發(fā)布時間：2021-01-25 12:21

　　馬立克氏病病毒（Marek’s disease virus,MDV）糖蛋白C（glycoprotein C,gC）是參與MDV水平傳播的重要毒力因子,但其具體作用機制尚未明確。研究gC蛋白所需的抗體在國內(nèi)未見報道,為簡化抗體制備程序,本研究采用合成抗原肽免疫的策略,通過生物信息學軟件分析發(fā)現(xiàn)gC蛋白的優(yōu)勢抗原表位主要集中在其69～85氨基酸區(qū)段,據(jù)此合成肽段N-NSESTNEHTITETTGKN-C作為抗原免疫日本大耳白兔。在有弗氏佐劑條件下,5次免疫后采集抗血清,斑點印跡試驗顯示制備的抗gC多克隆抗體與合成肽的反應效價為1∶10 000;經(jīng)親和層析柱純化后的gC抗體具有良好的反應特異性,對轉(zhuǎn)染或MDV感染的細胞中運用免疫熒光試驗和免疫印跡技術(shù)均能檢測到特異的陽性信號。與疫苗毒相比,廣西野毒分離株gC蛋白的免疫熒光信號更強。本研究獲得的MDV的gC多克隆抗體可用于后續(xù)對gC蛋白功能的研究。 

【文章來源】：廣西畜牧獸醫(yī). 2020,36(06)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

間接免疫熒光鑒定MDV gC多抗血清的反應特異性

經(jīng)分析,MDV的gC基因相對保守,不同毒株間差異小,其氨基酸序列較為特異,含有3個跨膜區(qū)域,其二級結(jié)構(gòu)多為無規(guī)則卷曲與β折疊,根據(jù)蛋白抗原性分析結(jié)果,選擇69～85氨基酸的區(qū)段為免疫用抗原多肽(圖1)。2.2 gC兔多抗血清效價測定

Dot blot測定抗血清與合成肽的反應效價

【參考文獻】：
期刊論文
[1]兔抗人CXCR3-B分子N端多肽多克隆抗體的制備與初步應用[J]. 高媛,楊金菊,柳曉蘭,劉莉,劉超燕,Gian P.Visentin,高建恩,孫啟鴻.  細胞與分子免疫學雜志. 2006(02)

碩士論文
[1]ALV引起的免疫抑制對馬立克氏病疫苗免疫保護效果的影響[D]. 林璐璐.廣西大學 2018



本文編號：2999214