犢牛與成年牛卵泡液差異蛋白質(zhì)組學(xué)分析
發(fā)布時(shí)間:2021-01-20 11:23
幼畜體外胚胎培養(yǎng)體系(JIVET)對(duì)于充分挖掘優(yōu)良母畜的生產(chǎn)潛能具有重要意義,不僅有助于加快遺傳改良的進(jìn)程,而且對(duì)于商品化胚胎生產(chǎn)也是具有重大的推動(dòng)作用。犢牛卵母細(xì)胞體外發(fā)育能力遠(yuǎn)低于成年牛,卵泡液是卵母細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的微環(huán)境,卵母細(xì)胞體外發(fā)育潛能與卵泡液中蛋白成分緊密相關(guān)。本研究以超數(shù)排卵后犢牛和成年牛卵泡液為研究對(duì)象,利用基質(zhì)輔助激光解離串聯(lián)時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)(MALDI-TOFMS)對(duì)卵泡液中多肽進(jìn)行差異分析,并利用雙向電泳技術(shù)對(duì)卵泡液蛋白質(zhì)組學(xué)進(jìn)行差異蛋白比較。通過(guò)這兩種技術(shù)對(duì)卵泡液中蛋白質(zhì)組學(xué)進(jìn)行全面分析,試圖找到與卵母細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)的關(guān)鍵多肽和差異蛋白,為犢牛卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)體系的完善奠定理論基礎(chǔ)。本試驗(yàn)的研究結(jié)果總結(jié)如下。1.采用基質(zhì)輔助激光解離串聯(lián)時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)(MALDI-TOFMS)對(duì)新鮮卵泡液多肽成分進(jìn)行分析。分別成功構(gòu)建了兩組卵泡液的質(zhì)譜多肽信號(hào)峰模型圖譜;在成年牛組中出現(xiàn)30-40個(gè)信號(hào)峰,犢牛中有60-80個(gè);其中成年牛卵泡液有2個(gè)特有信號(hào)峰,核質(zhì)比分別為1218.58(m/z)和1509.77(m/z),犢牛有1個(gè)特有信號(hào)峰,核質(zhì)比為953.54(m/z);利用M...
【文章來(lái)源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:59 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
中英文對(duì)照
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)
1.1 雙向電泳技術(shù)
1.2 質(zhì)譜分析技術(shù)研究進(jìn)展
2 卵泡液的概述
2.1 卵泡液形成過(guò)程
2.2 活性分子對(duì)卵泡液形成調(diào)控
2.3 卵泡液與卵母細(xì)胞
3 卵泡液中蛋白質(zhì)研究進(jìn)展
3.1 質(zhì)譜技術(shù)對(duì)卵泡液中蛋白鑒定
3.2 雙向電泳技術(shù)對(duì)卵泡液中蛋白鑒定
4 研究目的與意義
第二章 MALDI-TOF MS對(duì)超排犢牛和成年牛卵泡液多肽信息分析
1 材料與方法
1.1 主要儀器試劑
1.2 主要試劑
1.3 卵泡液的獲取
1.4 實(shí)驗(yàn)方法
2 結(jié)果與分析
2.1 超數(shù)排卵效果分析
2.2 超排犢牛和成年牛卵泡液多肽參考模型圖譜構(gòu)建
2.3 卵泡液質(zhì)譜峰面積比較
2.4 MASCOT搜庫(kù)對(duì)卵泡液多肽信息鑒定
3 討論
4 結(jié)論
第三章 犢牛與成年牛卵泡液蛋白質(zhì)組學(xué)差異分析
1 材料和方法
1.1 材料與試劑
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
2 結(jié)果與分析
2.1 犢牛和成年牛卵泡液雙向電泳蛋白質(zhì)圖譜構(gòu)建
2.2 犢牛與成年牛卵泡液圖譜總蛋白比較
2.3 犢牛和成年牛卵泡液中差異蛋白分析
3 討論
3.1 轉(zhuǎn)鐵蛋白對(duì)卵泡發(fā)育及卵母細(xì)胞成熟的影響
3.2 卵母細(xì)胞成熟因子mos對(duì)卵泡發(fā)育及卵母細(xì)胞成熟的影響
3.3 BCL2L12對(duì)卵泡發(fā)育及卵母細(xì)胞影響
3.4 腫瘤壞死因子α對(duì)卵泡發(fā)育及卵母細(xì)胞成熟的影響
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]腫瘤壞死因子-α與卵巢反應(yīng)性及妊娠的相關(guān)性探討[J]. 趙敏,李娜,林大凱,程麗平. 中國(guó)生育健康雜志. 2012 (06)
