Galectin-3是半乳糖凝集素家族的重要成員之一,具有調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖,分化和凋亡等多效生物學(xué)功能。然而,關(guān)于仔豬galectin-3的報(bào)道很少,尤其是galectin-3在斷奶仔豬腸道發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)模式。本試驗(yàn)的研究目的是探究galectin-3在斷奶仔豬腸上皮細(xì)胞（IECs）發(fā)育和更新中的表達(dá)模式和作用。該試驗(yàn)選取24頭21日齡杜х長(zhǎng)х大三元雜交斷奶仔豬,在斷奶后0、1、3、7天隨機(jī)選取6頭進(jìn)行屠殺采樣,并收集腸道等組織樣品用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)分析。主要結(jié)果如下:1)克隆出Sus scrofa galectin-3基因全長(zhǎng)cDNA。通過(guò)核苷酸序列分析證明galectin-3基因可編碼241個(gè)氨基酸。2)在空腸中,斷奶后第0天（D0）和第3天（D3）galectin-3蛋白質(zhì)和mRNA表達(dá)水平高于第1天（D1）和第7天（D7）。相反,在十二指腸和回腸中,第1天（D1）和第7天（D7）galectin-3表達(dá)則高于D0和D3。3)galectin-3免疫組織化學(xué)分析顯示,絨毛區(qū)域galectin-3的表達(dá)顯著高于隱窩區(qū)域,表明galectin-3可能對(duì)斷奶仔豬腸上皮細(xì)胞更新有重要作用。4)細(xì)... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

半乳糖凝集素CRDs的超二級(jí)結(jié)構(gòu)

碩士學(xué)位論文水平之間的相關(guān)性。事實(shí)上，galectin-3 與 β-catenin 具有高度的結(jié)構(gòu)相似性，包括存在糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）磷酸化的共有序列。此外，與 Wnt 結(jié)合的調(diào)節(jié)蛋白 Axin 也識(shí)別并與 galectin-3 復(fù)合[67, 68]。據(jù)報(bào)道 h-catenin-Axin 關(guān)聯(lián)通過(guò)GSK3h 促進(jìn) h-catenin 磷酸化[64, 65]，而經(jīng) Shimura 團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn) galectin-3 是 h-catenin的結(jié)合伴侶；在 Wnt 介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中，gal-3-h-catenin 相互作用，可通過(guò)Axin、GSK-3h 和 CKI 調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)降解或基因轉(zhuǎn)錄[69]（圖 1-2）。

1 克隆 galectin-3 基因及同源性分析為了探究 galectin-3 在仔豬斷奶時(shí)期的動(dòng)態(tài)變化及功能作用，本研究從仔豬腸道的組織中克隆了 galectin-3 cDNA 的全長(zhǎng)序列。galectin-3 基因的全長(zhǎng)序列由967 個(gè)核苷酸序列構(gòu)成，包括 5 UTR,中間編碼序列，3 UTR 和 poly(A)尾(NCBIAccession number: NM_001097501 )。galectin-3 cDNA 中鑒定出 781bp 的開放閱讀框（ORF）。利用 DNAMAN 軟件比對(duì)人類、豬和鼠 galectin-3 cDNA 序列，找到保守區(qū)域，設(shè)計(jì)豬 galectin-3 引物。以豬腸段 cDNA 為模板，經(jīng) PCR 擴(kuò)增，得到 galectin-3 片段。再利用 ExPAsy 軟件對(duì)豬的 galectin-3 氨基酸序列與鼠、人的 galectin-3 序列進(jìn)行比對(duì)( 圖 3-1) 。galectin-3 蛋白能編碼 241 個(gè)氨基酸（aa），其氨基酸數(shù)量與其他哺乳動(dòng)物相似：250aa（人）和 264aa（小鼠）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3005309