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利用BmNPV Bac-to-Bac系統(tǒng)在家蠶體內(nèi)表達狂犬病毒M蛋白及抗體制備

發(fā)布時間:2021-01-21 03:01
  桿狀病毒表達載體系統(tǒng)(Baculovirus Expression Vector System,BEVS)是將外源目的基因?qū)霔U狀病毒基因組,獲得重組病毒,然后以此作為載體感染昆蟲幼蟲或其培養(yǎng)細胞。Bac-to-Bac表達系統(tǒng)通過位點特異性轉(zhuǎn)座,在大腸桿菌內(nèi)完成桿狀病毒基因組的重組。BmNPV Bac-to-Bac桿狀病毒表達系統(tǒng)由于能夠以家蠶為載體大量表達外源蛋白,且省時省力,是制備生物活性蛋白的優(yōu)良選擇?袢《荆≧abies Virus,RV)M基因ORF為609個核苷酸,編碼202個氨基酸殘基的基質(zhì)蛋白,分子量約25 KD,其在子代病毒的裝配、出芽和形態(tài)形成中起重要作用。本研究利用BmNPV Bac-to-Bac表達系統(tǒng)表達了重組的RVM(rRV-M)蛋白,將純化的rRV-M蛋白作為抗原免疫小鼠,對制備出的血清抗體進行間接ELISA效價測定。本研究結(jié)果可以為RVM蛋白的功能探索提供抗原和抗體來源,也能為家蠶生物反應(yīng)器的開發(fā)利用提供參考。研究的具體內(nèi)容及結(jié)果如下:1、通過將RV M基因的ORF定向克隆到供體質(zhì)粒pFastBacHTA上,構(gòu)建重組供體質(zhì)粒pFastBacHTA-M;... 

【文章來源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】:62 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

利用BmNPV Bac-to-Bac系統(tǒng)在家蠶體內(nèi)表達狂犬病毒M蛋白及抗體制備


圖3-3重組桿粒rBacmid-M的藍白斑篩選??Fig.3-3?Screening?of?recombinant?rBacmid-M?by?blue-white?spot??

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圖3-4重組桿粒riBacmid-M?DNA的PCR鑒定??Fig.3-4?Identification?of?recombinant?rBacmid-M?DNA?by?PCR??

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圖3-8?RV?M在家香內(nèi)表達western?blot分析??Fi.3-8?western?blot?Analsis?of?RV?M?Exression?in?Silkworm??


本文編號:2990323

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