[2]犢牛超數(shù)排卵方法的研究[J]. 鄭自華,毛獻(xiàn)寶,陳寶劍,潘斌,黎江,范曉明,沈創(chuàng),韋英明. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2012(07)
[3]水牛卵泡液液相色譜分離及差異蛋白質(zhì)分析[J]. 付強(qiáng),楊麗,劉振方,張明,盧克煥. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2012(04)
[4]雙向電泳技術(shù)篩選乙肝患者血清中標(biāo)志蛋白[J]. 吳志鵬,謝志勇,林麗彬,柯益彬,李春來(lái). 黑龍江醫(yī)藥科學(xué). 2012(01)
[5]利用MALDI-TOF質(zhì)譜比較水牛卵泡液多肽變化的研究[J]. 付強(qiáng),劉振方,楊麗,張明,盧克煥. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2012(01)
[6]切割穹窿海馬傘后大鼠與正常大鼠海馬蛋白質(zhì)組雙向電泳圖譜比較[J]. 秦建兵,李浩明,金國(guó)華,田美玲,衣昕,譚雪鋒,張新化. 南通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2011(04)
[7]卵泡液蛋白質(zhì)組學(xué)2-DE體系的構(gòu)建與應(yīng)用[J]. 戴國(guó),盧光琇. 激光生物學(xué)報(bào). 2011(03)
[8]“胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒鈉”對(duì)山羊卵母細(xì)胞體外成熟及胚胎發(fā)育的影響[J]. 劉鳳軍,張玉玲,楊自軍,王國(guó)華,張涌. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(28)
[9]人膽汁蛋白質(zhì)組雙向熒光差異凝膠電泳圖譜的建立與差異分析[J]. 陳波,劉小方,鄒聲泉,魯艷軍,汪昕. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2008 (04)
[10]血清蛋白質(zhì)組雙向凝膠電泳技術(shù)的建立[J]. 母昭德,彭詠波,易發(fā)平,邱宗蔭. 重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2006(06)
博士論文
[1]超促排卵周期卵泡發(fā)育特點(diǎn)及卵母細(xì)胞發(fā)育潛能的相關(guān)機(jī)制研究[D]. 吳琰婷.浙江大學(xué) 2008
[2]豬卵母細(xì)胞和早期胚胎中c-mos和Oct-4基因表達(dá)以及RNAi研究[D]. 劉麗清.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[3]人卵泡發(fā)育過(guò)程中卵泡液蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 李黎.第一軍醫(yī)大學(xué) 2007
碩士論文
[1]綿羊卵泡液蛋白的蛋白質(zhì)組學(xué)分析[D]. 徐鐵山.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[2]唾液蛋白質(zhì)組2D-MALDI-TOF/MS的分析及初步應(yīng)用[D]. 申琳琳.重慶醫(yī)科大學(xué) 2008
本文編號(hào):2988954
【文章來(lái)源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:59 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
中英文對(duì)照
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)
1.1 雙向電泳技術(shù)
1.2 質(zhì)譜分析技術(shù)研究進(jìn)展
2 卵泡液的概述
2.1 卵泡液形成過(guò)程
2.2 活性分子對(duì)卵泡液形成調(diào)控
2.3 卵泡液與卵母細(xì)胞
3 卵泡液中蛋白質(zhì)研究進(jìn)展
3.1 質(zhì)譜技術(shù)對(duì)卵泡液中蛋白鑒定
3.2 雙向電泳技術(shù)對(duì)卵泡液中蛋白鑒定
4 研究目的與意義
第二章 MALDI-TOF MS對(duì)超排犢牛和成年牛卵泡液多肽信息分析
1 材料與方法
1.1 主要儀器試劑
1.2 主要試劑
1.3 卵泡液的獲取
1.4 實(shí)驗(yàn)方法
2 結(jié)果與分析
2.1 超數(shù)排卵效果分析
2.2 超排犢牛和成年牛卵泡液多肽參考模型圖譜構(gòu)建
2.3 卵泡液質(zhì)譜峰面積比較
