肌衛(wèi)星細(xì)胞是一種干細(xì)胞，存在于膜鞘與肌肉纖維間的靜止細(xì)胞，能與肌肉纖維融合成為先驅(qū)細(xì)胞應(yīng)對(duì)損傷反應(yīng)。肌衛(wèi)星細(xì)胞免疫因子的變化直接與旋毛蟲(chóng)治療自主免疫病、旋毛蟲(chóng)抗病毒免疫有關(guān)。目前國(guó)內(nèi)關(guān)于旋毛蟲(chóng)感染對(duì)衛(wèi)星細(xì)胞免疫微環(huán)境調(diào)控的系統(tǒng)研究未見(jiàn)報(bào)道。本研究擬通過(guò)分離原代衛(wèi)星細(xì)胞，利用流式細(xì)胞儀和相對(duì)熒光定量PCR技術(shù)，探究感染旋毛蟲(chóng)后，衛(wèi)星細(xì)胞免疫因子的一系列變化。本研究采用灌胃感染BALB/c小鼠，從感染組和對(duì)照組小鼠的后肢骨骼肌中，利用Percoll連續(xù)離心和差速貼壁法的結(jié)合運(yùn)用分離出純度較高的肌衛(wèi)星細(xì)胞，采用Desmin免疫細(xì)胞化學(xué)染色對(duì)其進(jìn)行鑒定，并對(duì)分離所得肌衛(wèi)星細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)。采用相對(duì)熒光定量PCR和流式細(xì)胞術(shù)，對(duì)小鼠感染4d、21d、35d后所分離的衛(wèi)星細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)。流式細(xì)胞術(shù)分析旋毛蟲(chóng)感染的肌衛(wèi)星細(xì)胞，結(jié)果表明，當(dāng)感染旋毛蟲(chóng)后，肌衛(wèi)星細(xì)胞B7-H1表達(dá)量增加，而且在35d形成包囊并且炎癥反應(yīng)減弱后，其表達(dá)量也未明顯減少。而ICOSL的表達(dá)量卻顯著下調(diào)。熒光定量PCR分析表明，旋毛蟲(chóng)感染后，肌衛(wèi)星細(xì)胞TLR3表達(dá)量增加，尤其是在21d最為明顯。PPARs的三個(gè)亞型：PPARα、P... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

肌衛(wèi)星細(xì)胞的自我更新模式

果的后肢肌肉經(jīng)過(guò) Percoll 分離，試管為粉紅色的液體，是生長(zhǎng)培養(yǎng)基ercoll 之間，是死細(xì)胞和細(xì)胞碎片于 20％Percoll 和 60％ Percoll 之星細(xì)胞；第五層是 60％ Percoll 工圖 1.1 所示。

圖 1.2 肌衛(wèi)星細(xì)胞的鑒定結(jié)果Figure 1.2 Identification results of Muscle satellite cellsA: Muscle satellite cells of anti- α-actin antibodyB: Muscle satellite cells of anti- desmin antibody3 討論3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及取材選取的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠為 12 g 左右的，因?yàn)樗崛〉男l(wèi)星細(xì)胞屬于干細(xì)胞，小鼠年齡越大，則肌肉組織中衛(wèi)星細(xì)胞的含量則會(huì)越少，因此分離肌衛(wèi)星細(xì)胞應(yīng)該是選擇越小的鼠越好；可是因?yàn)樾∈笮枰辔父腥拘x(chóng)，太小的小鼠會(huì)因?yàn)榭诜腥拘x(chóng)肌幼蟲(chóng)后，不能耐受而死亡。因此，綜合兩方面考慮，則選取了12 g 左右的小鼠，大概是出生后 4 周齡左右的小鼠。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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