發(fā)布時間：2021-01-28 08:42

　　RUNX1和RUNX2是轉(zhuǎn)錄因子RUNX家族成員,在人和鼠的卵泡發(fā)育和排卵等多種生殖過程中扮演著重要的角色,然而它們在奶山羊卵泡中的表達(dá)調(diào)控機(jī)理仍不是十分清晰。因此,本研究以關(guān)中奶山羊卵巢顆粒細(xì)胞為研究對象,使用免疫組化、免疫熒光、real-time PCR、western blot、ELISA、CCK-8、EdU和流式細(xì)胞術(shù)等方法,研究了hCG、miR-181b和miR-222在關(guān)中奶山羊卵巢顆粒細(xì)胞中對RUNX1和RUNX2的表達(dá)調(diào)控機(jī)理,以及RUNX1、RUNX2、miR-181b和miR-222對奶山羊卵巢顆粒細(xì)胞增殖、凋亡以及激素分泌的作用。主要研究結(jié)果如下:1.RUNX1和RUNX2在關(guān)中奶山羊卵巢組織中的表達(dá)分析Real-time PCR的結(jié)果顯示,RUNX1和RUNX2 mRNA在關(guān)中奶山羊的心、肝、脾、肺、腎、肌肉、脂肪、乳腺、子宮、輸卵管和卵巢組織中均有表達(dá),在乳腺中表達(dá)量最高,在肌肉中表達(dá)量最低。免疫組化分析結(jié)果表明,RUNX1和RUNX2蛋白在腔前卵泡的顆粒細(xì)胞和卵母細(xì)胞,有腔卵泡的顆粒細(xì)胞、卵母細(xì)胞和膜細(xì)胞,以及黃體中表達(dá)。2.hCG對奶山羊卵巢顆粒細(xì)胞中RU... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

RUNX與信號通路網(wǎng)絡(luò)圖(Itoetal.2015)

、RUNX2 和 RUNX3，它們擁有一個由 128 個氨基酸組成的高度保守合的 Runt 結(jié)構(gòu)域（與果蠅 Runt 基因高度同源）(Kagoshima et al. 1993（)圖亞基的 RUNX1、RUNX2 和 RUNX3 可以與作為 β 亞基的轉(zhuǎn)錄因子 PEBP成異二聚體，通過Runt結(jié)構(gòu)域特異性地識別DNA保守序列PyGPyGGTPhimoto 1998)。CBFβ 可以增強(qiáng) RUNX 家族成員與 DNA 的結(jié)合能力，保持穩(wěn)定，避免 RUNX 蛋白的降解。CBFβ 缺失型小鼠與 RUNX1 缺失型小全一致(Okuda et al. 1996; Wang et al. 1996)。與 RUNX1 相似，在嚴(yán)重的常發(fā)現(xiàn)由染色體易位造成的 CBFβ 變異(Ito 2004)。并且 CBFβ 可以與 R調(diào)節(jié)骨骼的形成(Yoshida et al. 2002; Komori 2015)。然而，CBFβ 的表達(dá)X 表達(dá)模式一致，因此有研究者推測 CBFβ 和 RUNX 可能具有相互獨(dú)立設(shè)還需要進(jìn)一步的試驗(yàn)證明。除此之外，RUNX 家族成員還可以與多梳olycomb repressive complex 1，PRC1）(Yu et al. 2012)、組蛋白去乙酰化酶lases ， HDACs ） (Guo and Friedman 2011) 、賴氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶 2Aransferase 2A，KMT2A，又稱 MLL）(Huang et al. 2011a)以及轉(zhuǎn)錄激活因乙酰轉(zhuǎn)移酶(Wee et al. 2008)結(jié)合，增強(qiáng)轉(zhuǎn)錄活性。

基因全長大約 220 kb，包含 8 個外顯子；而 RUNX3 是長度最短的基因，約有 67 kb 長，包含 6 個外顯子(Levanon et al. 1994; Zhang et al. 1997; Levanon and Groner 2004)。基于基因結(jié)構(gòu)的復(fù)雜程度，推測 RUNX3 是 RUNX 家族中 3 個基因中最原始、最保守的一個(Bangsow et al. 2001)，然而仍然需要更加詳細(xì)準(zhǔn)確的遺傳進(jìn)化分析結(jié)果來驗(yàn)證這一推測(Rennert et al. 2003)。由于 RUNX1、RUNX2 和 RUNX3 均擁有 2 個不同的啟動子（P和 P2）、多個 polyA 位點(diǎn)、以及外顯子遺漏選擇性剪接事件的發(fā)生，因此形成了多種可變剪接體，使 RUNX 的功能更加復(fù)雜化、多樣化(Wang et al. 2010a)（圖 1-3）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Advances in circulating microRNAs as diagnostic and prognostic markers for ovarian cancer[J]. Hong Zheng,Jia-Yu Liu,Feng-Ju Song,Ke-Xin Chen.  Cancer Biology & Medicine. 2013(03)

博士論文
[1]奶山羊卵巢顆粒細(xì)胞中TIMP3基因的表達(dá)調(diào)控及功能研究[D]. 彭甲銀.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[2]多羔和單羔奶山羊發(fā)情期卵巢組織差異表達(dá)基因的篩選、鑒定及分析[D]. 朱廣琴.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2011



本文編號：3004689