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不同宿主感染REV情況調(diào)查及分離株gp90基因序列分析

發(fā)布時(shí)間:2021-01-23 23:25
  網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥(Reticuloendotheliosis, RE)是指由網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病毒(Reticuloendotheliosis virus, REV)引起的禽類(lèi)的一種重要的免疫抑制病和致瘤性疾病,包括急性網(wǎng)狀細(xì)胞腫瘤、生長(zhǎng)抑制、淋巴組織和其他組織慢性腫瘤形成的病理綜合癥。REV不僅可以單獨(dú)使禽類(lèi)致病,也可與其他疾病混和感染,降低禽類(lèi)對(duì)其他疾病的抵抗力,給禽類(lèi)養(yǎng)殖業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。REV的常見(jiàn)宿主為雞、鴨等家禽,同時(shí)REV亦可感染野生鳥(niǎo)類(lèi)。為了解不同宿主對(duì)REV的感染情況,從全國(guó)各地采集了不同宿主來(lái)源的樣品1563份,對(duì)其進(jìn)行初步PCR檢測(cè),從不同宿主來(lái)源的樣品中得到68份陽(yáng)性樣品,將陽(yáng)性樣品適當(dāng)處理后接種DF-1細(xì)胞,利用IFA、PCR復(fù)檢等方法檢測(cè)后得到7株REV分離株,分別為CH120057株、CH120099株、CH120220株、CH120276株、CH120277株、WB11042株和WB11043株。分別從不同宿主陽(yáng)性檢出率和分離率、不同品種的雞陽(yáng)性檢出率、不同品種的野鳥(niǎo)的陽(yáng)性檢出率和不同品種的水禽檢出率4個(gè)角度對(duì)不同宿主來(lái)源感染REV的情況進(jìn)行分析,推斷... 

【文章來(lái)源】:東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 課題背景
    1.2 禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥研究進(jìn)展
        1.2.1 病原學(xué)
        1.2.2 癥狀與病變
        1.2.3 REV的危害
        1.2.4 診斷
        1.2.5 REV預(yù)防和控制
    1.3 REV的流行病學(xué)研究進(jìn)展
        1.3.1 發(fā)生與分布
        1.3.2 病毒的傳播
        1.3.3 REV的流行特征及趨勢(shì)
        1.3.4 野生鳥(niǎo)類(lèi)對(duì)疾病的傳播
    1.4 本研究的主要目的和意義
2 不同宿主禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥的流行病學(xué)調(diào)查
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)樣品
        2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.3 主要試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 樣品的處理
        2.2.2 PCR初篩
        2.2.3 病毒分離與鑒定
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 PCR初篩陽(yáng)性樣品
        2.3.2 REV的分離和鑒定
        2.3.3 不同種宿主樣品中REV檢測(cè)結(jié)果
    2.4 討論
        2.4.1 REV總的陽(yáng)性檢出率與分離率的比較分析
        2.4.2 不同品種雞REV陽(yáng)性檢出率與分離率的比較分析
        2.4.3 不同品種野生鳥(niǎo)類(lèi)陽(yáng)性檢出率與分離率的比較分析
        2.4.4 不同品種水禽陽(yáng)性檢出率與分離率的比較分析
        2.4.5 不同宿主REV陽(yáng)性檢出率與分離率的比較分析
3 REV分離株的gp90基因克隆及序列分析
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 試驗(yàn)樣品
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 病毒前DNA提取
        3.2.2 PCR實(shí)驗(yàn)
        3.2.3 PCR產(chǎn)物回收和純化
        3.2.4 連接
        3.2.5 轉(zhuǎn)化
        3.2.6 陽(yáng)性重組質(zhì)粒鑒定
        3.2.7 序列測(cè)定與分析
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 重組質(zhì)粒PCR結(jié)果
        3.3.2 測(cè)序結(jié)果
        3.3.3 基因序列的比較和分析
    3.4 討論
4 結(jié)論
附錄1
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒TaqMan探針熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用[J]. 李凱,高宏雷,高立,祁小樂(lè),高玉龍,徐延偉,王笑梅.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2010(11)
[3]我國(guó)部分地區(qū)蛋雞群ALV-J及與REV、MDV、CAV混合感染檢測(cè)[J]. 秦立廷,高玉龍,潘偉,鄧小蕓,孫芬芬,李凱,祁小樂(lè),高宏雷,劉超男,王笑梅.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(02)
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博士論文
[1]網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒的分子流行病學(xué)調(diào)查及其在宿主免疫選擇壓下的分子變異[D]. 王玉.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005



本文編號(hào):2996111

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