為了準(zhǔn)確快速檢測(cè)豬源肉孢子蟲(chóng)的種類(lèi),本研究根據(jù)米氏肉孢子蟲(chóng)和豬人肉孢子蟲(chóng)的18S rRNA基因序列設(shè)計(jì)雙重套式PCR引物,優(yōu)化并建立能夠同時(shí)檢測(cè)這兩種豬源肉孢子蟲(chóng)的雙重套式PCR方法。結(jié)果顯示,雙重套式PCR對(duì)米氏肉孢子蟲(chóng)和豬人肉孢子蟲(chóng)擴(kuò)增產(chǎn)物的大小分別為415 bp和591 bp,而對(duì)枯氏肉孢子蟲(chóng)、剛地弓形蟲(chóng)、犬新孢子蟲(chóng)的檢測(cè)結(jié)果均為陰性,對(duì)兩種豬源肉孢子蟲(chóng)重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的檢測(cè)下限均為5拷貝/μL,表明該雙重套式PCR具有較強(qiáng)的特異性和較高的敏感性。利用本研究建立的方法隨機(jī)對(duì)22份豬肉樣品的檢測(cè)結(jié)果顯示,本研究建立的方法與肌肉壓片鏡檢法的陽(yáng)性符合率為100%,陰性符合率為89.5%,總符合率為90.9%,本研究建立的雙重套式PCR方法可以實(shí)現(xiàn)對(duì)豬肉樣品中米氏肉孢子蟲(chóng)和豬人肉孢子蟲(chóng)的快速檢測(cè)。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2020,42(07)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【圖文】：

豬源肉孢子蟲(chóng)雙重套式PCR擴(kuò)增結(jié)果

豬源肉孢子蟲(chóng)雙重套式PCR特異性試驗(yàn)結(jié)果。

雙重套式PCR對(duì)22份豬肉樣品的檢測(cè)結(jié)果顯示，有5份樣品為米氏肉孢子蟲(chóng)陽(yáng)性，沒(méi)有檢測(cè)出豬人肉孢子蟲(chóng)，17份陰性樣品；肌肉壓片鏡檢結(jié)果顯示，有3份樣品為肉孢子蟲(chóng)陽(yáng)性，19份樣品為陰性。經(jīng)計(jì)算，本研究建立的多重套式PCR方法與肌肉壓片鏡檢陽(yáng)性符合率為100%，陰性符合率為89.5%，總體符合率為90.9%（表2）。表明本研究建立的雙重套式PCR方法比肌肉壓片鏡檢具有更高的敏感性，可用于臨床樣品的檢測(cè)。3 討論

【參考文獻(xiàn)】：
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