豬是人類最主要的肉用家畜,全世界豬肉的產(chǎn)量占肉類總產(chǎn)量的40%以上。我國是世界第一養(yǎng)豬大國,生豬的飼養(yǎng)量超過了全世界總飼養(yǎng)量的一半,養(yǎng)豬業(yè)在農(nóng)業(yè)和整個(gè)國民經(jīng)濟(jì)中都占有十分重要的地位。此外,它在生理和解剖方面接近于人類,可以作為人類器官移植的理想供體來源。體外受精、核移植、器官移植等胚胎工程技術(shù)的研究和應(yīng)用越來越廣泛,卵母細(xì)胞體外培育的質(zhì)量是決定胚胎生物工程研究和應(yīng)用成敗的關(guān)鍵因素之一,但至今卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)的成熟效果仍然很不穩(wěn)定。孤雌激活能夠?yàn)樘骄颗咛ピ缙诎l(fā)育機(jī)理、分析發(fā)育過程中相關(guān)基因功能等提供良好的實(shí)驗(yàn)材料。目前對(duì)豬卵母細(xì)胞孤雌激活方法和相關(guān)激活參數(shù)的研究已經(jīng)比較成熟,但在激活后孤雌胚的體外培養(yǎng)仍然存在著一些難以攻克的難關(guān),例如如何打破四細(xì)胞期的發(fā)育阻滯,如何提高其發(fā)育到囊胚的成功率、降低卵裂的畸形率等,這些都是亟待解決的問題。本研究對(duì)影響豬卵母細(xì)胞體外成熟效果及孤雌胚胎體外發(fā)育的因素進(jìn)行研究,以期為豬卵母細(xì)胞體外成熟及胚胎體外發(fā)育相關(guān)機(jī)制研究提供參考依據(jù),該研究對(duì)胚胎工程及人類器官移植的發(fā)展具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。本試驗(yàn)通過對(duì)豬卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)和孤雌激活后的胚胎在體外培養(yǎng)過程中進(jìn)... 

【文章來源】：陜西師范大學(xué)陜西省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮寫對(duì)照表
第1章 前言
    1.1 豬卵母細(xì)胞體外成熟影響因素研究進(jìn)展
        1.1.1 卵巢的采集及轉(zhuǎn)運(yùn)對(duì)卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)效果的影響
        1.1.2 卵母細(xì)胞的收集方法對(duì)卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)效果的影響
        1.1.3 不同培養(yǎng)基配方對(duì)卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)效果的影響
        1.1.4 培養(yǎng)條件對(duì)卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)效果的影響
    1.2 豬孤雌胚胎體外發(fā)育的研究進(jìn)展
        1.2.1 孤雌激活方法對(duì)豬孤雌胚胎體外發(fā)育的影響
        1.2.2 卵母細(xì)胞的卵齡對(duì)豬孤雌胚胎體外發(fā)育的影響
        1.2.3 培養(yǎng)條件對(duì)豬孤雌胚胎體外發(fā)育的影響
    1.3 基因CDX2、GLUT1、HSP70和ploy A的功能及其對(duì)卵母細(xì)胞體外發(fā)育影響的可能性
        1.3.1 CDX2基因
        1.3.2 GLUT1基因
        1.3.3 HSP70基因
    1.4 本研究的目的和意義
第2章 EGF對(duì)豬卵母細(xì)胞體外成熟及孤雌胚胎發(fā)育的影響
    2.1 材料試劑
        2.1.1 主要的儀器及耗材
        2.1.2 主要試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 豬卵母細(xì)胞的采集和體外成熟培養(yǎng)
        2.2.2 卵母細(xì)胞的孤雌激活
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.4 討論
第3章 LIF對(duì)豬卵母細(xì)胞體外成熟及孤雌胚胎發(fā)育的影響
    3.1 材料試劑
        3.1.1 主要的儀器及耗材
        3.1.2 主要試劑
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 豬卵母細(xì)胞的采集和體外成熟培養(yǎng)
        3.2.2 孤雌激活
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 比較成熟培養(yǎng)基中添加不同濃度LIF對(duì)卵母細(xì)胞體外成熟及孤雌胚胎體外發(fā)育的影響
        3.3.2 比較胚胎培養(yǎng)基中添加不同濃度的LIF對(duì)孤雌胚胎體外發(fā)育的影響
        3.3.3 比較成熟培養(yǎng)基及胚胎培養(yǎng)基中均添加不同濃度的LIF對(duì)孤雌胚胎體外發(fā)育的影響
    3.4 討論
第4章 卵丘細(xì)胞對(duì)豬卵母細(xì)胞體外成熟及孤雌胚胎發(fā)育的影響
    4.1 材料試劑
        4.1.1 主要的儀器及耗材
        4.1.2 主要試劑
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 豬卵母細(xì)胞的采集和體外成熟培養(yǎng)
        4.2.2 孤雌激活
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.4 討論
第5章 基因GLUT1、CDX2、HSP70和ploy A的表達(dá)分析
    5.1 材料試劑
        5.1.1 主要的儀器設(shè)備
        5.1.2 主要試劑
    5.2 試驗(yàn)方法
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)方案
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備
        5.2.3 RNA的提取
        5.2.4 cDNA第一鏈的合成
        5.2.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR進(jìn)行基因表達(dá)的分析
    5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.3.1 基因GLUT1、CDX2、HSP70和ploy A在不同濃度LIF處理后的成熟卵母細(xì)胞間的表達(dá)
        5.3.2 基因GLUT1、CDX2、HSP70和ployA在卵母細(xì)胞及孤雌胚胎不同發(fā)育階段的表達(dá)
    5.4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間的發(fā)表文章


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3004351