá)Tsol18抗原的口服減毒鼠傷寒沙門氏菌重組活載體疫苗的構(gòu)建及其免疫學(xué)研究[D]. 丁軍濤.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2008
[2]帶科主要絳蟲45W和14ku/18ku基因變異的研究[D]. 賈萬忠.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2003
本文編號(hào):3008841
【文章來源】:新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
豬帶絳蟲生活史(引自GARCIAHH等[1]
選擇性翻譯的結(jié)果,可抑制 Myc 的轉(zhuǎn)錄[60]。另外,enolase 可作的研究中,發(fā)現(xiàn)擬南芥 LOS2 是負(fù)責(zé)低溫應(yīng)答基因轉(zhuǎn)錄的部位,通編碼 enolase 的基因上,顯示 LOS2 突變體可損害低溫誘導(dǎo)下集南芥 enolase 可結(jié)合、抑制并調(diào)節(jié) STZ/ZAT10 的基因啟動(dòng)子,該迅速且短暫誘導(dǎo)的鋅指轉(zhuǎn)錄因子[62]。
表面表達(dá)的 enolase 可能源于 enolase 的分泌或者再結(jié)合到表面的未是存在于病原體表面的纖溶酶原結(jié)合蛋白,這種相互作用可以促使纖參與入侵宿主的過程[65, 72]。在蠕蟲中,如牛血吸蟲體壁、肝片吸蟲盤尾絲蟲的一些組織中的 enolase 也可以作為纖溶酶原結(jié)合蛋白[28, 39酶原結(jié)合特性提示其可以參與組織入侵和致病過程。在廣泛的病理及的纖溶酶原參與細(xì)胞外蛋白水解作用和血栓降解。在腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移過lase 可以與細(xì)胞的骨架系統(tǒng)相互作用,為促進(jìn)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移提供 AT激活膠原酶原為膠原酶,并降解纖維蛋白以及包括纖連蛋白和層黏蛋組分,包括組織修復(fù)、傷口愈合、正常和惡性細(xì)胞在體內(nèi)的傳播以及表明,某些哺乳動(dòng)物細(xì)胞以及病原生物可能利用相同的策略將 enol結(jié)合并進(jìn)一步激活血纖維溶酶原,最終導(dǎo)致組織入侵,并在體內(nèi)傳與與病原生物侵染過程的機(jī)理見圖 1-3。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]快速檢測豬囊蟲抗體的金免疫層析法的建立及應(yīng)用[J]. 唐雨德,周東明,陸承平. 中國人獸共患病雜志. 2003(05)
[2]豬囊尾蚴病免疫治療研究[J]. 張京,張中庸,李靚如,馬春艷,吳蓮英. 中國人獸共患病雜志. 2000(06)
博士論文
[1]表達(dá)Tsol18抗原的口服減毒鼠傷寒沙門氏菌重組活載體疫苗的構(gòu)建及其免疫學(xué)研究[D]. 丁軍濤.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2008
[2]帶科主要絳蟲45W和14ku/18ku基因變異的研究[D]. 賈萬忠.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2003
本文編號(hào):3008841
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