不同宿主感染REV情況調(diào)查及分離株gp90基因序列分析
發(fā)布時間:2021-01-23 23:25
網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥(Reticuloendotheliosis, RE)是指由網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病毒(Reticuloendotheliosis virus, REV)引起的禽類的一種重要的免疫抑制病和致瘤性疾病,包括急性網(wǎng)狀細胞腫瘤、生長抑制、淋巴組織和其他組織慢性腫瘤形成的病理綜合癥。REV不僅可以單獨使禽類致病,也可與其他疾病混和感染,降低禽類對其他疾病的抵抗力,給禽類養(yǎng)殖業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失。REV的常見宿主為雞、鴨等家禽,同時REV亦可感染野生鳥類。為了解不同宿主對REV的感染情況,從全國各地采集了不同宿主來源的樣品1563份,對其進行初步PCR檢測,從不同宿主來源的樣品中得到68份陽性樣品,將陽性樣品適當處理后接種DF-1細胞,利用IFA、PCR復(fù)檢等方法檢測后得到7株REV分離株,分別為CH120057株、CH120099株、CH120220株、CH120276株、CH120277株、WB11042株和WB11043株。分別從不同宿主陽性檢出率和分離率、不同品種的雞陽性檢出率、不同品種的野鳥的陽性檢出率和不同品種的水禽檢出率4個角度對不同宿主來源感染REV的情況進行分析,推斷...
【文章來源】:東北林業(yè)大學黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
1.1 課題背景
1.2 禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥研究進展
1.2.1 病原學
1.2.2 癥狀與病變
1.2.3 REV的危害
1.2.4 診斷
1.2.5 REV預(yù)防和控制
1.3 REV的流行病學研究進展
1.3.1 發(fā)生與分布
1.3.2 病毒的傳播
1.3.3 REV的流行特征及趨勢
1.3.4 野生鳥類對疾病的傳播
1.4 本研究的主要目的和意義
2 不同宿主禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥的流行病學調(diào)查
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗樣品
2.1.2 主要實驗儀器
2.1.3 主要試劑
2.2 實驗方法
2.2.1 樣品的處理
2.2.2 PCR初篩
2.2.3 病毒分離與鑒定
2.3 實驗結(jié)果
2.3.1 PCR初篩陽性樣品
2.3.2 REV的分離和鑒定
2.3.3 不同種宿主樣品中REV檢測結(jié)果
2.4 討論
2.4.1 REV總的陽性檢出率與分離率的比較分析
2.4.2 不同品種雞REV陽性檢出率與分離率的比較分析
2.4.3 不同品種野生鳥類陽性檢出率與分離率的比較分析
2.4.4 不同品種水禽陽性檢出率與分離率的比較分析
2.4.5 不同宿主REV陽性檢出率與分離率的比較分析
3 REV分離株的gp90基因克隆及序列分析
3.1 實驗材料
3.1.1 試驗樣品
3.1.2 實驗儀器
3.1.3 實驗試劑
3.2 實驗方法
3.2.1 病毒前DNA提取
3.2.2 PCR實驗
3.2.3 PCR產(chǎn)物回收和純化
3.2.4 連接
3.2.5 轉(zhuǎn)化
3.2.6 陽性重組質(zhì)粒鑒定
3.2.7 序列測定與分析
3.3 實驗結(jié)果
3.3.1 重組質(zhì)粒PCR結(jié)果
3.3.2 測序結(jié)果
3.3.3 基因序列的比較和分析
3.4 討論
4 結(jié)論
附錄1
參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]東北地區(qū)野生鳥類B亞群禽白血病的分子流行病學調(diào)查及env基因的序列分析[J]. 李德龍,劉婉思,楊波,高奇,曾祥偉,秦立廷,高宏雷,劉思當,高玉龍,王笑梅. 中國獸醫(yī)科學. 2013(02)
[2]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒TaqMan探針熒光定量PCR檢測方法的建立及應(yīng)用[J]. 李凱,高宏雷,高立,祁小樂,高玉龍,徐延偉,王笑梅. 中國獸醫(yī)科學. 2010(11)
[3]我國部分地區(qū)蛋雞群ALV-J及與REV、MDV、CAV混合感染檢測[J]. 秦立廷,高玉龍,潘偉,鄧小蕓,孫芬芬,李凱,祁小樂,高宏雷,劉超男,王笑梅. 中國預(yù)防獸醫(yī)學報. 2010(02)
[4]鴨群中REV感染的流行病學調(diào)查[J]. 倪楠,崔治中. 微生物學報. 2008(04)
[5]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒囊膜蛋白基因的克隆及其原核表達[J]. 瞿曉蘭,王宏俊,陳小玲,章振華. 華北農(nóng)學報. 2006(S1)
[6]禽痘疫苗病毒中網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒5′LTR整合位點序列分析[J]. 于立娟,崔治中. 微生物學報. 2006(04)
[7]網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒中國分離株HA9901全基因組核苷酸序列的測定與分析[J]. 王玉,崔治中,姜世金. 中國科學(C輯:生命科學). 2005(04)
[8]我國自然發(fā)病雞群中MDV、REV和CAV共感染的檢測[J]. 姜世金,孟珊珊,崔治中,田夫林,王增福. 中國病毒學. 2005(02)
[9]用單抗介導的免疫熒光試驗檢測組織切片中的禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒[J]. 張志,王錫樂,莊國慶,崔治中. 中國獸醫(yī)學報. 2005(02)
[10]Isolation of recombinant field strains of Marek’s disease virus integrated with reticuloendotheliosis virus genome fragments[J]. ZHANG Zhi & CUI Zhizhong Department of Preventive Veterinary Medicine, College of Animal Science and Veterinary Medicine, Shandong Agriculture University, Taian 271018, China. Science in China(Series C:Life Sciences). 2005(01)
