發(fā)布時間：2021-01-20 17:15

　　為了準確快速檢測豬源肉孢子蟲的種類,本研究根據(jù)米氏肉孢子蟲和豬人肉孢子蟲的18S rRNA基因序列設(shè)計雙重套式PCR引物,優(yōu)化并建立能夠同時檢測這兩種豬源肉孢子蟲的雙重套式PCR方法。結(jié)果顯示,雙重套式PCR對米氏肉孢子蟲和豬人肉孢子蟲擴增產(chǎn)物的大小分別為415 bp和591 bp,而對枯氏肉孢子蟲、剛地弓形蟲、犬新孢子蟲的檢測結(jié)果均為陰性,對兩種豬源肉孢子蟲重組質(zhì)粒標準品的檢測下限均為5拷貝/μL,表明該雙重套式PCR具有較強的特異性和較高的敏感性。利用本研究建立的方法隨機對22份豬肉樣品的檢測結(jié)果顯示,本研究建立的方法與肌肉壓片鏡檢法的陽性符合率為100%,陰性符合率為89.5%,總符合率為90.9%,本研究建立的雙重套式PCR方法可以實現(xiàn)對豬肉樣品中米氏肉孢子蟲和豬人肉孢子蟲的快速檢測。 

【文章來源】：中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2020,42(07)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【圖文】：

豬源肉孢子蟲雙重套式PCR擴增結(jié)果

豬源肉孢子蟲雙重套式PCR特異性試驗結(jié)果。

雙重套式PCR對22份豬肉樣品的檢測結(jié)果顯示，有5份樣品為米氏肉孢子蟲陽性，沒有檢測出豬人肉孢子蟲，17份陰性樣品；肌肉壓片鏡檢結(jié)果顯示，有3份樣品為肉孢子蟲陽性，19份樣品為陰性。經(jīng)計算，本研究建立的多重套式PCR方法與肌肉壓片鏡檢陽性符合率為100%，陰性符合率為89.5%，總體符合率為90.9%（表2）。表明本研究建立的雙重套式PCR方法比肌肉壓片鏡檢具有更高的敏感性，可用于臨床樣品的檢測。3 討論

【參考文獻】：
期刊論文
[1]洛陽市區(qū)豬源肉孢子蟲調(diào)查及分子病原鑒定[J]. 薛瑞,韓利方,錢偉鋒,何斌,閆文朝.  河南科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2018(04)
[2]三種致奶牛流產(chǎn)病原多重巢式PCR檢測方法的建立[J]. 宋少甫,薛瑞,錢偉鋒,閆文朝,王天奇,韓利方,呂超超.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2017(04)
[3]豬住肉孢子蟲病診斷技術(shù)的研究進展[J]. 禚振男,唐妍,郭平,徐晶晶,王子靜,劉丹丹,陶建平,許金俊.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2016(03)
[4]豬住肉孢子蟲病的研究進展[J]. 李小軍,韓利方,閆文朝,王天奇.  中國人獸共患病學(xué)報. 2012(07)
[5]人肉孢子蟲病的研究進展[J]. 胡俊杰,孟余,陳新文,左仰賢,武鵬.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2010(06)
[6]羊附紅細胞體巢式PCR檢測方法的建立及臨床應(yīng)用[J]. 趙曉薇,巴彩鳳,蘇玉虹,蘇榮健,馮會權(quán).  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2008(07)



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