2.4 MASCOT搜庫(kù)對(duì)卵泡液多肽信息鑒定
3 討論
4 結(jié)論
第三章 犢牛與成年牛卵泡液蛋白質(zhì)組學(xué)差異分析
1 材料和方法
1.1 材料與試劑
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
2 結(jié)果與分析
2.1 犢牛和成年牛卵泡液雙向電泳蛋白質(zhì)圖譜構(gòu)建
2.2 犢牛與成年牛卵泡液圖譜總蛋白比較
2.3 犢牛和成年牛卵泡液中差異蛋白分析
3 討論
3.1 轉(zhuǎn)鐵蛋白對(duì)卵泡發(fā)育及卵母細(xì)胞成熟的影響
3.2 卵母細(xì)胞成熟因子mos對(duì)卵泡發(fā)育及卵母細(xì)胞成熟的影響
3.3 BCL2L12對(duì)卵泡發(fā)育及卵母細(xì)胞影響
3.4 腫瘤壞死因子α對(duì)卵泡發(fā)育及卵母細(xì)胞成熟的影響
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]腫瘤壞死因子-α與卵巢反應(yīng)性及妊娠的相關(guān)性探討[J]. 趙敏,李娜,林大凱,程麗平. 中國(guó)生育健康雜志. 2012 (06)
[2]犢牛超數(shù)排卵方法的研究[J]. 鄭自華,毛獻(xiàn)寶,陳寶劍,潘斌,黎江,范曉明,沈創(chuàng),韋英明. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2012(07)
[3]水牛卵泡液液相色譜分離及差異蛋白質(zhì)分析[J]. 付強(qiáng),楊麗,劉振方,張明,盧克煥. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2012(04)
[4]雙向電泳技術(shù)篩選乙肝患者血清中標(biāo)志蛋白[J]. 吳志鵬,謝志勇,林麗彬,柯益彬,李春來(lái). 黑龍江醫(yī)藥科學(xué). 2012(01)
[5]利用MALDI-TOF質(zhì)譜比較水牛卵泡液多肽變化的研究[J]. 付強(qiáng),劉振方,楊麗,張明,盧克煥. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2012(01)
[6]切割穹窿海馬傘后大鼠與正常大鼠海馬蛋白質(zhì)組雙向電泳圖譜比較[J]. 秦建兵,李浩明,金國(guó)華,田美玲,衣昕,譚雪鋒,張新化. 南通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2011(04)
[7]卵泡液蛋白質(zhì)組學(xué)2-DE體系的構(gòu)建與應(yīng)用[J]. 戴國(guó),盧光琇. 激光生物學(xué)報(bào). 2011(03)
[8]“胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒鈉”對(duì)山羊卵母細(xì)胞體外成熟及胚胎發(fā)育的影響[J]. 劉鳳軍,張玉玲,楊自軍,王國(guó)華,張涌. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(28)
[9]人膽汁蛋白質(zhì)組雙向熒光差異凝膠電泳圖譜的建立與差異分析[J]. 陳波,劉小方,鄒聲泉,魯艷軍,汪昕. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2008 (04)
[10]血清蛋白質(zhì)組雙向凝膠電泳技術(shù)的建立[J]. 母昭德,彭詠波,易發(fā)平,邱宗蔭. 重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2006(06)
博士論文
[1]超促排卵周期卵泡發(fā)育特點(diǎn)及卵母細(xì)胞發(fā)育潛能的相關(guān)機(jī)制研究[D]. 吳琰婷.浙江大學(xué) 2008
[2]豬卵母細(xì)胞和早期胚胎中c-mos和Oct-4基因表達(dá)以及RNAi研究[D]. 劉麗清.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[3]人卵泡發(fā)育過(guò)程中卵泡液蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 李黎.第一軍醫(yī)大學(xué) 2007
碩士論文
[1]綿羊卵泡液蛋白的蛋白質(zhì)組學(xué)分析[D]. 徐鐵山.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[2]唾液蛋白質(zhì)組2D-MALDI-TOF/MS的分析及初步應(yīng)用[D]. 申琳琳.重慶醫(yī)科大學(xué) 2008
本文編號(hào):2988954
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