博士論文
[1]網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒的分子流行病學調(diào)查及其在宿主免疫選擇壓下的分子變異[D]. 王玉.山東農(nóng)業(yè)大學 2005
本文編號:2996111
【文章來源】:東北林業(yè)大學黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學位級別】:碩士
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Abstract
1 緒論
1.1 課題背景
1.2 禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥研究進展
1.2.1 病原學
1.2.2 癥狀與病變
1.2.3 REV的危害
1.2.4 診斷
1.2.5 REV預(yù)防和控制
1.3 REV的流行病學研究進展
1.3.1 發(fā)生與分布
1.3.2 病毒的傳播
1.3.3 REV的流行特征及趨勢
1.3.4 野生鳥類對疾病的傳播
1.4 本研究的主要目的和意義
2 不同宿主禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥的流行病學調(diào)查
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗樣品
2.1.2 主要實驗儀器
2.1.3 主要試劑
2.2 實驗方法
2.2.1 樣品的處理
2.2.2 PCR初篩
2.2.3 病毒分離與鑒定
2.3 實驗結(jié)果
2.3.1 PCR初篩陽性樣品
2.3.2 REV的分離和鑒定
2.3.3 不同種宿主樣品中REV檢測結(jié)果
2.4 討論
2.4.1 REV總的陽性檢出率與分離率的比較分析
2.4.2 不同品種雞REV陽性檢出率與分離率的比較分析
2.4.3 不同品種野生鳥類陽性檢出率與分離率的比較分析
2.4.4 不同品種水禽陽性檢出率與分離率的比較分析
2.4.5 不同宿主REV陽性檢出率與分離率的比較分析
3 REV分離株的gp90基因克隆及序列分析
3.1 實驗材料
3.1.1 試驗樣品
3.1.2 實驗儀器
3.1.3 實驗試劑
3.2 實驗方法
3.2.1 病毒前DNA提取
3.2.2 PCR實驗
3.2.3 PCR產(chǎn)物回收和純化
3.2.4 連接
3.2.5 轉(zhuǎn)化
3.2.6 陽性重組質(zhì)粒鑒定
3.2.7 序列測定與分析
3.3 實驗結(jié)果
3.3.1 重組質(zhì)粒PCR結(jié)果
3.3.2 測序結(jié)果
3.3.3 基因序列的比較和分析
3.4 討論
4 結(jié)論
附錄1
參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]東北地區(qū)野生鳥類B亞群禽白血病的分子流行病學調(diào)查及env基因的序列分析[J]. 李德龍,劉婉思,楊波,高奇,曾祥偉,秦立廷,高宏雷,劉思當,高玉龍,王笑梅. 中國獸醫(yī)科學. 2013(02)
[2]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒TaqMan探針熒光定量PCR檢測方法的建立及應(yīng)用[J]. 李凱,高宏雷,高立,祁小樂,高玉龍,徐延偉,王笑梅. 中國獸醫(yī)科學. 2010(11)
[3]我國部分地區(qū)蛋雞群ALV-J及與REV、MDV、CAV混合感染檢測[J]. 秦立廷,高玉龍,潘偉,鄧小蕓,孫芬芬,李凱,祁小樂,高宏雷,劉超男,王笑梅. 中國預(yù)防獸醫(yī)學報. 2010(02)
[4]鴨群中REV感染的流行病學調(diào)查[J]. 倪楠,崔治中. 微生物學報. 2008(04)
[5]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒囊膜蛋白基因的克隆及其原核表達[J]. 瞿曉蘭,王宏俊,陳小玲,章振華. 華北農(nóng)學報. 2006(S1)
[6]禽痘疫苗病毒中網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒5′LTR整合位點序列分析[J]. 于立娟,崔治中. 微生物學報. 2006(04)
[7]網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒中國分離株HA9901全基因組核苷酸序列的測定與分析[J]. 王玉,崔治中,姜世金. 中國科學(C輯:生命科學). 2005(04)
[8]我國自然發(fā)病雞群中MDV、REV和CAV共感染的檢測[J]. 姜世金,孟珊珊,崔治中,田夫林,王增福. 中國病毒學. 2005(02)
[9]用單抗介導的免疫熒光試驗檢測組織切片中的禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒[J]. 張志,王錫樂,莊國慶,崔治中. 中國獸醫(yī)學報. 2005(02)
[10]Isolation of recombinant field strains of Marek’s disease virus integrated with reticuloendotheliosis virus genome fragments[J]. ZHANG Zhi & CUI Zhizhong Department of Preventive Veterinary Medicine, College of Animal Science and Veterinary Medicine, Shandong Agriculture University, Taian 271018, China. Science in China(Series C:Life Sciences). 2005(01)
博士論文
[1]網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒的分子流行病學調(diào)查及其在宿主免疫選擇壓下的分子變異[D]. 王玉.山東農(nóng)業(yè)大學 2005
本文編號:2996111
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